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一种新型免疫磁珠富集技术和肺癌循环肿瘤细胞检测

作　者: 嵇金陵
导　师: 沈佐君
学　校: 安徽医科大学
专　业: 临床检验诊断学
关键词: 循环肿瘤细胞免疫磁珠 EpCAM抗体肺癌
分类号: R734.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：建立一种新型的特异性和敏感性较高的检测肺癌患者外周血中循环肿瘤细胞（circulating tumor cells, CTCs）的方法，以利于发现早期肺癌隐形微转移、评估肺癌的预后、检测肺癌术后肿瘤复发与转移、选择治疗以及判断疗效。方法：（1）将不同数量（50～1000个）的肺癌细胞株（A549）混入2ml健康成人血标本中以模拟肿瘤患者的血样，对该血样进行红细胞裂解和离心，沉淀所得细胞与经过免疫磁珠标记的上皮细胞粘附分子（epithelial cell adhesion molecule,EpCAM）抗体发生反应，然后经一套自制的检测装置（由输液泵、水平摇床、富集容器以及真空泵四个部分组成）对细胞进行富集和分离，与磁标记的EpCAM抗体反应后的上皮细胞因为磁力的作用被集中在一张玻片上，最后用经典的HE染色鉴定循环肿瘤细胞并计数。（2）计算掺入细胞实验的肿瘤细胞回收率以验证该方法的稳定性和敏感性，同时检测20例健康志愿者血标本验证该方法的特异性。（3）用上述方法检测42例肺癌患者外周血中的CTCs。结果：在健康志愿者2ml外周血中分别掺入不同数目A549细胞株的条件下，肿瘤细胞的回收率在68%～82%之间，掺入细胞间回归方程为y=0.6419x+8.8875，相关系数为0.9958。血标本中掺入肿瘤细胞数量越多，检出肿瘤细胞数也越多，含不同数量肿瘤细胞的各样本组回收率之间比较差异无统计学意义（P>0.05）。42例肺癌患者中有18（42.9%）例为CTCs阳性，随着肿瘤的增大或转移，CTCs检测的阳性率逐渐增高。20例健康志愿者血标本均未检测到CTCs。结论：新型免疫磁珠富集技术可以有效的分离和鉴定肺癌患者外周血中的CTCs,并且具备操作简单、成本较低、检测迅速等特点，检测到的结果与临床肿瘤病人的病程进展有关，对进一步精确评估肺癌预后及指导治疗有较高的临床价值。

全文目录

英文缩略词表  5-7
摘要  7-9
Abstract  9-11
前言  11-13
1 材料与仪器  13-15
2 实验方法  15-18
3 结果  18-24
讨论  24-27
结论  27-28
参考文献  28-31
附录  31-32
致谢  32-33
综述  33-41
  参考文献  38-41

一种新型免疫磁珠富集技术和肺癌循环肿瘤细胞检测

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