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基于外翻肠囊法的补锌制剂生物利用率评价研究

作　者: 谭珏
导　师: 韩剑众
学　校: 浙江工商大学
专　业: 食品科学与工程
关键词: 肉仔鸡回肠外翻肠囊法补锌制剂不同时间不同浓度 Zn吸收率生物利用率
分类号: TS218
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

快速、高效、客观的评价各种微量元素补充剂的生物利用率,对于规范保健食品(剂)生产、消费和监管具有重要意义。以补锌制剂为例,市场经历了无机锌(硫酸锌为代表)、葡萄糖酸锌、甘草锌及氨基酸螯合锌、蛋白锌等有机锌过程,然而,对其生物利用率的评价无论是评价方法还是结果均十分混乱。如评价方法体内的有平衡试验法、同位素示踪法、原位结扎灌注肠段法、原位体肠灌流法；体外法则有体外灌注肠段法、外翻肠囊法、小肠刷状缘膜微粒法、细胞培养法等。本文以几种市售锌元素营养补充剂为研究对象,利用鸡回肠构建了外翻肠囊模型,通过灌注不同时间、不同浓度锌制剂的吸收效率,探索外翻肠囊法作为微量元素营养补充剂生物利用率评价方法的可行性及具体应用,以期为相关研究提供实验依据。本研究主要结果如下：1构建了基于肉仔鸡回肠的外翻肠囊模型。通过颈部宰杀肉仔鸡45只,解剖取其回肠,处理外翻后,制成肉仔鸡回肠外翻肠囊模型90只(一只回肠制成两只外翻肠囊)。选取无机锌(硫酸锌)、有机锌(氨基酸螯合锌)对模型进行评估。结果表明：(1)空白组与试验组浆膜液终体积并且无显著性差异(P>0.05),随时间变化趋势具有明显线性关系,线性拟合所得相关系数R2=0.909。(2)硫酸锌培养5、15、30、45、60min吸收率极显著增加(P<0.01),吸收率随时间变化经线性拟合后R2=0.990,并且肠囊在15min时对硫酸锌的吸收速率达到最大；氨基酸螯合锌在前30min内吸收率增加明显(P<0.01),随后变化趋于平缓,60min时再次出现增加的趋势,吸收率随时间变化经线性拟合后R2=0.947,在30min内肠囊对氨基酸螯合锌吸收效果较好。由此可知试验所构建的外翻肠囊模型具有较好的重复性、准确性,可用以评价不同补锌制剂的生物利用率。2补锌制剂在不同浓度、不同时间培养后的吸收规律。根据不同补锌制剂的单次推荐剂量设置本试验中灌注肠囊的四个锌浓度水平,分别为：5.28,14.12,20,32.4(μg/ml),培养肠囊10、20、30、40mmin。硫酸锌：吸收率都随着时间、浓度而增加。以锌浓度为32.4μg/ml(推荐量)下吸收率为100%。当锌浓度为5.28μg/ml时,培养4个时间吸收率可达8.74%-19.13%；当锌浓度为14.12μg/ml时,吸收率达到27.01%～45.52%；当锌浓度为20μg/ml时,吸收率达到63.61%-71.10%。由此可知,硫酸锌制剂在产品推荐摄入量下吸收效果最佳。肠囊对锌的扩散系数P在l0min时达到最大值为1.936±0.292cm2/min,此时肠囊对硫酸锌吸收最敏感。葡萄糖酸锌：4个浓度水平下,吸收率随着时间而增加。在锌浓度为32.4μg/ml时,培养时间超过20min后吸收率反而低于14.12和20μg/ml锌浓度水平。以锌浓度为14.12μg/ml(推荐量)下吸收率为100%。当锌浓度为5.28μg/ml时,培养4个时间吸收率达到18.30%-22.21%；当锌浓度为20μg/ml时,吸收率达到115.20%～121.11%；当锌浓度为32.4μg/ml时,吸收率达到138.23%～92.93%。由此可知,葡萄糖酸锌制剂在产品推荐剂量及锌浓度为20μg/ml时吸收效果都较好。P在10min时达到最大值为3.867±0.248cm2/min,此时肠囊对葡萄糖酸锌吸收最敏感。钙铁锌：较高的3个浓度水平之间,吸收率变化不显著(P>0.01),都随着时间表现为先增后减再增的趋势。以锌浓度为5.28μg/ml(推荐量)下吸收率为100%。当锌浓度为14.12μg/ml时,培养4个时间吸收率分别为89.84%、115.10%、75.38%、122.60%；当锌浓度为20μg/ml时,吸收率分别为122.85%、129.18%、97.74%、60.58%；当锌浓度为32.4μg/ml时,吸收率分别达到94.78%、127.44%、65.60%、101.92%。由此可知,钙铁锌制剂随着锌元素浓度的增加,其在肠囊中的吸收效果并不稳定。P在20mmin时达到最大值为1.063±0.212cm2/min,此时肠囊对钙铁锌吸收最敏感。甘草锌：在锌最大浓度32.4μg/ml时,吸收率随时间表现为先增后减的趋势。以锌浓度14.12μg/ml(推荐量)下吸收率为100%。当锌浓度为5.28μg/ml时,培养4个时间吸收率可达34.66%-47.35%；当锌浓度为20μg/ml时,吸收率可达119.82%～100.97%；当锌浓度为32.4μg/ml时,吸收率分别达到104.21%、101.40%、79.14%、76.21%。由此可知,甘草锌制剂在推荐剂量及锌浓度为20μg/ml时具有较好的吸收效果。P在l0min时达到最大值为3.447±0.230cm2/min,此时肠囊对甘草锌吸收最敏感。氨基酸螯合锌：在锌最大浓度32.4μg/ml下,吸收率随时间表现为先增后平再增再减的趋势。以锌浓度为20μg/ml(推荐量)下吸收率为100%。当锌浓度为5.28μg/ml时,培养4个时间吸收率可达27.77%-36.17%；当锌浓度为14.12μg/ml时,吸收率可达52.57%-62.64%；当锌浓度为32.4μg/ml时,吸收率分别达到131.27%、85.57%、106.36%、97.84%。由此可知,氨基酸螯合锌制剂在其推荐剂量下较为稳定,吸收效果较好。P在10min时达到最大值为3.256±0.420cm2/min,此时肠囊对氨基酸螯合锌吸收最敏感。综上所述,葡萄糖酸锌、甘草锌在肉仔鸡回肠中生物利用率较高,氨基酸螯合锌次之,硫酸锌和钙铁锌较差。

