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鼻咽癌中PCDH8基因甲基化的研究

作　者: 何丹
导　师: 胡国华
学　校: 重庆医科大学
专　业: 耳鼻咽喉科
关键词: PCDH8 甲基化鼻咽癌
分类号: R739.63
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

目的：PCDH8（Protocadherin8）基因是部分肿瘤发展进程中的一种肿瘤抑制物，本实验旨在研究PCDH8的甲基化水平及其在鼻咽癌中的抑癌功能。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR），检测鼻咽癌细胞系C666-1、CNE1、HK1、HNE1、HONE1，正常的人的鼻咽上皮细胞系NP69及下咽癌细胞系Fadu里面PCDH8mRNA的转录的水平。在细胞系、41例鼻咽癌组织和16例慢性鼻咽炎组织中PCDH8启动子的甲基化水平用甲基化特异性PCR（MSP）来进行测定。然后再用该基因转染鼻咽癌细胞CNE1，检测该基因对该细胞的生理作用。结果：在正常鼻咽上皮细胞系NP69及下咽癌细胞系Fadu里面，PCDH8基因是稳定表达的。在这些鼻咽癌细胞系里面，HK1和HNE1细胞的表达是下调的，另三株均的表达是缺失的。甲基化的分析显示，PCDH8基因在鼻咽癌细胞系及Fadu细胞系中均发生了甲基化，鼻咽癌组织中甲基化率为85.3%(35/41)，而在正常鼻咽细胞系NP69和慢性鼻咽炎组织中均未发生甲基化。PCDH8基因的启动子的甲基化的水平与鼻咽癌病人的临床的病理参数全部没有任何的联系。用5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine，Aza)和曲古菌素A （trichostatin A，TSA）处理鼻咽癌细胞后，可恢复PCDH8的表达。PCDH8在鼻咽癌细胞里面的过表达，抑制了CNE1的生长和移动。结论：本实验第一次研究说明了PCDH8基因在鼻咽癌的细胞和组织里面都发生了启动子的甲基化，它还可以抑制CNE1的生长和移动。所以，PCDH8基因可以作为鼻咽癌的一个候选的抑瘤基因。

全文目录

英汉缩略语名词对照  5-7
摘要  7-9
ABSTRACT  9-11
前言  11-13
1 材料和方法  13-25
  1.1 材料  13-15
  1.2 方法  15-25
2 结果  25-31
  2.1 PCDH8 基因在正常鼻咽细胞和鼻咽癌细胞中的表达情况  25
  2.2 PCDH8 基因启动子甲基化在鼻咽癌细胞系中检测结果  25-26
  2.3 药物去甲基化恢复了 PCDH8 基因的表达水平  26-27
  2.4 PCDH8 基因启动子鼻咽癌组织中发生了频繁的甲基化  27-28
  2.5 PCDH8 基因启动子甲基化的临床病理意义  28
  2.6 PCDH8 基因的稳定表达抑制了鼻咽癌细胞的克隆形成和细胞的转移  28-31
3 讨论  31-33
总结  33-34
参考文献  34-37
论文综述  37-46
  参考文献  43-46
致谢  46-47
攻读硕士学位期间发表论文目录  47-48

鼻咽癌中PCDH8基因甲基化的研究

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