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多效唑暴露对褐菖鮋抗氧化防御系统及精子发生的影响

作　者: 李进寿
导　师: 蔡明夷
学　校: 集美大学
专　业: 渔业
关键词: 褐菖鮋多效唑抗氧化防御系统性腺发育机制
分类号: S917.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 5次
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内容摘要

多效唑是农业上使用广泛的三唑类杀菌剂和植物生长调节剂，但很少有研究涉及到多效唑对鱼类的毒理学效应。本研究以环境相关浓度(10，100，1000ng·L-1)的多效唑对褐菖鮋进行50d的水体暴露后，检测多效唑对褐菖鮋肝脏、脑与脾脏抗氧化防御系统指标的影响，并通过组织学切片与相关分子指标的测定以检测多效唑暴露对雄性褐菖鮋精巢发育的影响。结果显示，褐菖鮋脾脏的谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)、丙二醛（MDA）等相关指标在多效唑毒性作用下都出现了相应的变化，且这些变化与多效唑呈剂量-效应关系。表明多效唑的暴露对褐菖鮋的抗氧化防御系统的功能造成了损伤。实验的结果说明，多效唑等唑类农药的长期使用对鱼类等水生生物和水体环境造成了生态压力。在10，100和1000ng·L-1浓度的多效唑暴露50天后，尽管褐菖鮋的性体比指数无显著性的变化，但成熟精子数量减少，精原细胞与精母细胞数量的大量增加。多效暴露导致γ-谷氨酰转肽酶(性腺支持细胞的标志物)的活性呈浓度依赖性降低，这可能是对脑中的促卵泡激素（FSHβ）表达减少的结果。脑中多效唑的积累可能是影响精子发生的主要原因，这个效应可能通过脑－垂体－性腺轴实现。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-10
第1章引言  10-13
  1.1 农药的使用所产生的环境与生态问题  10
  1.2 三唑类农药的使用概况及其引起的生态问题  10-11
  1.3 三唑类农药毒理学研究现状  11
  1.4 抗氧化防御系统  11-12
    1.4.1 还原型谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)  11
    1.4.2 谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathionesu peroxidase, GSH-Px)  11
    1.4.3 谷胱甘肽硫转移酶（glutathione-S-transferase, GST）  11
    1.4.4 丙二醛(malondial dehyde, MDA)  11-12
  1.5 农药对鱼类的生殖毒性  12
  1.6 本研究的目的、意义和主要内容  12-13
第2章多效唑暴露对褐菖鮋脾脏抗氧化防御系统的影响  13-18
  2.1 材料与方法  13-14
    2.1.1 药品与试剂  13
    2.1.2 实验用鱼与暴露实验的设计  13
    2.1.3 实验仪器  13
    2.1.4 实验方法  13
    2.1.5 数据的处理  13-14
  2.2 结果与分析  14-16
    2.2.1 多效唑暴露下褐菖鮋脾脏 GSH 含量的变化  14
    2.2.2 GST 活性的变化  14-15
    2.2.3 GSHPx 活性的变化  15
    2.2.4 MDA 的变化  15-16
  2.3 讨论  16-17
  2.4 结论  17-18
第3章多效唑暴露对褐鲳鮋肝脏与脑组织抗氧化防御系统的影响  18-23
  3.1 材料与方法  18-19
    3.1.1 药品与试剂  18
    3.1.2 实验用鱼  18
    3.1.3 暴露实验的设计  18
    3.1.4 检测方法  18
    3.1.5 数据的处理  18-19
  3.2 实验结果  19-21
    3.2.1 肝脏与脑组织 GSH 的变化  19
    3.2.2 肝脏组织 GST 活性的变化  19-20
    3.2.3 肝脏组织 GSHPx 活性的变化  20
    3.2.4 肝脏与脑 CAT 活性的变化  20-21
  3.3 讨论  21-22
  3.4 结论  22-23
第4章多效唑暴露干扰雄性褐菖鮋的精子发生  23-30
  4.1 材料与方法  23-25
    4.1.1 药品  23
    4.1.2 样品的处理和收集  23
    4.1.3 组织学分析  23
    4.1.4 样品多效唑累积量的检测  23-24
    4.1.5 γ-glutamyl transpeptidase (γ-GTP)活性的分析  24
    4.1.6 Caspase-3 的测定  24
    4.1.7 Real-time PCR 分析  24
    4.1.8 数据处理  24-25
  4.2 实验结果  25-29
    4.2.1 性体比（GSI）及组织学观察  25-26
    4.2.2 基因表达的分析  26-27
    4.2.3 γ-GTP 活性  27-28
    4.2.4 Caspase-3 活性  28
    4.2.5 多效唑在褐菖鮋精巢与脑组织的积累  28-29
  4.3 讨论  29-30
第5章结论  30-31
  5.1 研究结论  30
  5.2 本研究的创新点  30-31
致谢  31-32
参考文献  32-36
在学期间发表的学术论文  36

多效唑暴露对褐菖鮋抗氧化防御系统及精子发生的影响

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