学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

空肠弯曲菌pcDNA3.1（-）-peb1A诱导的细胞免疫应答初步探讨

作　者: 王宜峰
导　师: 孙万邦；李官成
学　校: 遵义医学院
专　业: 免疫学
关键词: 空肠弯曲菌基因疫苗 peb1A 免疫应答
分类号: R392
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 11次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的:探讨CJ pcDNA3.1(-)-peb1A免疫昆明种小鼠后的细胞免疫应答机制及对机体的保护性。方法:(1)重组质粒pcDNA3.1(-)-peb1A的鉴定和大量制备。(2)重组质粒pcDNA3.1(-)-peb1A免疫昆明种小鼠后,采集脾细胞和血清:①采用细胞ELISA法检测小鼠脾T淋巴细胞膜表面分子CD3、CD4、CD8、CD25和CD28。②ELISA检测小鼠血清中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ和TGF-β的水平。③空肠弯曲菌攻击实验:实验组分别于末次免疫后第26天用新鲜培养的CJ菌液灌胃免疫后小鼠,观察灌胃后一周小鼠的发病及死亡情况,并做肠道分泌液细菌培养。结果:(1)重组质粒pcDNA3.1(-)-peb1A PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,为单一条带,大小为812bp;应用Qiagen plasmid Giga Kit大量抽提的纯度为1.929,浓度为2064μg/ml。(2)T淋巴细胞膜表面分子水平的检测结果显示:①CD3中佐剂DNA组高于裸DNA组在第10天有显著性差异(P＜0.05);②CD8中佐剂DNA组高于裸DNA组在第10、20天均有显著性差异(P＜0.05),而裸DNA组高于两对照组仅在第20天有显著性差异(P＜0.05);③CD25中裸DNA组高于NS组在仅第10天有显著性差异(P＜0.05),佐剂DNA组高于裸DNA组仅在第20天有显著性差异(P＜0.05);④CD4及CD28中佐剂DNA组高于裸DNA组在第10、20天均有显著性差异(P＜0.05);⑤在第10、20天各T淋巴细胞膜表面分子中佐剂DNA组高于两对照组,有显著性差异(P＜0.05)。(3)Th1类细胞因子IL-2、IFN-γ,在第10、20、30天,裸DNA组、佐剂DNA组、空载体组及NS组两两相比均无显著性差异(P＞0.05);Th2类细胞因子IL-4、IL-10、TGF-β:①裸DNA组高于两对照组,在IL-4、TGF-β的检测中有显著性差异(P＜0.05),在IL-10的检测中裸DNA组高于NS组有显著性差异(P＜0.05),其裸DNA组高于空载体组仅在第20天有显著性差异(P＜0.05);②佐剂DNA组高于裸DNA组,在IL-4的检测中有显著性差异(P＜0.05),在IL-10的检测中仅在第10、20天有显著性差异(P＜0.05),在TGF-β的检测中仅第20、30天有显著性差异(P＜0.05);③佐剂DNA组高于两对照组,有显著性差异(P＜0.05)。(4)细菌攻击实验:由疾病指数可知,裸DNA组低于两对照组,有显著性差异(P＜0.05);佐剂DNA组低于裸DNA组,有显著性差异(P＜0.05);由肠道分泌液细菌培养结果看出,裸DNA组的细菌指数低于两对照组;佐剂DNA组低于裸DNA组。结论:(1)重组质粒pcDNA3.1(-)-peb1A构建成功。(2)CJ pcDNA3.1(-)-peb1A疫苗能够诱导有效的细胞免疫应答。

全文目录

1 CJ pcDNA3.1(-)-peb1A诱导的细胞免疫应答初步探讨  4-40
  1.1 英汉缩略词对照表  4-5
  1.2 中文摘要  5-6
  1.3 英文摘要  6-8
  1.4 前言  8-10
  1.5 材料与方法  10-21
  1.6 结果  21-30
  1.7 讨论  30-36
  1.8 结论  36-37
  1.9 参考文献  37-40
2 基因免疫的免疫特性及其免疫机制的研究(综述)  40-47
  参考文献  45-47
3 致谢  47

空肠弯曲菌pcDNA3.1（-）-peb1A诱导的细胞免疫应答初步探讨

内容摘要

全文目录

相似论文