学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

MicroPET/CT脑显像评价中西药治疗帕金森病模型鼠的疗效及对比研究

作　者: 郭小瑞
导　师: 冯珏
学　校: 河北医科大学
专　业: 影像医学与核医学
关键词: Micro PET/CT 11C-CFT 11C-Raclopride 左旋多巴姜黄素中西药联合治疗 PD大鼠
分类号: R742.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
下　载: 1次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的：本研究旨在通过应用Micro PET/CT脑显像评价左旋多巴、姜黄素及中西药联合治疗帕金森病（Parkinson’s disease, PD）模型大鼠疗效，并监测、评价三者在治疗PD大鼠模型的疗效差异，探讨各类药物对PD大鼠的保护作用及机制，为筛选临床治疗PD药物提供实验依据。方法：1偏侧PD大鼠模型制备随机选取清洁级、健康成年雄性Sprague Dawley（SD）大鼠,体重210-240g。以10%的水合氯醛溶液腹腔注射麻醉，依据大鼠脑立体定位图谱，借助实验动物脑立体定位仪，采用单侧双点毁损法将6-羟基多巴胺（6-hydroxy dopamine,6-OHDA）注入大鼠脑右侧黑质致密部（substantianigra compacta，SNc）和中脑腹侧被盖区(ventral tegmental area, VTA)，制作偏侧PD大鼠模型。2行为学测试及Micro PET/CT显像于术后第3周腹腔注射阿扑吗啡（Apomorphine, APO）诱发大鼠的旋转行为，选择安静、黑暗的环境，于注射后5min人工计数30min内大鼠旋转圈数，以恒定向左侧（健侧）旋转的总转数≥210r/30min（平均旋转圈数≥7r/min)视为成功模型。选择成模大鼠，分两天分别进行多巴胺转运蛋白（dopamine transporter, DAT）11C-CFT显像和雷氯必利（11C-Raclopride，11C-RAC）多巴胺D2受体显像，并勾画右侧（毁损侧）纹状体及小脑部位的感兴趣区(region of interest，ROI)。11C-CFT显像示成模大鼠脑右侧纹状体放射性摄取明显减低，左侧摄取显像剂基本正常；11C-RAC显像示成模大鼠脑右侧纹状体放射性摄取较左侧明显增强。3实验分组及给药将成功PD模型大鼠随机分为左旋多巴组、姜黄素组、中西药联合治疗组和自然恢复组，每组各22只。左旋多巴组将左旋多巴溶液（左旋多巴10mg／kg+苄丝肼2.5mg／kg，溶于0.9%生理盐水中)，于每日上午9:00-10:00腹腔注射给药一次；姜黄素组于同一时间点用姜黄素(剂量为100mg/kg，药物溶液体积为10ml/kg)灌胃一次；中西药联合治疗组于每日同一时间通过腹腔注射和灌胃法给予等体积的左旋多巴和姜黄素,连续8周。自然恢复组不做任何处理。4实验评估4.1Micro PET/CT扫描各组大鼠分别行11C-CFT及11C-RAC（隔日）Micro PET/CT脑显像。观察大鼠右侧（毁损侧）脑纹状体部位对显像剂的摄取情况，勾画右侧（毁损侧）纹状体及小脑部位ROI，测量其放射性计数，进行统计学分析比较。4.2氧化应激（oxidative stress）每组大鼠各取10只，10%水合氯醛腹腔注射麻醉后断头取脑处死，剥离出右侧（毁损侧）脑组织、称重，生理盐水制成10%的组织匀浆，离心，取上清液，预处理后放在-20℃冰箱保存。检测谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase，GSH-PX）活力、丙二醛（Maleic Dialdehyde，MDA）含量及超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）活力。4.3免疫组织化学染色（Immunohistochemical staining，IHC）每组大鼠各取6只，10%的水合氯醛腹腔注射深度麻醉后断头取脑处死，剥离出右侧（毁损侧）脑组织后，对大鼠右侧（毁损侧）脑黑质纹状体区行连续冠状石蜡切片。按Hsu的ABC方法，进行免疫组织化学染色，检测大鼠右侧（毁损侧）脑纹状体内酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）阳性细胞数目的变化情况。4.4高效液相色谱法(High performance liquid chromatography HPLC)每组大鼠各取6只，10%的水合氯醛腹腔注射麻醉后断头取脑处死，分离出大鼠右侧（毁损侧）脑纹状体，生理盐水制成10%的组织匀浆，离心，取上清液，预处理后放在-80℃冰箱保存。