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甘蓝型油菜黄化突变体的基因定位

作　者: 陈艳丽
导　师: 傅廷栋
学　校: 华中农业大学
专　业: 作物遗传育种
关键词: 甘蓝型油菜 黄化突变体 叶绿素含量 内囊体 基因定位
分类号: S565.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 33次
引　用: 2次
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内容摘要


叶片是植物进行光合作用的主要器官,在植物生长发育过程中起着重要的作用。叶色发生突变会影响植株的光合作用和生长发育。叶色突变体不仅是研究高等植物光合作用不可或缺的重要材料,同时也对研究叶绿素的生物合成,叶绿体结构发育和遗传转化,了解核质互作等发面具有重要的作用。叶色突变体还可作为标记性状应用于杂交种子的纯度鉴定。甘蓝型油菜黄化突变体bnaC.ygl是在甘蓝型油菜品系T6的EMS诱变后代中发现的,该突变体黄化性状受1对隐性核基因控制。bnaC.ygl基因被定位于甘蓝型油菜的N17连锁群。本研究以甘蓝型油菜黄化突变体系bnaC.ygl及其野生型T6为材料,研究其叶绿素含量和叶绿体的形态和发育。并对突变体bnaC.ygl进行了基因定位。主要取得的研究结果如下：1.苗期测量bnaC.ygl和T6的叶绿素含量,结果表明bnaC.ygl的叶绿素含量较T6的表现下降,叶绿素a和叶绿素b分别下降40.3%和57.7%,说明bnaC.ygl黄化性状是总叶绿素含量的大幅度下降引起的。而叶绿素a/b却显著高于T6(P<0.05),表明叶绿素b的下降幅度大于叶绿素a。2.运用透射电子显微镜观察突变体和T6的叶绿体形态和发育,结果显示,虽然bnaC.ygl叶绿体的形状和T6一样呈纺锤状,但是bnaC.ygl叶绿体的基粒垛叠少,内囊体膜明显减少。表明该突变体中叶绿体的发育受到一定程度的影响。3.选取bnaC.ygl与丙409的F2、BC3和BC4作为定位群体。利用绿叶基因池和黄叶基因池筛选EM、PM和TE组合的AFLP引物,用在基因池中表现出多态性的引物扩增绿苗和黄化苗基因池中的单株。再用表现出多态性的引物扩增BC4群体中的2400单株。共得到28个与bnaC.ygl基因连锁的标记,其中的20个标记与目标基因距离较近,均为0.42cM。

全文目录


摘要  6-7
ABSTRACT  7-9
1 文献综述  9-26
  1.1 植物叶色突变体研究进展  9-20
    1.1.1 叶色突变体的来源  9-12
    1.1.2 叶色突变体的分类  12
    1.1.3 叶色突变体的遗传研究  12-13
    1.1.4 叶色突变体的分子机制  13-15
    1.1.5 叶色突变体的叶绿体超微结构的研究  15-16
    1.1.6 叶色突变体表型和叶绿素含量的关系  16
    1.1.7 叶色突变体的应用价值  16-20
  1.2 图位克隆技术  20-25
    1.2.1 图位克隆的原理  20-21
    1.2.2 图位克隆的技术环节  21-23
    1.2.3 图位克隆的发展  23-24
    1.2.4 图位克隆技术的不足  24-25
  1.3 本研究的目的及意义  25-26
2 实验的材料和方法  26-33
  2.1 供试材料  26
  2.2 叶绿素含量的测定  26-27
  2.3 叶绿体透射电镜  27
  2.4 AFLP分析  27-29
    2.4.1 DNA的提取  27-28
    2.4.2 总DNA的酶切和连接  28
    2.4.3 预扩增  28
    2.4.4 选择性扩增  28
    2.4.5 电泳检测  28-29
  2.5 AFLP标记的克隆与SCAR标记的转化  29-32
    2.5.1 分子标记的差异片段回收及连接  29-30
    2.5.2 感受态细胞的制备  30
    2.5.3 连接转化  30-31
    2.5.4 重组子的筛选和鉴定  31
    2.5.5 Scar引物的设计和扩增  31-32
  2.6 连锁遗传分析  32
  2.7 标记位点和拟南芥同源性分析  32-33
3 结果与分析  33-41
  3.1 黄化突变体(bnaC.ygl)和野生型的叶绿素含量  33
  3.2 黄化突变体(bnaC.ygl)透射电镜的观察  33-34
  3.3 黄化基因的连锁分析  34-40
  3.4 标记位点与拟南芥同源性分析  40-41
4 讨论  41-44
  4.1 叶色突变体的表型和遗传  41
  4.2 叶色突变体的叶绿素含量和叶绿体内囊体结构  41-42
  4.3 叶色突变基因的定位  42-43
  4.4 叶色突变体的应用  43-44
参考文献  44-50
个人简历  50-51
致谢  51

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 油料作物 > 油菜籽（芸薹）
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