学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

小檗碱对癫痫大鼠脑P-糖蛋白表达的影响及机制探讨

作　者: 刘新红
导　师: 狄晴
学　校: 南京医科大学
专　业: 神经病学
关键词: 癫痫小檗碱 P-糖蛋白核转录因子-kappa B 炎症反应
分类号: R742.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 33次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

背景：脑内P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)过表达是耐药性癫痫(Drug-ResistantEpilepsy, DRE)发生的主要原因，抑制P-gp过表达有望成为治疗DRE新途径。既往研究表明脑内炎症反应与DRE形成密切相关，我们前期研究也发现：DRE脑内P-gp过表达与炎症反应的中心环节核转录因子-kappa B(nuclearfactor-kappa B, NF-κB)活化有关，抑制NF-κB活性可显著降低癫痫鼠脑内P-gp表达。小檗碱（Berberine, BBR）是临床常用的天然抑菌抗炎药物，在非癫痫研究领域证实BBR可抑制NF-κB炎症通路活化，治疗感染、肿瘤、卒中等多种疾病。而BBR能否抑制脑部炎症反应从而发挥抗癫痫效应？能否通过抑制NF-κB炎性通路降低癫痫脑内P-gp过表达？从而达到治疗DRE的目的，目前尚未见报道。目的：探讨BBR能否通过抑制NF-κB炎性通路降低癫痫脑内P-gp过表达；同时观察其对癫痫发作、脑组织损伤程度和小胶质细胞活化的影响。方法：将雄性SD大鼠随机分为假手术组（NS组，n=8）、癫痫组（EP组，n=9）、BBR10mg/kg （BBR10组，n=9）、BBR20mg/kg（BBR20组，n=9）、BBR40mg/kg (BBR40，n=9)癫痫干预组。采用大鼠海马注射海人酸方法制作癫痫模型，BBR干预组分别于术前48h、术前24h和术后6h腹腔注射相应剂量BBR。观察各组大鼠癫痫发作的潜伏期（大鼠注射海人酸后至初次Ⅳ级痫样发作的时间）及发作严重程度（初次至第6次≥Ⅳ级发作的时间）。各组大鼠于造模24h后处死，采用免疫组织化学方法，检测并比较各组大鼠海马CA3区P-gp和NF-κB的代表性亚基p65表达情况，及CD11b和脑损伤等病理改变情况。结果：（1）BBR10组发作潜伏期和严重程度与EP组比较，差异无统计学意义；BBR20组和BBR40组发作潜伏期[(66.11±5.90)min、(76.33±9.11)min]均长于EP组[(41.78±10.45)min]，差异均有统计学意义（P<0.05）。BBR20组和BBR40组初次至第6次≥Ⅳ级发作的时间[(26.67±6.67)min、(42.00±7.73)min]均长于EP组[(9.44±4.25)min]，差异均有统计学意义（P<0.05）。（2）与Sham组相比，EP组鼠海马CA3区P-gp和NF-κBp65表达显著增强，BBR20和BBR40组鼠CA3区P-gp和NF-κBp65表达低于EP组，差异均有统计学意义（P<0.05）；而BBR10组相应表达与EP组比较，差异无统计学意义。各组P-gp和NF-κBp65表达具有正等级相关性（P<0.05）。（3）与EP组相比，BBR10、BBR20和BBR40组大鼠脑残存神经元计数有增多趋势，差异有统计学意义(P<0.05)；（4）与Sham组相比，EP组大鼠海马CA3区CD11b表达显著增强；与EP组相比BBR40组CD11b表达显著减少，差异有统计学意义（P<0.05)。结论：（1）BBR预处理组大鼠致痫易感性与发作严重程度降低；神经元丢失量明显减少；CD11b表达显著减少；BBR具有抗癫痫效应、脑保护作用及能抑制小胶质细胞激活；（2）BBR显著抑制KA致痫大鼠脑NF-κB表达及活化，降低P-gp表达。

全文目录

目录  4-6
中文摘要  6-8
Abstract  8-11
前言  11-14
  1.1 耐药性癫痫和 P-gp  11-12
  1.2 NF-κB 与 P-gp  12
  1.3 小檗碱与 NF-κB  12-14
材料与方法  14-20
  2.1 材料  14-15
    2.1.1 动物与分组  14
    2.1.2 主要实验试剂  14-15
    2.1.3 主要仪器与设备  15
  2.2 方法  15-20
    2.2.1 动物模型制作  15-16
    2.2.2 癫痫发作观察  16
    2.2.3 组织准备及 HE 染色  16-17
    2.2.4 免疫组织染色检测  17-18
    2.2.5 染色计数  18-19
    2.2.6 统计学方法  19-20
结果  20-27
  3.1 癫痫发作情况  20
  3.2 神经元染色  20-21
  3.3 NF-κB 表达及其活性检测  21-24
    3.3.1 各组大鼠脑 NF-κB 表达情况  21-23
    3.3.2 各组大鼠脑 NF-κB 活性检测  23-24
  3.4 各组大鼠脑 P-gp 表达比较  24-25
  3.5 各组大鼠 CD11b 表达情况  25-26
  3.6 相关性分析  26-27
讨论  27-31
  4.1 抑制 P-gp 是治疗 DER 的关键  27-28
  4.2 炎症反应是 DRE 发生的重要因素：NF-κB 信号通路的重要作用  28-29
  4.3 小胶质细胞在 DRE 中的作用  29-31
结论  31-32
参考文献  32-37
综述  37-46
  参考文献  42-46
攻读学位期间发表文章情况  46-47
致谢  47

小檗碱对癫痫大鼠脑P-糖蛋白表达的影响及机制探讨

内容摘要

全文目录

相似论文