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梨黑斑病生防细菌的筛选、鉴定及其生防活性的初步研究

作　者: 孙连波
导　师: 刘凤权
学　校: 南京农业大学
专　业: 植物病理学
关键词: 生物防治爱胜蚓噬几丁质菌筛选鉴定生防活性
分类号: S476
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

梨(Pyrus spp.)属于蔷薇科(Rosaceae)梨属(Pyrus)植物,我国是梨的重要起源地之一,是世界第一产梨大国。梨病害的产生及危害是限制我国梨产业健康发展的重要因子之一。据统计梨黑斑病(Pear black rot)是由链格孢(Alternaria sp.)类真菌引起的一种真菌性病害。梨黑斑病同梨黑星病和轮纹病共称为我国梨树的三大病害。目前控制梨黑斑病的主要方法仍然以化学杀菌剂为主。由于化学杀菌剂存在着抗药性和农药残留的问题,对人体和环境构成威胁。因此,筛选出抗菌谱广,生防活性高和对环境安全的新型细菌,进而制备出高效的生防菌剂,可以作为化学防治梨黑斑病的一种有益补充,减少化学农药的使用量,进而降低其污染。从山东梨树果园采集到25份土壤样品,分离到514株细菌,通过对梨黑斑病菌的室内拮抗实验,筛选出一株对梨黑斑病菌具有强拮抗作用的菌株并将其命名为SD2,室内测定其对梨黑斑病的拮抗圈达到9.5mm。为了明确其拮抗性能,我们室内测定该菌对梨轮纹病菌、梨腐烂病菌、梨炭疽病菌和稻瘟病菌等14种重要园艺和粮食作物病原真菌的拮抗效果,结果显示SD2对上述病原菌均具有较好的拮抗作用,拮抗圈的范围从4mm到17.5mm,拮抗范围较广。同时其对马铃薯软腐病菌也具有一定的拮抗作用,说明该菌对细菌也有拮抗活性。通过对拮抗菌的形态特征、生理生化特征及16S rDNA序列进行综合鉴定分析,该菌株鉴定为爱胜蚓噬几丁质菌(Chitinophaga eiseniae),在已报道的国外文献中,未发现有报道该菌对人体具有致病性,这为后续相关实验研究提供了保证。抗菌活性物质检测结果显示,该菌产生蛋白酶,但不产生几丁质酶、纤维素酶和β-1,3-葡聚糖酶等胞外水解酶。通过对其胞外酶及代谢产物的检测显示,该菌代谢产物抑制梨黑斑病菌黑色素形成、菌丝的正常生长、分生孢子的萌发,同时加热处理代谢产物也具有相似的作用。近年来,国内外已报道酵母菌(Candida sp.)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)对梨黑斑病有一定的抑制,但爱胜蚓噬几丁质菌防治梨黑斑病的研究还未见报道,进一步开发和应用该菌防治梨黑斑病具有一定的前景。

梨黑斑病生防细菌的筛选、鉴定及其生防活性的初步研究

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