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光损伤中视网膜TNF-α、IL-1β的表达及乌司他丁的保护作用

作　者: 朱明琼
导　师: 邝国平
学　校: 南华大学
专　业: 眼科学
关键词: 大鼠视网膜光损伤 TNF-α IL-1β 乌司他丁免疫组织化学法
分类号: R774.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：通过成功建立大鼠视网膜紫外线光损伤模型来观察光损伤中大鼠视网膜肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor α，TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin1β,IL-1β）的表达情况，及预先使用乌司他丁（ulinastatin,UTI）对TNF-α、IL-1β表达的影响，以探索乌司他丁对视网膜光损伤的保护作用及机制。方法：选斯普拉-道来氏(Sprague-Dawley，SD)大鼠30只，均为雌性，随机分为正常对照组、光照对照组（紫外线光照）和光照实验组（紫外线光照+乌司他丁药），后两组再分为光照3天、7天组，每组各6只大鼠（12只眼）。所有大鼠均在12小时明（30Lux-50Lux）12小时暗环境中饲养7天，然后暗适应36小时。正常对照组暗适应后不经任何处理直接取标本；光照对照组和光照实验组每日经光照强度为2200±138Lux的300-400nm中长波紫外线灯连续光照8小时（9:00—17:00）后送回暗室饲养。光照前3天始，每日上午8:30给光照实验组腹腔注射乌司他丁液1次（2万U/Kg），用药至取标本当日。三组均于预定的时间点取双眼球，行苏木素-伊红染色（hematoxylin and eosin staining，HE），光镜下观察视网膜形态变化，免疫组织化学方法分析TNF-α和IL-1β表达变化，计算机图像分析软件（Image-Pro Plus,IPP）分析视网膜外核层（outer nuclearlayer，ONL）厚度、TNF-α及IL-1β表达情况。数据采用SPSS19.0for Windows进行统计分析。结果：1、制备了理想的视网膜光损伤动物模型；2、正常对照组大鼠视网膜形态正常，TNF-α与IL-1β未见阳性染色；3、光照对照组视网膜3天、7天组均出现病理性改变，ONL厚度、TNF-α及IL-1β表达量和正常对照组相比较，P<0.01；4、实验对照组视网膜3天、7天组出现病理性改变，较光照对照组损伤为轻，两时间点ONL厚度、TNF-α与IL-1β表达量和正常对照组、光照对照组相比较，P值均<0.05。结论：1、紫外线光能够导致大鼠视网膜光损伤，光感受器受损，视细胞凋亡；2、大鼠视网膜光损伤TNF-α、IL-1β表达增加，TNF-α、IL-1β参与且可能加重视网膜光损伤；3、乌司他丁可以通过抑制TNF-α、IL-1β分泌细胞的活性，降低TNF-α、IL-1β的表达来保护视网膜光损伤。

光损伤中视网膜TNF-α、IL-1β的表达及乌司他丁的保护作用

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