学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

人支气管上皮细胞5-脂氧合酶介导的苯并（a）芘的活化及其细胞毒性

作　者: 陈昌可
导　师: 胡建安
学　校: 中南大学
专　业: 劳动卫生与环境卫生学
关键词: 5-脂氧合酶苯并(a)芘协同氧化作用细胞毒性 DNA损伤
分类号: R114
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 64次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

[目的]通过大豆脂氧合酶(SLO)介导苯并(a)芘(B[a]P)氧化反应的体外酶系统实验与苯并(a)芘对人支气管上皮细胞(HBE)5-脂氧合酶(5-LOX)蛋白表达、细胞毒性和DNA损伤影响的细胞实验研究,初步探讨细胞内5-LOX对苯并(a)芘的代谢活化情况,试图为LOX作为细胞色素P450氧化代谢外源化学物的替代途径提供进一步的参考依据。[方法]体外酶系统实验：SLO与苯并(a)芘等在酶体系中进行反应后,用分光光度法于特定波长下检测反应体系中反应产物生成情况,并计算SLO对苯并(a)芘氧化代谢速率及脂氧合酶抑制剂茶多酚(GTP)对氧化的抑制率。同时用紫外分光光度计及高效液相色谱法(HPLC)检测苯并(a)芘与DNA的加合物。细胞实验：以不同浓度的苯并(a)芘染毒HBE,通过MTT实验检测不同浓度苯并(a)芘对HBE存活率的影响；用western-blot印记法检测各组5-LOX蛋白表达的情况；同时用流式细胞计数及单细胞凝胶电泳实验检测各组的细胞毒性及DNA损伤情况。最后检测特异性5-LOX抑制剂(AA-861)及其他特异性酶抑制剂对5-LOX蛋白表达和对DNA损伤的影响。[结果]体外酶系统中,过氧化氢(H2O2)参与下,SLO可介导苯并(a)芘协同氧化生成苯并(a)芘-7,8-环氧化物；抑制剂GTP可抑制该氧化反应,且在一定范围内呈剂量效应关系。SLO介导苯并(a)芘活化后,在体外未能检测到与DNA形成加合物。苯并(a)芘可以使HBE内5-LOX蛋白表达增加,AA-861对5-LOX蛋白表达基本没有影响；苯并(a)芘可以对HBE产生明显细胞毒作用和DNA损伤,AA-861和前列腺素合酶抑制剂萘普生可以明显抑制苯并(a)芘毒性和DNA损伤。[结论]H2O2参与下,SLO可以介导苯并(a)芘协同氧化,抑制剂GTP可以抑制该协同氧化反应。5-LOX在HBE内的蛋白表达可以经苯并(a)芘调节,特异性5-LOX抑制剂AA-861对其蛋白表达无明显影响。在HBE内,苯并(a)芘可能主要通过5-LOX介导的协同氧化,形成亲电子物质与DNA结合,使HBE产生DNA损伤,AA-861对该反应有明显抑制作用。

人支气管上皮细胞5-脂氧合酶介导的苯并（a）芘的活化及其细胞毒性

内容摘要

全文目录

相似论文