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微生态制剂治疗奶牛子宫内膜炎的试验研究

作　者: 薛洋洋
导　师: 杨玉英
学　校: 黑龙江八一农垦大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 奶牛子宫内膜炎奶牛微生态制剂防治
分类号: S858.23
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
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内容摘要

奶牛子宫内膜炎是奶牛在产后普遍发生的一种常见多发病，随着我国养殖事业的发展，奶牛子宫内膜炎疾病已经越来越被人们所重视。由于患子宫内膜炎疾病后会引起奶牛的不孕及其它生殖器官等疾病，这给养殖产业带来了巨大的经济损失。目前，国内外治疗奶牛子宫内膜炎疾病最常用的的方法是对患病奶牛局部或全身使用抗生素类药物给药的治疗方法，但是反复使用抗生素类药物会使奶牛产生耐药性，还会使奶牛的免疫能力降低。从健康奶牛体内分离出大量的细菌其中主要的细菌是乳酸杆菌，从患病奶牛子宫内分离出最主要的三种致病的病原菌是金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和大肠杆菌。将从健康奶牛体内分离到的乳酸杆菌做抑菌实验分离出抑菌最强的一株乳酸杆菌做染色镜检、生化试验和细菌的PCR检测结果确定该菌株为嗜酸性乳杆菌。安全性动物实验研究确定嗜酸性乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和纳豆芽孢杆菌这三株菌株不会引起小鼠的死亡和其他它疾病。通过对这三株菌株的生物学特性研究最终确定嗜酸性乳杆菌最佳的培养方式：起始PH6.6、菌液接种量为3%、39℃静置厌氧培养；鼠李糖乳杆菌最佳的培养方式：起始PH6.4、菌液接种量为4%、39℃震荡厌氧培养；纳豆芽孢杆菌最佳的培养方式：起始PH7.0、菌液接种量为4%、37℃震荡有氧培养。将三株菌在最适的培养条件下培养后，按一定比例混合制成微生态制剂对建模成功的小鼠和家兔进行治疗，从剖检和病理切片结果观察，有一定的治疗效果。复合微生态制剂治疗患子宫内膜炎的奶牛，通过对奶牛的观察和触诊结果可看出效果良好。综上所述，微生态治疗对奶牛子宫内膜炎疾病的建模动物和奶牛的临床治疗都有一定的效果，并且微生态制剂是益生菌不会给奶牛带来危害，所以此方法为下一步的临床试验奠定试验基础。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-9
第一章引言  9-17
  1.1 奶牛子宫内膜炎的主要病因  9-12
    1.1.1 奶牛子宫内膜的内因  9-10
    1.1.2 奶牛子宫内膜的外因  10-12
  1.2 奶牛子宫内膜炎的主要治疗方法  12-15
    1.2.1 子宫冲洗  12
    1.2.2 子宫灌注抗生素  12-13
    1.2.3 中药治疗  13
    1.2.4 激素治疗  13-14
    1.2.5 干燥法治疗  14
    1.2.6 激光治疗  14
    1.2.7 生物制剂治疗  14-15
  1.3 小结  15-17
第二章患子宫内膜炎奶牛子宫内细菌的分离鉴定  17-21
  2.1 试验材料  17
    2.1.1 样品  17
    2.1.2 培养基  17
    2.1.3 主要试剂  17
    2.1.4 主要仪器设备  17
  2.2 试验方法  17-18
    2.2.1 样品的采集  17-18
    2.2.2 细菌的分离鉴定  18
  2.3 结果与分析  18
    2.3.1 患子宫内膜炎奶牛生殖道内细菌分离结果  18
  2.4 讨论  18-21
第三章健康奶牛子宫内细菌的分离鉴定  21-29
  3.1 试验材料  21-22
    3.1.1 菌种  21
    3.1.2 培养基  21
    3.1.3 主要试剂  21
    3.1.4 主要仪器设备  21-22
  3.2 试验方法  22-24
    3.2.1 细菌的鉴定  22
    3.2.2 抑菌试验  22
    3.2.3 菌株 PCR 鉴定  22-24
  3.3 试验结果  24-27
    3.3.1 菌株的生化鉴定结果  24-25
    3.3.2 抑菌试验结果  25
    3.3.3 LB-7 的鉴定结果  25-27
  3.4 讨论  27-29
第四章复合微生态制剂的生物学特性研究  29-38
  4.1 试验材料  29
    4.1.1 实验菌株  29
    4.1.2 实验培养基  29
    4.1.3 实验动物  29
    4.1.4 主要仪器  29
  4.2 试验方法  29-31
    4.2.1 活化冻干菌株  29-30
    4.2.2 菌株的生长曲线测定  30
    4.2.3 培养基的起始 pH 与菌种生长关系的测定  30
    4.2.4 菌株的培养温度对生长影响测定  30
    4.2.5 菌株不同的培养方式对生长影响测定  30-31
    4.2.6 菌株的接种量对生长影响测定  31
    4.2.7 培养基装液量对菌种生长影响测定  31
    4.2.8 体外的抑菌试验  31
    4.2.9 三株菌种之间的相容性试验  31
    4.2.10 单个菌株的安全性试验  31
  4.3 试验结果  31-35
    4.3.1 三株菌株的生长曲线的测定结果  31-32
    4.3.2 起始 pH 对三株菌种生长影响的测定结果  32-33
    4.3.3 菌株的培养温度对生长影响的测定结果  33
    4.3.4 菌株的接种量对生长影响的测定结果  33-34
    4.3.5 培养基的装液量对菌种的生长影响测定结果  34-35
    4.3.6 三株菌的体外抑菌试验结果  35
    4.3.7 三株菌种之间的相容性结果  35
    4.3.8 三株菌种单独对小鼠安全性试验结果  35
  4.4 讨论  35-38
第五章微生态制剂防治奶牛子宫内膜炎的动物试验研究  38-50
  5.1 试验材料  38
    5.1.1 菌种  38
    5.1.2 试验动物  38
    5.1.3 主要试剂  38
    5.1.4 实验器材  38
  5.2 试验方法  38-41
    5.2.1 微生态制剂制备  38-39
    5.2.2 微生态制剂的安全性研究  39
    5.2.3 小鼠子宫内膜炎病理模型的建立及治疗效果研究  39-40
    5.2.4 奶牛子宫内膜炎对家兔模型的建立及治疗效果  40-41
  5.3 实验结果  41-48
    5.3.1 微生态制剂安全性试验结果  41
    5.3.2 治疗建模小鼠的实验结果分析  41-47
    5.3.3 治疗建模家兔的实验结果分析  47-48
  5.4 小结  48-50
第六章微生态制剂治疗奶牛子宫内膜炎的试验  50-53
  6.1 材料与方法  50
    6.1.1 试验动物  50
    6.1.2 试验制剂  50
  6.2 试验方法  50
  6.3 临床疗效判定标准  50-51
  6.4 结果分析  51-53
第七章结论  53-54
参考文献  54-58
致谢  58-59
作者简历  59

微生态制剂治疗奶牛子宫内膜炎的试验研究

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