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五子衍宗丸含药血清对大鼠睾丸支持细胞分泌产物和活力的影响
作 者: 张圣强
导 师: 李兰群;刘保兴
学 校: 北京中医药大学
专 业: 中医外科学
关键词: Cox7a2 分泌产物 活力 五子衍宗丸含药血清 Sertoli细胞
分类号: R285.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2014年
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内容摘要
综述部分摘要五子衍宗丸是中医药领域中的精华,历代医家对此方极为推崇,方由五味子、枸杞亍、菟丝子、覆盆子、车前子组成,具有补肾益精滋补健身的效果,被称为古今“种子第一方”。五子衍宗丸主要用于男性和女性不孕不育疾病的治疗,在治疗男性生殖系统疾病方面,具有性激素样效果,能够提高血清睾丸酮的含量,显著改善男性生精功能,提高精子质量,增强精子活力及存活率,降低精子畸形率,改善受损伤器官功能。同时可以治疗女性生殖系统疾病,阴阳两补,阴中求阳,阳中求阴,促进排卵,调经促孕,治疗女性不孕不育等效果显著;并且对于女性更年期症状也有良好调节能力。同时还抗氧化损伤、增强免疫力,保护神经元及肝脏功能,用以治疗MCI、白内障、Leber遗传性视神经病变、肝源性糖尿病、肾病综合征、糖尿病、过敏性紫癜等各种内科疾病。Sertoli细胞在精子发生中有着重要的作用,Sertoli细胞的功能及形态正常前提下,精子才能顺利的生成。生精细胞的分化及成熟是由支持细胞控制的;通过血—睾屏障,实现免疫豁免;而通过Sertoli细胞所表达或分泌的各类蛋白,进而影响精子的生成;对于蛋白的数量、构象的研究,可以进一步阐明Sertoli细胞的功能,进而解决男性不育、器官移植等方面的问题。实验研究部分摘要:目的:观察五子衍宗丸含药血清对大鼠睾丸Sertoli细胞分泌产物影响及其作用机制,以及对大鼠睾丸Sertoli细胞活力的影响。方法:制备五子衍宗丸含药血清,分离、培养大鼠睾丸Sertoli细胞,构建Cox7a2重组质粒,将Cox7a2重组质粒转染的Sertoli细胞和五子衍宗丸含药血清共孵育,收集细胞上清液,采用ELISA法测定雄激素结合蛋白(ABP)、转铁蛋白(TF)、抑制素B(INHB).白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)含量。培养大鼠睾丸原代Sertoli细胞,Fas-L免疫组织化学和HE染色鉴定;制备高、低剂量五子衍宗丸含药血清,高、低剂量组含药血清又进一步分为20%,10%,5%和空白血清4个中药血清浓度培养基,并将不同浓度五子衍宗丸含药血清分别和大鼠睾丸原代Sertoli细胞共同培养,选取6h、12h、24h.48h、72h等5个时间点,MTT法观察在不同时间点时五子衍宗丸对Sertoli细胞活力的影响。结果:一、与正常细胞组相比,转染Cox7a2重组质粒后Sertoli细胞上清液中ABP、IL-1β、IL-6水平显著升高,TF、INHB显著降低(P<0.05);与五子衍宗丸高浓度含药血清共孵育后,转染重组质粒后升高的ABP、IL-1β和IL-6水平显著降低,而降低的TF、 INHB水平显著升高(P<0.05)。二、不同浓度五子衍宗丸含药血清分别和大鼠睾丸原代Sertoli细胞共同培养6h12h、24h、48h及72h后,随时间增加,20%及10%浓度血清组细胞活力亦随之增加,在24h达到最高值,然后细胞活力随着培养时间的增加逐渐下降。结论:Cox7a2的过表达可干扰Sertoli细胞分泌功能,而五子衍宗丸含药血清对Sertoli细胞分泌产物的改善作用与抑制Cox7a2的表达有关;五子衍宗丸含药血清对Sertoli细胞的活力有一定的促进作用,且在高剂量组20%浓度血清培养基和支持细胞共培养24h后,Sertoli细胞活力最高。
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全文目录
中文摘要 4-6 Abstract 6-8 英文缩略语 8-9 第一部分 文献综述 9-23 五子衍宗丸药理作用及其临床研究进展 9-16 参考文献 13-16 支持细胞在精子发生中的作用 16-23 参考文献 21-23 第二部分 科学研究 五子衍宗丸含药血清对大鼠睾丸支持细胞分泌产物和活力的影响 23-34 前言 23 材料与方法 23-25 结果 25-28 讨论 28-32 参考文献 32-34 致谢 34-35 个人简历 35
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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