根据色谱峰面积计算大鼠右侧（毁损侧）脑纹状体内多巴胺（dopamine, DA）及其代谢物二羟基苯乙酸(dihydroxyphenylacetic acid, DOPAC)、高香草酸(homovanillic acid,HVA)的含量。结果：1Micro PET/CT显像右侧（毁损侧）纹状体/小脑（rST/CB）摄取比值的定量分析1.111C-CFT显像1.1.1治疗前后比较①与治疗前比较，中西药联合治疗组、左旋多巴组、姜黄素组大鼠经治疗4周后rST/CB比值均高于治疗前（P<0.05），经治疗8周后rST/CB比值高于治疗前（P<0.05）及治疗4周组（P<0.05）。②自然恢复组大鼠治疗前rST/CB比值与自然恢复4周后及8周后比较均无差异（P>0.05）。1.1.2组间比较①治疗4周后：中西药联合治疗组高于左旋多巴组、姜黄素组及自然恢复组（P<0.05）；左旋多巴组高于自然恢复组（P<0.05）；姜黄素组高于自然恢复组（P<0.05）；左旋多巴组与姜黄素组比较无差异（P>0.05）。②治疗8周后：中西药联合治疗组高于左旋多巴组、姜黄素组及自然恢复组（P<0.05）；左旋多巴组高于自然恢复组（P<0.05）；姜黄素组高于自然恢复组（P<0.05）；左旋多巴组与姜黄素组比较无差异（P>0.05）。1.211C-RAC显像1.2.1治疗前后比较①与治疗前比较，左旋多巴组、姜黄素组大鼠经治疗4周后rST/CB比值与治疗前比较无差异（P>0.05）；经治疗8周后rST/CB比值低于治疗前（P<0.05）及治疗4周后（P<0.05）；中西药联合治疗组大鼠经治疗4周、8周后rST/CB比值均低于治疗前（P<0.05）及治疗4周组（P<0.05）。②自然恢复组大鼠治疗前rST/CB比值与自然恢复4周后及8周后比较均无差异（P>0.05）。1.2.2组间比较①治疗4周后：左旋多巴组、姜黄素组、自然恢复组两两比较均无差异（P>0.05）；中西药联合治疗组低于左旋多巴组、姜黄素组及自然恢复组（P<0.05）。②治疗8周后：中西药联合治疗组低于左旋多巴组、姜黄素组及自然恢复组（P<0.05）；左旋多巴组低于自然恢复组（P<0.05）；姜黄素组低于自然恢复组（P<0.05）；姜黄素组与左旋多巴组比较无差异（P>0.05）。2氧化应激与自然恢复组比较，左旋多巴组、姜黄素组GSH-PX及SOD活性升高，MDA含量降低（P<0.05）；左旋多巴组与姜黄素组比较，两组SOD活性及MDA含量无差异（P>0.05），而姜黄素组GSH-PX的活性比左旋多巴组升高（P<0.05）。与左旋多巴组比较，中西药联合治疗组MDA含量无差异（P>0.05），而中西药联合治疗组GSH-PX及SOD活性降低（P<0.05）；与姜黄素组比较，中西药联合治疗组MDA含量无差异（P>0.05），而中西药联合治疗组GSH-PX及SOD活性降低（P<0.05）；与自然恢复组比较，中西药联合治疗组MDA含量无差异（P>0.05），而中西药联合治疗组GSH-PX及SOD活性降低（P<0.05）。3免疫组织化学染色与自然恢复组比较，中西药联合治疗组、左旋多巴组、姜黄素组TH阳性细胞数目均高于自然恢复组(P<0.05)；姜黄素组与左旋多巴组比较，两组TH阳性细胞数目无差异（P>0.05）；与左旋多巴组比较，中西药联合治疗组TH阳性细胞数目高于左旋多巴组(P<0.05)；与姜黄素组比较，中西药联合治疗组TH阳性细胞数目高于姜黄素组(P<0.05)。4高效液相色谱法与自然恢复组比较，中西药联合治疗组、左旋多巴组、姜黄素组DA及其代谢物DOPAC、HVA含量均增加(P<0.05)；姜黄素组与左旋多巴组比较，两组DA及其代谢物DOPAC、HVA含量无差异（P>0.05）；与左旋多巴组比较，中西药联合治疗组DA及其代谢物DOPAC、HVA含量高于左旋多巴组(P<0.05)；与姜黄素组比较，中西药联合治疗组DA及其代谢物DOPAC、HVA含量高于姜黄素组(P<0.05)。结论：1中西药联合治疗可以提高PD大鼠模型毁损侧纹状体多巴胺的含量，且疗效优于单独使用中药或西药治疗。2通过对三种治疗方法前后11C-CFT多巴胺转运蛋白及11C-RAC多巴胺D2受体Micro PET/CT脑显像对比研究，从分子水平评价了中西药联合治疗对PD的疗效，且为11C-CFT和11C-RAC显像在PD早期诊断及药物疗效监测的临床应用奠定了理论基础。

全文目录

摘要  4-9
ABSTRACT  9-15
前言  15-16
材料和方法  16-22
结果  22-25
附图  25-32
附表  32-35
讨论  35-37
结论  37-38
参考文献  38-42
综述帕金森病核医学显像剂的研究进展  42-52
  参考文献  48-52
致谢  52-53
个人简历  53

MicroPET/CT脑显像评价中西药治疗帕金森病模型鼠的疗效及对比研究

内容摘要

全文目录

相似论文