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槐杞黄对哮喘大鼠Th1、Th2、Th17表达及肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响

作　者: 李红梅
导　师: 何庆南
学　校: 中南大学
专　业: 儿科学
关键词: 槐杞黄 布地奈德 Th1/Th2/Th17 肺泡巨噬细胞 哮喘
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


研究背景：支气管哮喘(简称哮喘)是呼吸道慢性炎症性疾病,全世界约有3亿哮喘患者,且发病率呈上升趋势。既往免疫学机制研究表明哮喘患者存在Th1／Th2亚群比例失衡和功能失衡,表现为Th2占优势和Th1处劣势,并认为其失衡是哮喘的始动机制和核心。但近年来逐渐发现,哮喘的一些实验发现和临床现象并不能完全用Th1／Th2失衡理论来解释。Th17细胞是近来发现的不同于Th1和Th2的另一种CD4+T细胞的新亚型,Th17细胞及相关细胞因子参与了哮喘的发生与发展。肺泡巨噬细胞是气道的主要细胞,负责内在免疫防御。肺泡巨噬细胞吞噬功能受损往往易导致或加重呼吸系统疾病。虽然吸入性糖皮质激素能有效控制哮喘症状,但部分哮喘病例仍表现为反复发作和慢性进展,提示有必要深入研究哮喘的发病机制和增添新的治疗方法。传统中药在哮喘治疗中的重要辅助价值近年来日渐受到重视。目的：研究卵清蛋白(OVA)致敏哮喘模型大鼠Th1、Th2、Th17表达及肺泡巨噬细胞吞噬功能的变化以及槐杞黄的治疗效应和作用机制。方法：将40只4-6周龄雄性SD大鼠随机分成正常对照组(C组)、哮喘模型组(A组)、布地奈德组(B组)、槐杞黄组(H组)和布地奈德+槐杞黄组(B+H组),每组8只SD大鼠。OVA致敏和激发建立哮喘模型。各组大鼠于末次激发后24小时处死,取血浆、支气管肺泡灌洗液(BALF)及右肺上叶组织。右肺上叶组织制作石蜡切片,HE染色,观察肺组织病理学改变；计数BALF细胞总数和细胞分类；分离、纯化BALF的肺泡巨噬细胞,采用比色测定细胞吞噬的中性红以检测其吞噬功能；酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定血浆和BALF上清液的IL-4、IFN-γ、IL-17浓度。结果：1.一般观察：A组大鼠经腹腔注射致敏和雾化激发,出现不同程度的烦躁不安、呼吸急促、腹肌抽搐等症状,严重者呼吸减慢、节律不规则、行动迟缓、反应不敏捷,C组大鼠无上述症状。B组、H组、B+H组大鼠症状较A组不同程度减轻。以B组和B+H组改善明显。2.肺组织病理学改变：A组气道周围大量炎症细胞浸润、管腔狭窄,支气管管腔内可见粘液栓,气道上皮脱落等哮喘改变；C组则无上述表现；B组、H组、B+H组比A组不同程度减轻,B组和B+H组较H组减轻明显。3.血浆和BALF IL-4、IFN-γ、IL-17浓度：(1)血浆和BALF IL-4浓度：A组高于C组(P<0.05),B组和B+H组低于A组(P<0.05),B+H组低于H组(P<0.05),H组与A组比较差异无统计学意义(P>0.05),B+H组与B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)血浆和BALF IFN-γ浓度：A组低于C组(P<0.05),B组、H组和B+H组高于A组(P<0.05),B+H组高于B组和H组(P<0.05)(3)血浆和BALF IL-17浓度：A组高于C组(P<0.05),B组和B+H组低于A组(P<0.05),H组与A组比较差异无统计学意义(P>0.05),B+H组低于B组和H组(P<0.05),B组低于H组(P<0.05)。4.BALF细胞总数和细胞分类计数：A组细胞总数高于C组(P<0.05),,B组、H组和B+H组低于A组(P<0.05),B+H组低于B组、H组(P<0.05)。其中,嗜酸性细胞(EOS)百分比：A组高于C组(P<0.05),B组、H组和B+H组低于A组(P<0.05),B+H组低于B组和H组(P<0.05)；中性粒细胞(NEU)百分比：A组高于C组(P<0.05),B组和B+H组低于A组(P<0.05),B+H组低于H组(P<0.05),B+H组与B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。5.肺泡巨噬细胞的吞噬功能：A组低于C组(P<0.05),B组低于A组(P<0.05),H组、B+H组高于A组(P<0.05),H组、B+H组高于B组(P<0.05),B+H组与H组差异无统计学意义(P>0.05)。6.血浆和BALF IL-17浓度与BALF NEU百分比、EOS百分比正相关(P<0.05),血浆和BALF IFN-γ浓度与肺泡巨噬细胞的吞噬功能正相关(P<0.05)。结论：1.哮喘大鼠存在Th1／Th2／Th17失衡,表现为Th1功能低下,Th2、Th17功能亢进的免疫表型,并同时表现为肺泡巨噬细胞吞噬功能下降。2.吸入性糖皮质激素能在一定程度上纠正哮喘大鼠的Th1／Th2／Th17失衡,但其不能纠正哮喘大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能降低的缺陷。3.槐杞黄具有明显提高哮喘大鼠血浆和BALF IFN-γ表达以及显著提高哮喘大鼠肺泡巨噬细胞的吞噬能力的功效。4.联合应用槐杞黄辅佐吸入性糖皮质激素治疗哮喘,不仅能够显著提高吸入性糖皮质激素纠正哮喘大鼠Th1／Th2／Th17失衡、以及减轻气道炎症的作用,而且还具有显著增强肺泡巨噬细胞吞噬能力的功效。

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