学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

基质细胞衍生因子-1 alpha（SDF-1α）与Dickkopf-1（DKK-1）相互作用介导多发性骨髓瘤骨病

作　者: 笪熠
导　师: 武永吉
学　校: 北京协和医学院
专　业: 临床医学
关键词: 骨髓瘤骨病 SDF-1α DKK-1 骨髓基质细胞 Wnt信号通路
分类号: R733.3
类　型: 博士论文
年　份: 2012年
下　载: 39次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


背景和目的多发性骨髓瘤(MM)患者约80%在病程中出现骨病,是降低患者生活质量和生存率的重要因素。MM骨病的发生机制为破骨细胞活性增强和成骨细胞功能抑制。我们前期工作发现,骨髓基质细胞(BMSC)分泌介导干细胞趋化归巢的SDF-1α,以及肿瘤细胞分泌的成骨细胞Wnt信号通路抑制因子DKK-1,二者在MM患者血清中表达水平呈正相关。本研究旨在探讨SDF-1α与DKK-1水平与临床骨病之间的相关性,以及二者是否相互作用诱发并加重多发性骨髓瘤骨病,试图更深入揭示MM骨病的发生机制。材料与方法收集46例新诊断的MM患者及30例健康对照的临床资料、血清及骨髓标本,采用ELISA方法测定血清SDF-1α, DKK-1水平,并将二者水平和临床骨病进行相关性分析。临床骨病评价手段包括全身骨骼X线检查和胸部高分辨CT骨重建。体外培养RPMI8226人多发性骨髓瘤细胞株,加入10ng/ml SDF-1α,采用RealtimePCR的SYBR染料相对定量法检测Oh、8h以及36h DKK-1mRNA转录水平变化。应用CD138免疫磁珠分选9例MM患者原代骨髓瘤细胞,经SDF-1α刺激后检测DKK-1转录水平变化。体外培养MM患者原代BMSCs,加入DKK-1(20ng/ml)或／和Wnt-3a(200ng/ml),检测SDF-1α mRNA转录水平变化。采用SPSS Statistics17.0进行统计学分析。当P<0.05时认为存在统计学差异。结果MM患者(n=46)血清SDF-1α水平显著高于健康对照(n=30)(3275.9±1093.0pg/ml vs2817.5±419.6pg/m1,P=0.015)。MM患者血清DKK-1水平亦显著高于健康对照(3256.8±4960.3pg/ml vs1494.2±918.7pg/ml, P=0.025)。且MM患者SDF-1α和DKK-1水平呈正相关(r=0.40,P=0.001),健康对照未发现这种相关性(r=0.15,P=-0.428)。共有13例患者同时进行了全身骨骼X线和胸部高分辨CT骨重建检查。与X线平片相比,CT骨三维重建能更敏感发现骨折和溶骨病变。CT骨重建显示骨病阳性患者血清SDF1-α水平较骨病阴性患者升高,分别为2989±838和2460±739pg/ml,但无显著性(P=0.12)。血清DKK-1水平在骨病阳性患者亦较阴性患者升高趋势,分别为5072±8032和1032±720pg/ml,但无显著性(P＝0.13)。患者血清SDF-1α与DKK-1水平均随ISS分期进展而逐渐升高,但无统计学意义。RPMI8226人MM细胞株经8h和36h SDF-1α刺激后,DKK-1mRNA的转录水平分别上升至刺激前的1.92倍及4.19倍(P=0.099)。CD138免疫磁珠分选后骨髓瘤细胞纯度高达99.5%。9例MM患者经磁珠分选获得纯化原代瘤细胞,经测定其基线DKK-1mRNA的转录水平不尽相同,相对转录量从内参基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)表达的0.06%至11.09%不等。原代瘤细胞体外培养经SDF-1α刺激后,基线DKK-1mRNA高转录水平者更易出现转录上调(P=0.043),而基线低水平者SDF-1α刺激作用不明显。说明SDF-1α可以促进基线DKK-1高转录水平者的DKK-1基因转录。MM患者BMSCs体外培养2周,加入Wnt信号通路激动剂Wnt-3a后BMSCs表达SDF-1α mRNA水平显著下降,平均下调至原先的0.29倍,P＝0.028。同时加入DKK-1和Wnt-3a又可逆转Wnt-3a对SDF-1α mRNA转录的下调作用。结论MM患者血清SDF-1α与DKK-1水平高于正常,且二者具有正相关性。骨病严重程度与血清SDF-1α和DKK-1水平呈现相关趋势。SDF-1α促进某些骨髓瘤细胞DKK-1mRNA转录,DKK-1促进MM患者BMSCs表达SDF-1α,二者相互促进,形成恶性循环,介导多发性骨髓瘤骨病发生。抑制二者相互作用可能成为临床治疗骨髓瘤骨病的新方法。

