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苎麻高效再生体系的建立及相关生理指标的研究

作　者: 曹雅琴
导　师: 郭清泉
学　校: 湖南农业大学
专　业: 作物遗传育种
关键词: 苎麻 愈伤组织 不定芽 再生体系 可溶性蛋白质 POD酶
分类号: S567.239
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 46次
引　用: 1次
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内容摘要


以湘苎2号、湘苎3号、新宁青麻、四川珙县园麻的叶片为材料,研究了激素组合、蔗糖、AgNO3、Na2S2O3浓度对苎麻叶片愈伤组织诱导及不定芽分化的影响。并研究了湘苎2号组织培养过程中激素组合、蔗糖、AgNO3、Na2S2O3浓度对可溶性蛋白质含量、过氧化酶活性变化的影响,为了解苎麻组织培养中器官分化的机理提供生理依据。主要结果如下:1经MS培养基中添加不同激素浓度组合的配比试验,构建了湘苎2号、湘苎3号、新宁青麻、四川珙县园麻高效、稳定的再生体系。各品种适于分化的最适培养基为:湘苎2号MS+0.7 mg/L TDZ+0.02 mg/L 2,4-D,湘苎3号MS+0.3 mg/L TDZ+0.01mg/L 2,4-D,新宁青麻MS+0.3 mg/L TDZ+0.05 mg/L 2,4-D,四川珙县园麻MS+0.9mg/L TDZ+0.05 mg/L 2,4-D;不定芽分化率分别为:湘苎2号83.3%,湘苎3号81.7%,新宁青麻90%,四川珙县园麻86.7%;4个品种再分化时出现丛生芽,其中新宁青麻愈伤组织的平均再生不定芽数达2.62,其他3个品种也有不同水平的丛生芽出现。适合的不定芽生根培养基四个品种均为MS+0.05 mg/L NAA,生根快,不定芽成活率高。2 4个品种离体叶块经6%蔗糖预培养2周,能提高湘苎2号、新宁青麻、四川珙县园麻不定芽分化率、平均再生不定芽数。而湘苎3号叶片在高浓度蔗糖条件下容易褐化,它的最适蔗糖浓度是3%。3培养基中添加1.5 mg/L AgNO3,能提高湘苎3号的平均再生不定芽数,但AgNO3抑制湘苎2号、新宁青麻、四川珙县园麻诱导愈伤组织及分化不定芽。在添加1.5 mg/LNa2S2O3培养基中,湘苎2号、四川珙县园麻、新宁青麻的不定芽分化率略有提高,Na2S2O3抑制湘苎3号分化不定芽。4湘苎2号培养在添加0.7 mg/L TDZ+0.02 mg/L 2,4-D的培养基中,可溶性蛋白质含量、POD酶活性形成两个明显的峰值,先上升达到第一个峰值再下降,然后再上升又下降,峰值出现时间与愈伤组织的诱导和不定芽的分化同期。5湘苎2号在添加不同蔗糖浓度的培养基中预培养2周,经6%蔗糖预培养有利于可溶性蛋白质的形成,可溶性蛋白质、POD酶活性形成两个明显的峰值,且都比对照的峰值高,峰值与愈伤组织的诱导和不定芽的分化成正相关。6湘苎2号在添加不同浓度AgNO3的培养基中培养,POD酶活性低,随着AgNO3浓度的升高,可溶性蛋白质含量和POD酶活性降低。AgNO3不利于可溶性蛋白质的形成。7湘苎2号在添加1.5 mg/L Na2S2O3的培养基中,可溶性蛋白质含量和POD酶活性高于对照,形成两个明显的峰值,与愈伤组织的诱导和不定芽的分化同期。但是随着Na2S2O3浓度的升高,可溶性蛋白质含量和POD酶活性降低。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-11
第一章 文献综述  11-19
  1 苎麻组织培养研究进展  11-17
    1.1 快速繁殖  11
    1.2 器官发生  11-16
      1.2.1 基因型对苎麻器官发生影响的研究  12
      1.2.2 外植体类型对苎麻器官发生影响的研究  12-13
      1.2.3 基本培养基对苎麻器官发生影响的研究  13
      1.2.4 激素对苎麻器官发生影响的研究  13-15
      1.2.5 培养条件及其添加物对苎麻器官发生影响的研究  15-16
    1.3 体细胞胚胎发生  16
    1.4 原生质体培养  16-17
    1.5 花药培养  17
  2 本研究的目的和意义  17-19
第二章 苎麻叶片高效再生体系的建立  19-38
  1 试验材料  19
  2 试验方法  19-22
  3 结果与分析  22-35
    3.1 不同激素组合对苎麻叶片愈伤组织诱导的效应  22-26
      3.1.1 不同激素组合对湘苎2号叶片愈伤组织诱导的效应  22-23
      3.1.2 不同激素组合对湘苎3号叶片愈伤组织诱导的效应  23-24
      3.1.3 不同激素组合对新宁青麻叶片愈伤组织诱导的效应  24-25
      3.1.4 不同激素组合对四川珙县园麻叶片愈伤组织诱导的效应  25-26
    3.2 不同激素组合对苎麻叶片不定芽再生的效应  26-30
      3.2.1 不同激素组合对湘苎2号叶片分化不定芽的效应  26-27
      3.2.2 不同激素组合对湘苎3号叶片分化不定芽的效应  27-28
      3.2.3 不同激素组合对新宁青麻叶片分化不定芽的效应  28-29
      3.2.4 不同激素组合对四川珙县园麻叶片分化不定芽的效应  29
      3.2.5 四个苎麻品种愈伤组织分化从生不定芽效应  29-30
    3.3 不同蔗糖浓度预培养对苎麻不定芽分化的效应  30-31
    3.4 AgNO_3对苎麻不定芽分化的影响  31-33
    3.5 Na_2S_2O_3对苎麻不定芽分化的影响  33-34
    3.6 不定芽生根培养及移栽  34-35
  4 小结与讨论  35-38
第三章 苎麻组织培养相关生理研究  38-49
  1 试验材料  38
  2 试验方法  38-39
  3 结果与分析  39-45
    3.1 可溶性蛋白质含量变化分析  39-43
      3.1.1 不同激素组合对苎麻叶外植体可溶性蛋白质含量的影响  39-41
      3.1.2 不同蔗糖浓度对苎麻叶外植体可溶性蛋白质含量的影响  41
      3.1.3 不同AgNO_3浓度对苎麻叶外植体可溶性蛋白质含量的影响  41-42
      3.1.4 不同Na_2S_2O_3浓度对苎麻叶外植体可溶性蛋白质含量的影响  42-43
    3.2 POD酶活性变化分析  43-45
      3.2.1 不同激素组合对苎麻叶外植体POD酶活性的影响  43
      3.2.2 不同蔗糖浓度对苎麻叶外植体POD酶活性的影响  43-44
      3.2.3 不同AgNO_3浓度对苎麻叶外植体POD酶活性的影响  44
      3.2.4 不同Na_2S_2O_3浓度对苎麻叶外植体POD酶活性的影响  44-45
  4 小结与讨论  45-49
第四章 结论及展望  49-52
  1 结论  49-50
  2 展望  50-52
参考文献  52-58
附录1:缩略词表  58-59
附图1:苎麻不定芽分化组培过程图  59-60
致谢  60-61
作者简介  61

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 药用作物 > 草本 > 多年生 > 其他
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