全文目录

摘要  3-7
ABSTRACT  7-15
第一章引言  15-32
  1.1 锌的生物学功能与补锌制剂  16-26
    1.1.1 锌的生物学功能  16-19
    1.1.2 锌的吸收与代谢  19-22
    1.1.3 影响锌吸收的因素  22-23
    1.1.4 锌的人体生理需求量  23-24
    1.1.5 补锌制剂的发展  24-26
  1.2 锌生物利用率的评定方法  26-30
    1.2.1 体内法评价锌生物利用率  26-28
    1.2.2 体外法评价锌生物利用率  28-29
    1.2.3 外翻肠囊法评价锌生物利用率  29-30
  1.3 课题研究目的、意义及主要内容  30-32
    1.3.1 研究目的与意义  30-31
    1.3.2 研究内容  31-32
第二章外翻肠囊的构建及有效性的验证  32-43
  2.1 材料与方法  32-36
    2.1.1 实验材料  32-34
    2.1.2 实验方法  34-36
  2.2 结果与分析  36-40
    2.2.1 外翻肠囊模型的构建  36-37
    2.2.2 浆膜液终体积在不同时间下的吸收变化趋势  37
    2.2.3 补锌制剂培养不同时间后的吸收规律分析  37-40
  2.3 讨论  40-43
    2.3.1 构建外翻肠囊操作及装置设计  40-41
    2.3.2 肠囊有效性及最佳培养时间确定  41-43
第三章基于外翻肠囊法的补锌制剂生物利用率评价研究  43-68
  3.1 材料与方法  43-47
    3.1.1 实验材料  43-45
    3.1.2 实验方法  45-47
  3.2 结果与分析  47-62
    3.2.1 硫酸锌  47-50
    3.2.2 葡萄糖酸锌  50-52
    3.2.3 钙铁锌  52-55
    3.2.4 甘草锌  55-57
    3.2.5 氨基酸螯合锌  57-60
    3.2.6 五种补锌制剂锌吸收率比较分析  60-62
  3.3 讨论  62-68
    3.3.1 五种锌源在肉仔鸡回肠外翻肠囊中的吸收  62-66
    3.3.2 五种锌源在肉仔鸡回肠外翻肠囊中的吸收动力学  66-68
第四章总结与展望  68-70
  4.1 总结  68-69
  4.2 需要进一步解决的问题  69-70
参考文献  70-75
致谢  75-76
硕士期间发表文章  76-77

基于外翻肠囊法的补锌制剂生物利用率评价研究

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