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易激胶囊对腹泻型肠易激综合征模型大鼠VIP和MC表达的影响的实验研究

作　者: 杨淑萍
导　师: 胡运莲
学　校: 湖北中医药大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 易激胶囊肠易激综合征血管活性肠肽肥大细胞
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：通过观察腹泻型肠易激综合征(简称IBS)大鼠模型的血浆及其结肠组织中的血管活性肠肽(简称VIP)的表达程度的改变和其盲肠黏膜组织中的肥大细胞(简称MC)计数的变化,来探讨中药易激胶囊的相关作用机制。方法：1.造模：随机选用60只雄性SD大鼠,体重(160±20)g。应用束缚-制动应激法与化学物质灌肠结肠刺激法相结合制备腹泻型肠易激综合征动物模型。造模过程完成后,对模型组各组大鼠均进行内脏神经敏感性的评估(腹部回缩反射),用以评估造模是否成功。2.动物分组及给药：造模成功后将实验大鼠随机分成6组(正常对照组、模型对照组、西药治疗组、中药低剂量治疗组、中药中剂量治疗组、中药高剂量治疗组)。各组均以10ml/kg等容积灌胃给药。其中正常对照组和模型对照组均用生理盐水灌胃,西药治疗组采用浓度为1.8mg/ml的得舒特药液灌胃,中药易激胶囊低剂量治疗组用浓度为0.225g/ml的易激胶囊药液灌胃,中药易激胶囊中剂量治疗组用浓度为0.45g/ml的易激胶囊药液灌胃,中药易激胶囊高剂量治疗组用浓度为0.9g/ml的易激胶囊药液灌胃。各组灌胃均每天1次,持续2周。3.指标检测：①观察各组大鼠直肠内球囊扩张时它们腹部回缩反射的容量阈值及当扩张量为1.0ml时3min内大鼠腹部收缩次数。②采用酶联免疫吸附测定法(Elisa)检测大鼠血浆及结肠黏膜组织中VIP的表达。③通过甲苯胺蓝染色法对其盲肠黏膜组织MC染色后光镜下计数10个高倍视野内的MC数。结果：1.模型对照组、中药低剂量治疗组、中药中剂量治疗组大鼠引起腹部回缩反射的容量阈值明显低于正常对照组大鼠,差异显著(P<0.05),而西药治疗组、中药高剂量治疗组与正常对照组比较,均无显著差异(P>0.05)；各个治疗组与模型对照组比较,差异显著(P<0.05)；各中药治疗组与西药治疗组比较,均无显著差异(P>0.05)。模型对照组、中药低剂量治疗组、中药中剂量治疗组与正常对照组比较,注水量为1.0ml时3min内大鼠腹壁反射次数明显增高,差异显著(P<0.05),而其它各治疗组与正常对照组比较,均无显著差异(P>0.05)；各治疗组与模型对照组比较,差异显著(P<0.05)；各中药治疗组与西药治疗组比较,均无显著差异(P>0.05)。此结果表明,易激胶囊对大鼠肠道致敏后所引起的行为学改变起到恢复作用。2.模型对照组、西药治疗组、中药低剂量治疗组、中药中剂量治疗组与正常对照组比较,大鼠血浆中VIP的含量均差异显著(P<0.05),而中药高剂量治疗组与正常对照组比较,大鼠血浆中VIP的含量无显著差异(P>0.05)；中药各治疗组与模型对照组比较,大鼠血浆中VIP的含量均差异显著(P<0.05)；各中药治疗组与得西药治疗组比较,大鼠血浆中VIP含量均差异显著(P<0.05)。此结果表明各模型组大鼠血浆中的VIP含量较正常对照组均有升高,而易激胶囊能够明显降低模型组大鼠血浆中的VIP含量。3.模型对照组、西药治疗组、各中药治疗组与正常对照组比较,大鼠结肠组织中VIP的含量均差异显著(P<0.05)；中药各治疗组与模型对照组比较,大鼠结肠组织中VIP的含量差异显著(P<0.05)；各中药治疗组与得西药治疗组比较,大鼠结肠组织中VIP含量差异显著(P<0.05)。此结果表明各模型组大鼠结肠组织中的VIP含量较正常对照组均有升高,而易激胶囊能够明显降低模型组大鼠结肠组织中的VIP含量。4.模型对照组、西药治疗组、中药低剂量治疗组、中药中剂量治疗组与正常对照组比较,大鼠盲肠黏膜组织中的MC计数均差异显著(P<0.05),而中药高剂量治疗组与正常对照组比较,大鼠盲肠黏膜组织中的MC计数无明显差异(P>0.05)；西药治疗组、中药中剂量治疗组、中药高剂量治疗组与模型对照组比较,大鼠盲肠黏膜组织中的MC计数均差异显著(P<0.05)。此结果表明各模型组大鼠结肠黏膜组织中的MC计数较正常对照组均有升高,而易激胶囊和西药得舒特均能够明显降低模型组大鼠结肠黏膜组织中的MC计数。结论：1.腹泻型肠易激综合征模型大鼠血浆及结肠组织中VIP含量明显增高,表明血管活性肠肽(VIP)可能是引发肠易激综合征的重要生物活性物质。2.腹泻型肠易激综合征模型大鼠、盲肠黏膜组织中MC计数明显增高,表明肠易激综合征的发生可能跟MC的增多与活跃相关。3.易激胶囊能较明显提升腹泻型肠易激综合征模型大鼠腹部回缩反射时的容量阈值以及降低单位时间内等容量直肠球囊扩张时大鼠腹壁反射次数。表明易激胶囊能降低腹泻型肠易激综合征模型大鼠的内脏神经高敏感性。4.易激胶囊能降低腹泻型肠易激综合征模型大鼠血浆和结肠组织中的VIP含量。表明其治疗机制之一可能是通过降低血浆和结肠组织中的VIP含量,来降低内脏神经的敏感性,从而降低肠道对外来刺激的敏感性。5.易激胶囊能降低腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠黏膜组织中的MC计数。表明其另外一个治疗机制可能是通过减少MC的浸润和抑制MC的活动,减少相关生物物质的释放以达到缓解腹痛腹泻的目的。6.中药易激胶囊的治疗效果在改善腹泻型肠易激综合征的症状上的作用较为显著。而且其治疗效果在一定范围内与其剂量成正比关系,高剂量效果更加显著。

