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GM II沉默对胃癌细胞BGC-823侵袭性作用的影响

作　者: 朱嫦
导　师: 易永芬
学　校: 重庆医科大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: GMⅡ 短发卡RNA 胃癌 侵袭
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


目的：构建shRNA干扰质粒抑制GMⅡ基因的表达，探讨其对胃癌侵袭能力的影响及其可能涉及到的分子机制。方法：将合成的靶向GMⅡ基因的pGPU6/GFP/Neo-GMⅡ-1406，应用阳离子脂质体法转染至胃癌细胞BGC-823，荧光倒置显微镜观察计算转染率，RT-PCR和Western-blot检测GMⅡ基因和蛋白的表达情况，应用RT-PCR，Western-blot检测转染前后MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白表达变化，利用细胞划痕试验检测GMⅡ被沉默后的细胞侵袭能力的变化，用Transwell侵袭小室法来测定GMⅡ被沉默后侵袭能力的变化。结果：将重组质粒成功稳定转染入胃癌细胞BGC-823，平均转染率为70％；与对照组相比，转染重组质粒pGPU6/GFP/Neo-GMⅡ-1406后的BGC-823细胞的GMⅡ和MMP-2、MMP-9的mRNA和蛋白表达呈下降趋势(P<0.05)；细胞划痕实验结果显示，转染重组质粒pGPU6/GFP/Neo-GMⅡ-1406组与对照组相比，GMⅡ被沉默后的胃癌细胞的侵袭能力降低(P<0.05)，Transwell体外侵袭实验显示，转染重组质粒pGPU6/GFP/Neo-GMⅡ-1406组与对照组相比，GMⅡ被沉默后的胃癌细胞的侵袭能力下降(P<0.05)。结论：被GMⅡ真核表达质粒有效抑制后的胃癌细胞的侵袭能力下降，可能与下调MMP-2、MMP-9的表达有关。

全文目录


英汉缩略语名词对照  5-7
摘要  7-9
ABSTRACT  9-11
前言  11-13
1 材料和方法  13-23
2 结果  23-28
3 讨论  28-32
全文小结  32-33
参考文献  33-36
文献综述  36-43
  参考文献  40-43
致谢  43-44
攻读硕士学位期间发表的论文  44-45

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 胃肿瘤
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