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铁皮石斛多糖对高糖状态下Min6细胞胰岛素分泌及NF-κB-iNOS-NO信号通路影响的研究

作　者: 杨芳
导　师: 谭华清
学　校: 南华大学
专　业: 内科学
关键词: 铁皮石斛多糖 Min6细胞高糖胰岛素分泌 NF-κB iNOS NO
分类号: R587.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：观察铁皮石斛多糖(Polysaccharide of dendrobium candidum,PDC)对高糖环境下小鼠胰腺β细胞株Min6细胞胰岛素分泌、一氧化氮(Nitrogen monoxidum,NO)产生和NF-κB (核因子)表达的影响，探讨PDC降血糖和保护胰岛β细胞的可能机制。方法：在高糖(35.0mmol/L)环境下培养小鼠胰岛β细胞瘤株Min6细胞48小时诱导损伤，同时用PDC（100、200和400μg/mL）处理细胞48小时。实验分为对照组(25mmol/l)、甘露醇组、高糖组（35mmol/l）、不同剂量PDC（100、200和400μg/mL）组和高糖（35mmol/l）+不同剂量PDC（100、200和400μg/mL）组。（1）采用MTT法和流式细胞术分别检测各组细胞活力和细胞凋亡，并计算细胞凋亡率。（2）硝酸还原酶法检测各组细胞培养液中NO的含量。（3）放射免疫法检测各组细胞胰岛素的分泌。（4）应用Western blot检测各组细胞中iNOS及NF-κB蛋白水平的表达。结果：（1）与对照组相比，高糖组Min6细胞活力降低（P<0.05），细胞凋亡率增加（P<0.05），培养液中胰岛素水平明显下降（P<0.05），NO值较其他组上升（P<0.05），Min6细胞中NF-κB蛋白表达及iNOS蛋白表达均增加（均P<0.05）。（2）与对照组相比，PDC（100、200和400μg/mL）组，细胞活力和细胞凋亡率没有明显变化（均P>0.05），培养液中胰岛素水平及NO值未明显增加（均P>0.05），培养液中NF-κB蛋白表达和iNOS的蛋白表达也未明显增加（均P>0.05）。（3）与高糖组相比，高糖+PDC（100、200和400μg/mL）组Min6细胞活力增加（P<0.05），细胞凋亡率降低（P<0.05），培养液中胰岛素水平增加（P<0.05），培养液中NO的水平降低（P<0.05），细胞中NF-κB蛋白表达及iNOS蛋白表达降低（均P<0.05）。结论：1、铁皮石斛多糖能促进胰岛β细胞胰岛素分泌，提高胰岛β细胞活性，减少胰岛β细胞的凋亡。2、铁皮石斛多糖能明显抑制高糖刺激下胰岛β细胞NF-κB及iNOS的蛋白表达和NO分泌增加。3、铁皮石斛多糖保护胰岛β细胞可能与NF-κB-iNOS-NO通路有关。

铁皮石斛多糖对高糖状态下Min6细胞胰岛素分泌及NF-κB-iNOS-NO信号通路影响的研究

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