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小丛红景天药用有效成分提取与分析
作 者: 王莉
导 师: 刘发央
学 校: 甘肃农业大学
专 业: 野生动植物保护与利用
关键词: 小丛红景天 多糖 脂肪酸 黄酮
分类号: R284.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
本论文以小丛红景天Rhodiola dumulosa (Franch.)S.H.Fu为研究材料,通过索氏提取法,提取小丛红景天中的非挥发脂溶性成分,并对其脂溶性成分进行甲酯化处理后采用气相色谱-质谱联用的技术分离鉴定小丛红景天的化学成分,并确定其脂溶性成分的相对含量,同时对它的脂溶性成分进行体外抑菌活性的实验。利用超声提取法对其多糖进行提取分离,蒽酮-硫酸法测定小丛红景天的多糖含量,通过单因素实验,确定在提取其多糖的过程中各因素对多糖提取率的影响,并进行相应的工艺优化,并且采用UV法测定小丛红景天中总黄酮的含量,利用高效液相法测定小丛红景天中山萘素的含量。1.采用索氏提取法提取小丛红景天根茎中脂肪酸成分,用气相色谱-质谱联用技术(GC-MC)对小丛红景天根茎中脂肪酸成分进行分离和鉴定,从小丛红景天中分离出非极性,极性,弱极性三个馏分,其中非极性馏分成分20种,主要为正二十一烷(12.708%),正二十三烷(13.576%),正二十五烷(17.825%),正二十七烷(13.418%),正二十九烷(20.359%)等;弱极性馏分成分17种,未知成分一种,主要种类有环二十二烷(4.535%),环二十四烷(10.515%),环二十六烷(41.743%),豆甾-3,5-二烯-20R(13.450%),环二十八烷(8.277%)等;极性馏分成分12种,主要种类有十六烷酸(66.946%),十八烷酸(8.887%),二十烷酸(4.908%),8,10-二甲氧基十八烷酸(5.738%)等。2.蒽酮-硫酸法测定小丛红景天多糖的含量,并采用响应面法优化小丛红景天多糖超声提取工艺,优化后的小丛红景天的多糖提取制备条件为:提取温度69℃、超声功率240W、料液比1:30,提取2次,每次39min。体外抗氧化实验显示,小丛红景天粗多糖及精制多糖对羟自由基(·OH)、过氧化氢(H2O2)和2,2-二苯基-1-苦苯肼(DPPH)三种自由基均有一定的抗氧化活性。体外抗菌实验表明小丛红景天多糖具有一定的抑菌活性,对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌和白色假丝酵母均有很好的抑制作用,尤其对白色假丝酵母抑制作用明显。3.小丛红景天中总黄酮含量测定采用UV紫外测定法,小丛红景天内山萘素含量的测定采用高效液相色谱法,色谱柱为Inertsil ODS-3C18(4.6mm×150mm,5μm),色谱条件为流动相甲醇-0.4%磷酸(60:40)、柱温30℃、进样量10μl、检测波长360mm、进样时间15min。最终检测到小丛红景天总黄酮的含量为1.6%,山萘素含量为0.016%。
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全文目录
摘要 2-3 ABSTRACT 3-7 第一章 文献综述 7-15 1.1 小丛红景天概述 7-8 1.1.1 小丛红景天的本草考证 7 1.1.2 小丛红景天的生药学特征 7 1.1.3 小丛红景生物学特征 7-8 1.2 小丛红景天的研究进展 8 1.3 小丛红景天的药理作用及其机制 8-9 1.3.1 对心脑缺氧、血压及血细胞具有调节作用 8 1.3.2 能改善记忆、镇静催眠并保护神经系统 8 1.3.3 抗肿瘤作用 8 1.3.4 提高免疫,延缓衰老 8-9 1.3.5 抗组织纤维化 9 1.3.6 抗炎、抗病毒镇痛作用 9 1.4 药用植物多糖成分研究概况 9-12 1.4.1 植物多糖的研究进展 9 1.4.2 植物多糖的提取及精制 9-11 1.4.3 植物多糖的生理活性 11-12 1.5 黄酮类化合物研究 12-15 1.5.1 抗氧化及清除自由基的能力 12-13 1.5.2 抑菌作用 13 1.5.3 抗病毒活性 13 1.5.4 黄酮类化合物对免疫的影响 13 1.5.5 抗衰老和抗疲劳作用 13 1.5.6 降血脂作用 13-15 第二章 小丛红景天脂肪含量测定、脂溶性成分 GC-MS 分析及其抗菌活性分析 15-23 2.1 实验材料 15 2.2 仪器与试剂 15-16 2.2.1 实验仪器及试剂 15-16 2.3 实验方法 16-17 2.3.1 小丛红景天脂溶性成分提取 16 2.3.2 小丛红景天脂溶性成分的气相色谱—质谱测试 16 2.3.3 目标样品的甲酯化处理 16 2.3.4 小丛红景天脂溶性成分生物活性检测 16-17 2.4 实验结果与分析 17-22 2.4.1 小丛红景天脂肪含量 17 2.4.2 小丛红景天脂溶性成分 GC-MC 分析结果 17-21 2.4.3 小丛红景天脂肪的抑菌活性 21-22 2.5 讨论 22-23 第三章 小丛红景天多糖提取工艺,含量测定及生物活性的研究 23-40 3.1 实验所需材料 23 3.2 仪器与试剂 23 3.2.1 实验所用仪器和试剂 23 3.3 实验方法 23-27 3.3.1 小丛红景天多糖含量测定 23-25 3.3.2 小丛红景天多糖的体外抗氧化活性检测 25 3.3.3 小丛红景天多糖的抑菌活性的测定[88-89] 25-26 3.3.4 小丛红景天多糖提取工艺研究 26-27 3.4 实验结果 27-39 3.4.1 小丛红景天多糖含量 27-28 3.4.2 小丛红景天多糖抗氧化实验结果 28-30 3.4.3 小丛红景天多糖的生物活性检测结果 30 3.4.4 小丛红景天多糖提取工艺优化结果 30-39 3.5 讨论 39-40 第四章 小丛红景天总黄酮及山萘素 HPLC 测定 40-44 4.1 实验材料 40 4.2 实验仪器及试剂 40 4.2.1 实验仪器 40 4.2.2 实验试剂 40 4.3 实验方法 40-41 4.3.1 总黄酮测定 40-41 4.3.2 小丛红景天山萘素的高效液相测定 41 4.4 实验结果及讨论 41-42 4.4.1 UV 法测小丛红景天内总黄酮含量 41 4.4.2 方法学实验结果 41-42 4.4.3 小丛红景天山萘素的高效液相测定结果 42 4.5 讨论 42-44 第五章 结论 44-45 5.1 小丛红景天脂溶性成分 44 5.2 小丛红景天多糖的研究 44 5.3 小丛红景天黄酮类化合物测定 44-45 参考文献 45-50 致谢 50-51 作者简介 51-52 导师简介 52-53
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学 > 有效成分的分离与提取
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