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野生草莓核型分析、基因组大小评估及其种质创新研究

作　者: 陈丙义
导　师: 乔玉山
学　校: 南京农业大学
专　业: 果树学
关键词: 野生草莓 核型 基因组大小 种间杂种 五倍体 秋水仙素 十倍体
分类号: S668.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


草莓属于蔷薇科(Rosaceae)草莓属(Fragaria)多年生草本植物。目前的八倍体栽培草莓凤梨草莓(Fragaria×ananassa)是由八倍体野生草莓种智利草莓(F.c-hiloensis)和弗州草莓(F. virginiana)偶然杂交得到的。野生草莓多具有芳香味浓、抗性强等潜在优良育种价值,是改良栽培草莓的宝贵资源。我国现有二倍体、四倍体、五倍体在内的丰富野生草莓资源,是世界上野生草莓资源最丰富的国家之一。为进一步认识野生草莓的染色体特征、基因组大小,通过种间杂交和染色体加倍技术加快对野生草莓的育种利用步伐,本研究主要从下四个方面进行：1.采用常规压片法对五叶草莓等6种野生草莓进行了核型分析。结果表明,6种野生草莓的核型公式分别为：五叶草莓2n=2x=14=12m+2sm、黄毛草莓2n=2x=14=8m+6sm、绿色草莓2n=2x=14=10m+2sm+2st、东北草莓2n=2x=14=8m+6sm、森林草莓2n=2x=14=6m+8sm、西南草莓2n=4x=28=16m+12sm,6种野生草莓的核型类型均为“2A”型。2.以拟南芥(Arabidopsis thaliana)为内标,用流式细胞仪测定6个野生草莓种7个待测样品的基因组大小。结果显示,6个野生草莓种的基因组大小从大到小分别为：黄毛草莓(274±3.80Mb),五叶草莓(红果)(268±3.73Mb),五叶草莓(白果)(258±5.40Mb),西南草莓(245±3.28Mb),东北草莓(241±4.28Mb),森林草莓(231±3.19Mb),绿色草莓(230±2.83Mb)。3.以八倍体栽培草莓品种‘房香’、‘红颊’、‘章姬’为母本,以二倍体野生草莓绿色草莓、东北草莓为父本进行种间杂交,经根尖染色体计数法共鉴定47株五倍体杂交后代实生苗,均为完全不育。4.以栽培草莓‘房香’和绿色草莓杂交得到的一株五倍体种间杂种(代号为FxLs-11-37)的离体茎尖为试材,利用秋水仙素进行多倍体诱导。通过形态学、流式细胞仪等方法进行倍性鉴定,共获得105个十倍体株系、141个混倍体株系。结果表明：1)以0.1%的秋水仙素处理48h最佳,十倍体诱导率最高,达42.22%；2)与五倍体相比,十倍体普遍表现出：叶片变厚,叶色浓绿,叶柄缩短变粗等多倍体特征。

全文目录


摘要  6-7
ABSTRACT  7-9
縮略语  9-10
第一章 文献综述  10-16
  1 野生草莓资源及其育种利用进展  10-12
    1.1 野生草莓资源  10
    1.2 野生草莓的育种价值  10-11
    1.3 野生草莓杂交育种及染色体加倍研究  11-12
  2 草莓染色体观察及核型分析  12
  3 流式细胞仪(fow cytometry,FCM)检测草莓倍性及细胞核DNA含量  12-13
  4 种间杂种鉴定方法  13-15
    4.1 形态学鉴定  13
    4.2 细胞学鉴定  13-14
    4.3 同工酶鉴定  14
    4.4 原位杂交  14
    4.5 分子技术  14-15
  5 倍体鉴定  15-16
    5.1 形态学特征  15
    5.2 染色体数目鉴定  15
    5.3 流式细胞仪技术  15-16
第二章 6种野生草莓的核型分析  16-24
  1 材料与方法  16-17
    1.1 材料  16-17
    1.2 根尖细胞染色体制片及观察  17
    1.3 核型分析方法  17
  2 结果与分析  17-22
    2.1 五叶草莓的核型分析  17
    2.2 黄毛草莓的核型分析  17-20
    2.3 绿色草莓的核型分析  20
    2.4 东北草莓的核型分析  20
    2.5 森林草莓的核型分析  20
    2.6 西南草莓的核型分析  20-22
  3 讨论  22-24
第三章 6种野生草莓种基因组大小的测定  24-32
  1 材料与方法  25-26
    1.1 实验材料  25
    1.2 实验方法  25-26
      1.2.1 细胞核悬浮液制备  25
      1.2.2 DNA特异性染色  25-26
      1.2.3 流式细胞仪检测  26
  2 结果与分析  26-30
  3 讨论  30-32
第四章 草莓五倍体种间杂种的获得  32-40
  1 材料与方法  33-34
    1.1 实验材料  33
    1.2 实验方法  33-34
  2 结果与分析  34-38
  3 讨论  38-40
第五章 秋水仙素诱导五倍体杂种草莓染色体加倍  40-48
  1 材料与方法  40-41
    1.1 实验材料  40-41
    1.2 实验方法  41
  2 结果与分析  41-45
    2.1 秋水仙素对草莓茎尖的诱导效果  41-44
    2.2 多倍体鉴定  44-45
  3 讨论  45-48
参考文献  48-54
全文结论  54-56
主要创新点  56-58
附录  58-60
攻读硕士学位期间所发表论文  60-62
致谢  62

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 果树园艺 > 多年生草本果类 > 草莓
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