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迷迭香精油通过嗅觉通路改善C57BL/6鼠的学习记忆的实验研究

作　者: 操礼琼
导　师: 傅佳；李光武
学　校: 安徽医科大学
专　业: 神经病学
关键词: 迷迭香精油嗅觉通路学习记忆神经递质 c-fos 海马
分类号: R965
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的本实验采用ZnSO4制作嗅上皮毁损模型，观察挥发性的芳香物质迷迭香精油吸嗅后对C57BL/6鼠学习记忆能力的影响；使用免疫组织化学方法检测迷迭香精油吸嗅后C57BL/6鼠海马CA1区即早基因（c-fos）和胆碱酯酶（AchE）、谷氨酸受体（GluR1）的变化情况，为迷迭香精油改善学习记忆提供实验依据，并初步探讨迷迭香精油改善学习记忆的可能机制。方法通过神经行为学筛选及制备嗅上皮毁损模型，把C57BL/6鼠随机分为对照组、假手术组、模型组（嗅上皮毁损组）、嗅上皮完整＋迷迭香精油组、模型＋迷迭香精油组；采用Lashley-III水迷宫和嗅觉辨识记忆实验等行为学方法测定迷迭香精油吸嗅对C57BL/6鼠的空间学习记忆和嗅觉辨识记忆的影响；并进行免疫组织化学方法检测各组小鼠海马角1（cornu ammonis CA1）区即早基因（c-fos）、乙酰胆碱酯酶（AchE）和谷氨酸受体(GluR1)的表达情况，并对结果进行灰度值和平均吸光度值分析。结果1水迷宫试验中，吸嗅前对照组、假手术组、模型组、嗅上皮完整＋迷迭香精油组和模型＋迷迭香精油组潜伏期之间差异均无统计学意义（P>0.05）；在吸嗅第7、14d嗅上皮完整＋迷迭香精油组潜伏期缩短，与对照组比较有统计学差异(P<0.05)；在吸嗅第7、14d模型组、假手术组和模型＋迷迭香精油组的潜伏期未见明显变化，与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。2.嗅觉辨识记忆实验中，吸嗅前对照组、假手术组、模型组、嗅上皮完整＋迷迭香精油组和模型＋迷迭香精油组潜伏期之间差异均无统计学意义（P>0.05）；在吸嗅第7、14d嗅上皮完整＋迷迭香精油组潜伏期缩短，与对照组比较有统计学差异(P<0.05)；假手术组、模型组、模型＋迷迭香精油组C57BL/6鼠在第7、14d水迷宫潜伏期的结果变化不明显，与对照组比较无统计学意义（P>0.05）。3.各组C57BL/6鼠海马CA1区c-fos的表达：参照鼠脑立体定位图谱（第五版，George Paxinos，Keith B J Franklin），在海马CA1区，c-fos阳性细胞呈棕黄色染色或棕褐色点状，c-fos的免疫反应阳性产物主要沉积在细胞核当中。对照组阳性细胞数和灰度值与模型组、假手术组、模型＋迷迭香精油组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；与对照组比较，嗅上皮完整＋迷迭香精油组阳性细胞数和灰度值差异有统计学意义(P<0.05)。4.各组C57BL/6鼠海马CA1区AchE和GluR1的表达：参照鼠脑立体定位图谱，在海马CA1区，AchE阳性细胞呈黄褐色，集中存在细胞浆内和轴突及树突近端，而细胞核显色不明显。对照组阳性细胞数和平均吸光度值与模型组、假手术组、模型＋迷迭香精油组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；与对照组比较，嗅上皮完整＋迷迭香精油组阳性细胞数量和平均吸光度值差异有统计学意义(P<0.05)。在海马CA1区，表达GluR1阳性的细胞胞浆显色明显，呈现深棕色，集中存在细胞胞膜、胞质、轴突和树突近端，胞核未着色。对照组阳性细胞数和平均吸光度值与模型组、假手术组、模型＋迷迭香精油组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；与对照组比较，嗅上皮完整＋迷迭香精油组阳性细胞数量和平均吸光度值差异有统计学意义(P<0.05)。结论1.迷迭香精油通过嗅觉途径改善C57BL/6鼠学习记忆能力。2.迷迭香精油吸嗅改善C57BL/6鼠的学习记忆可能与海马CA1区相关。3.海马CA1区AchE和GluR1的变化可能介导了迷迭香精油改善C57BL/6鼠的学习记忆能力。

迷迭香精油通过嗅觉通路改善C57BL/6鼠的学习记忆的实验研究

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