全文目录

摘要  5-8
英文摘要  8-13
略缩词表  13-14
前言  14-17
实验研究  17-22
  1 实验材料  17-18
    1.1 实验动物  17
    1.2 药品及试剂  17
    1.3 实验仪器  17-18
  2 实验操作  18-19
    2.1 模型制备  18-19
    2.2 分组及给药  19
  3. 检测观察指标  19-22
    3.1 行为检测  19
    3.2 血清和结肠组织中VIP含量检测  19-21
    3.3 盲肠黏膜组织MC计数测定  21-22
结果  22-28
  1. 行为检测  22-23
    1.1 容量阈值  22
    1.2 扩张量为1.0ml时3min内大鼠腹壁反射次数检测  22-23
  2. 血清和结肠组织中VIP含量检测  23-26
    2.1 VIP吸光度标准曲线的绘制  23-24
    2.2 血清中VIP的表达含量  24-25
    2.3 结肠组织中VIP的表达含量  25-26
  3. 盲肠黏膜组织MC计数测定  26-28
讨论  28-39
  1. 肠道高敏感性大鼠模型的建立与模型评估  28-29
  2. 西药对照组药物选择  29-30
  3. 易激胶囊的组方分析及组方依据  30-31
  4. 易激胶囊对D-IBS的作用机理探讨  31-36
    4.1 易激胶囊对D-IBS大鼠结肠组织中VIP含量的影响  31-33
    4.2 易激胶囊对D-IBS大鼠血清中VIP含量的影响  33-34
    4.3 易激胶囊对D-IBS大鼠盲肠黏膜组织中MC计数的影响  34-36
  5. 易激胶囊的现代药理学研究  36-39
结语  39-40
参考文献  40-46
附录综述  46-57
  参考文献  53-57
致谢  57

易激胶囊对腹泻型肠易激综合征模型大鼠VIP和MC表达的影响的实验研究

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