全文目录


英文缩略词表  4-6
摘要  6-8
Abstract  8-11
前言  11-13
材料与方法  13-21
结果  21-37
  第一部分 SDF-1α和DKK-1与临床骨病的相关性分析  21-27
  第二部分 SDF-1α和DKK-1相互作用机制  27-37
讨论  37-43
结论  43-44
参考文献  44-49
附录一：多发性骨髓瘤临床分期  49-50
附录二：综述  50-64
  参考文献  57-64
附录三：致谢  64-65

相似论文

  1. 小鼠磨牙中同时过表达sFrp2和sFrp3对磨牙发育的影响,Q954.48
  2. 经典Wnt信号关键基因在人早期牙齿发育中的表达检测,R78
  3. 维甲酸诱导腭裂小鼠出生前后Wnt通路相关信号分子的表达,R782.21
  4. 血管内皮抑制剂对小鼠结肠癌干细胞作用的基础研究及相关机制探讨,R735.35
  5. 剪切力作用下（类）成骨细胞LEF-1的表达,R783.5
  6. 胎源性非粘附骨髓基质细胞特性研究,R329
  7. NF-κB信号通路在慢性B淋巴细胞性白血病细胞与骨髓造血微环境相互作用中的影响,R733.7
  8. sFRP1-Fc、WIF1-Fc真核表达载体的构建及对肝癌作用的初步研究,R735.7
  9. 应用骨髓基质细胞片层构建组织工程骨的实验研究,R329
  10. 皮肤来源前体细胞的分离、培养及其分化过程中基因表达变化的初步研究,R329
  11. 促红细胞生成素通过SDF-1α介导小鼠骨髓KDR+干细胞自体动员及其对心肌梗死的修复作用及机制研究,R542.22
  12. 骨髓基质细胞治疗脑缺血过程中血管内皮生长因子对其趋化性作用的实验研究,R743.3
  13. 骨髓基质细胞联合葛根素对脑缺血大鼠的治疗作用,R285.5
  14. 六神丸通过Wnt信号转导通路抗肿瘤的临床与实验研究,R285
  15. sFrp2和sFrp3在小鼠磨牙发育中的作用,Q954.4
  16. 小鼠胚胎干细胞转染Notch1基因后HES-1、PS-1和GSK-3β表达的变化,Q343
  17. 金纳米粒子和碳纳米管对骨髓基质细胞成骨及成脂方向分化的影响,TB383.1
  18. 富血小板血浆对不同条件下人牙周膜成纤维细胞功能的影响,R780.2
  19. 抑癌基因TSPYL5在胃癌发生发展中的作用及机制的初步研究,R735.2
  20. 硼替佐米对骨髓瘤骨病中成骨细胞的作用,R733.3
  21. MCMV感染对神经干细胞Wnt信号通路上游分化相关靶基因蛋白Wnt-3和Wnt-7a表达的影响,R741

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤 > 骨髓肿瘤
© 2012 www.xueweilunwen.com