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一、表柔比星所致的大鼠卵巢损伤动物模型的建立目的观察表柔比星(EPI)对大鼠卵巢各级卵泡数目和性激素水平的影响,建立表柔比星致大鼠卵巢损伤的动物模型。方法以Wistar雌性大鼠为研究对象,把符合实验标准的24只大鼠随机分成3组,每组8只,分别为Control组,EPI15mg/kg组,EPI30mg/kg组。于实验开始的第1天分别给与不同处理：Control组无处理,EPI15mg/kg组,EPI30mg/kg组,大鼠尾静脉注射不同剂量的EPI溶液15mg/kg、30mg/kg,第8天重复处理一次。给药后观察大鼠的一般情况,包括大鼠活动、进食、体重及动情周期,全部大鼠分别在给药前、给药后第2d、4d、6d、8d、10d、12d经尾静脉取血1ml测雌二醇、促卵泡生成素,给药后12天处死全部大鼠,取其卵巢进行石蜡切片进行HE染色,观察卵巢形态及各级卵泡数目的变化。结果给药后各EPI处理组大鼠体重均呈不同程度的下降,食欲较给药前明显下降并成时间及剂量依赖性(F=174.198,F=226.294,F=282.294,p均为0.000)；用药后,Control组动情周期仍规律：EPI15mg/kg组大鼠虽有完整的动情周期,但延长至8-9天；EPI30mg/kg组大鼠出现动情周期紊乱,长时间停滞于动情间期。EPI处理组大鼠E2水平下降,FSH水平升高,两EPI处理组与Control组FSH,E2水平各组间有显著差异,有统计学意义(F=7.593,p=0.004,;F=10.405,p=0.001).EPI30mg/kg组较EPI15mg/kg组E2水平下降更明显,两组间差异显著,有统计学意义(F=12.368,p=0.001)。给药后第12天HE染色切片,镜下见EPI处理组较Control组各级卵泡数目明显减少,组间差异显著,有统计学意义(F=381.360,F=50,258,F=204.646,F=54.837,p=0.000);EPI30mg/kg组较EPI15mg/kg组各级卵泡数目减少更明显,组间差异显著,有统计学(F=205.107,66.692,309.335,44.677,p<0.01)。结论EPI处理后大鼠体重下降、食欲下降,通过E2水平下降,负反馈引起FSH升高,导致大鼠的动情周期消失,大鼠卵巢各级卵泡数目减少,从而导致卵巢功能受损。应用EPI30mg/kg成功建立了EPI致卵巢早衰的动物模型,可以作为下一步研究基础。二、脱氢表雄酮对化疗损伤卵巢早衰的影响目的探讨DHEA对EPI导致的卵巢损伤的保护作用。方法以Wistar雌性大鼠为研究对象,把符合实验标准的32只大鼠随机分为4组,每组8只,分别Contrl组,EPI组,DHEA组,EPI+DHEA组。于是实验第一天分别给予不同处里：无处理,EPI30mg/kg尾静脉注射,DHEA5mg/kg灌胃,EPI30mg/kg尾静脉注射,DHEA5mg/kg灌胃+EPI30mg/kg尾静脉注射。实验第8天重复处理一次。用药后观察大鼠的一般情况,包括大鼠活动、进食、体重及动情周期,全部大鼠给药后12天处死,取其卵巢并行石蜡切片、HE染色,观察卵巢形态及各级卵泡数目的变化。结果Control组大鼠体重随时间推移而有所增长,皮毛光泽,四肢活动及饮食大小便无明显变化。EPI组大鼠体重在给药后成不同程度的下降。饮食较给药前下降,四肢无力,活动减少,体毛灰暗无光泽,大小便减少。DHEA组大鼠体重随时间推移而有所增长,皮毛光泽,四肢活动及饮食大小便无明显变化。EPI+DHEA组大鼠体重下降较缓慢,给药后第6天体重随时间推移而增长。EPI组与EPI+DHEA组比较第4、6、8、10、12天两组间差异显著,由统计学意义(P<0.01)。第4、6、8、10、12天各组间体重有显著差异(P<0.01)。给药后镜下可见EPI组、EPI+DHEA组卵泡总数、生长卵泡、成熟卵泡数均少于Control组,DHEA组卵泡总数、始基卵泡、成熟卵泡数多于Control组,EPI组与Control组间有显著差异(P＜0.01);EPI组与EPI+DHEA组间各卵泡数有显著差异(P均为0.000)。结论DHEA促进卵巢始基卵泡到各级卵泡生长过程,改善EPI导致卵巢储备功能。
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