学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

PCR-DGGE对新生儿坏死性小肠结肠炎肠道菌落结构其动态性研究

作　者: 郑树芳
导　师: 余加林
学　校: 重庆医科大学
专　业: 儿科学
关键词: 新生儿坏死性小肠结肠炎变形梯度凝胶电泳肠道细菌分子多态性
分类号: R722.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 103次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的新生儿坏死性小肠结肠炎（NEC, neonatal necrotizingenterocolitis）是新生儿特别是早产儿的急腹症，临床以腹胀、呕吐、便血、严重休克为表现，X线以肠壁囊样积气为特征。本病在国内的病死率高，尤其是早产儿,严重影响新生儿健康。NEC是多因素的疾病，细菌感染是其中一个不可缺少的致病因素。有研究表明，NEC未被发现在无菌的动物模型上,说明了无菌无NEC。有假说表明新生儿肠道异常细菌的定植是NEC发生的一个重要因素。但目前国内外对NEC肠道细菌感染的细菌成分和动态性变化并无清晰的了解。本实验采用PCR结合DGGE来观察NEC肠道微生态成分和动态变化，为NEC疾病的发病机制和临床防治提供细菌学理论基础。材料与方法从重庆市儿童医院新生儿病房2009年8月份-2009年12月份共收治32例，其中NEC组和对照组各16例。NEC组根据实用儿科学诊断标准收取，每例均有x片（+）及大便隐血（+）。根据国际Walsh andKliegman的BELL对于NEC疾病的分期标准,均为Ⅰ期(轻度)。对照组根据基础疾病以及临床特征：性别，胎龄，生产方式，喂养方式，出生体重，抗生素使用时间来尽量匹配。取其新鲜大便，提肠道细菌总DNA，用16s rDNA V3可变区引物进行聚合酶链反应（PCR，polymerase chain reaction）扩增，然后变性梯度凝胶电泳（DGGE，denaturing gradient gel electrophoresis），割胶回收细菌DNA测序，进行肠道细菌多样性分析包括丰富度（richness，S）和Shannon index（H′）指数，序列比对分析。结果变形梯度凝胶电泳结果显示：13/16（即81.25%）的NEC组跟对照组比较，肠道细菌菌落的Shannon指数相对较高(NEC组vs对照组,p<0.05)，分布不均，波动明显，细菌的多样性高于对照组，细菌菌落多样性特征存在一定的差异。NEC组的Shannon指数在发病初期明显增多,随着疾病的治疗与恢复，呈先降后升的趋势。DGGE胶回收测序显示新生儿肠道优势菌群以肺炎克雷伯杆菌属，大肠埃希氏菌属，肠球菌属为主，NEC组与对照组种类没有明显区别，存在数量上的差异。3/16（18.75%）趋势不明显，shannon index差异不大。结论实验表明，NEC患儿的肠道菌群失衡可能是NEC发病的肠道细菌感染的重要因素。

全文目录

英汉缩略语名词对照  5-6
摘要  6-8
ABSTRACT  8-11
前言  11-12
1 材料与方法  12-21
2 实验结果  21-27
3 讨论  27-31
4 小结  31-32
全文总结  32-34
参考文献  34-37
文献综述  37-41
  参考文献  40-41
致谢  41-43
攻读硕士学位期间的学术论文目录  43-44

PCR-DGGE对新生儿坏死性小肠结肠炎肠道菌落结构其动态性研究

内容摘要

全文目录

相似论文