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基于血小板活化研究去脂软肝方防治大鼠早期脂肪肝的作用机制
作 者: 施钦柔
导 师: 陈文慧
学 校: 云南中医学院
专 业: 中西医结合基础
关键词: 去脂软肝方 血小板活化 脂肪肝 作用机制
分类号: R285.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
下 载: 21次
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内容摘要
目的:探讨实验性大鼠早期非酒精性脂肪肝与血小板活化的关系;探讨去脂软肝方抗血小板活化的作用及其对非酒精性脂肪肝疾病发生发展的影响,以探明去脂软肝方在非酒精性脂肪肝发病中的防治作用机制。方法:1、模型制备:SD雄性大鼠78只,随机分成3组,正常组24只大鼠以普通饲料喂养,模型组27只和用药组27只大鼠以高脂饲料(普通饲料基础上加10%猪油,2%胆固醇。送与加工厂生产加工)喂养。实验动物自由饮水,分笼饲养于云南中医学院动物房,各实验组分别于实验4周末、8周末、12周末分批次剖杀取材,进行动态指标观察。2、分组给药:自造模之日起,正常组和模型组大鼠予生理盐水灌胃1ml·200g-1,每日1次,去脂软肝方用药组按临床等效量换算,予去脂软肝方汤药灌胃1ml·200g-1,每日1次。3、指标检测:造模4周末、8周末、12周末,分别取大鼠血样及肝组织标本,测定大鼠体重、肝脏湿重、计算肝体重比指数。苏木精-伊红(HE)染色观察肝脏脂肪变性情况。测定大鼠血清肝功能[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)]、血脂[总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)]、肝脂、血小板聚集率及血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素Fla(6-Keto-PGFla)、P-选择素(CD62p)。结果:1、一般情况:与正常组比较,模型组大鼠体重增长较明显,4周末模型组部分大鼠复出现食欲下降,行动活跃性下降,大便粘软偶有稀溏,色淡黄等现象。8周末模型组大鼠体重高于正常组和用药组(P<0.05),12周末模型组大鼠体重继续高于正常组和用药组,且高于4周末模型组和8周末模型组大鼠的体重(P<0.05)。8周末模型组大鼠肝湿重高于正常组和用药组(P<0.05),且高于4周末模型组大鼠肝湿重(P<0.05),12周末模型组大鼠的肝湿重升高更为明显。2、形态学改变:与正常组比较,8周末模型组大鼠肝脏病理学HE染色光镜下可见超过1/3的肝细胞胞浆中出现大小不一的圆形脂滴空泡。12周末模型组切片可见超过2/3的肝细胞胞浆中出现大小不一的圆形脂滴空泡,部分标本可见肝细胞肿大,胞浆疏松呈网状、胞浆疏松化,严重者胞浆几乎完全气球样变。3、生化指标:与正常组含量相比,4周末,模型组大鼠血清TG升高,(P<0.05);12周末,模型组与正常组和用药组相比,血清TG升高,且高于8周末模型组(P<0.05)。8周末模型组大鼠血清TC含量高于正常组和用药组(P<0.05),12周末模型组含量高于正常组和用药组(P<0.05)。大鼠肝脂含量,12周末模型组大鼠肝脏TG含量较正常组和用药组高(P<0.05);8周末模型组大鼠肝脏TC含量较正常组和用药组高(P<0.05),12周末模型组较正常组和用药组高(P<0.05)。大鼠血清转氨酶,4周末模型组大鼠血清AST高于正常组和用药组(P<0.05)。8周末模型组大鼠血清ALT高于正常组和用药组(P<0.05),且高于4周末大鼠血清ALT含量(P<0.05);12周末模型组大鼠血清ALT高于正常组和用药组(P<0.05),且高于4周末和8周末大鼠血清ALT含量(P<0.05)。大鼠血小板聚集率4周末模型组高于正常组和用药组(P<0.05);8周末模型组高于正常组和用药组(P<0.05),且高于4周末模型组大鼠血小板聚集率(P<0.05);12周末模型组高于正常组和用药组(P<0.05),且高于4周末和8周末模型组大鼠血小板聚集率(P<0.05)。大鼠血清血栓素B2含量4周末模型组较正常组和用药组高(P<0.05);8周末大鼠血清血栓素B2模型组较正常组和用药组模型组高(P<0.05),且高于4周末模型组大鼠血清血栓素B2含量;12周末大鼠血清血栓素B2模型组较正常组高(P<0.05),且高于4周末模型组和8周末现在组大鼠血清血栓素B2含量。大鼠血清6-Keto-PGF1a含量4周末模型组较正常组和用药组低(P<0.05);812周末模型组较正常组和用药组低(P<0.05),且低于8周末模型组和4周末模型组(P<0.05)。12周末用药组高于8周末和4周末用药组(P<0.05)。大鼠血清CD62p含量8周末模型组较正常组和用药组高(P<0.05);12周末模型组较正常组和用药组高(P<0.05),且高于8周末和4周末模型组(P<0.05)。12周末用药组低于8周末用药组含量(P<0.05)。结论:1、实验性高脂饲料诱导的大鼠早期脂肪肝模型病理形态改变在8周末形成,表现为8周末,模型组大鼠肝脏HE染色,可见超过1/3的肝细胞胞浆中出现大小不一的圆形脂滴空泡,有的空泡融合将细胞核挤向胞膜下。12周末肝脏脂肪变更明显。2、实验性高脂饲料诱导的大鼠早期脂肪肝模型生化指标在4周末成升高趋势。表现为4周末,模型组大鼠血清转氨酶升高,肝功能损伤,血脂升高,肝脂升高。8周末、12周末更为明显。综合结论1表明本实验造模成功。3、实验性高脂饲料诱导的大鼠早期脂肪肝模型存在血小板活化。表现为4周末,模型组大鼠血小板聚集率升高、血栓素B2升高、6-Keto-PGFla降低、以及CD62p升高。8周末、12周末更为明显。表明高脂饲料诱导的大鼠早期脂肪肝的发生发展和血小板活化存在一定的联系。4、实验使用的中药汤剂去脂软肝方可显著改善高脂饲料诱导的模型大鼠早期脂肪肝的发生发展,对于降低血清和肝脏总胆固醇、甘油三酯效果明显,可逆转肝功能损伤以及抑制血小板活化,从而防治实验性高脂饲料诱导的大鼠早期脂肪肝模型的肝脏脂肪变。
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全文目录
中文摘要 6-9 Abstract 9-15 英文对照表 15-17 引言 17-19 第一部分 文献综述 19-30 第二部分 实验研究 30-70 1、实验材料及仪器 30-32 1.1 实验动物 30 1.2 实验药物 30 1.3 实验仪器 30 1.4 实验试剂 30-32 2.技术路线 32-33 3、实验方法 33-45 3.1 药物制备方法 33 3.2 动物分组 33 3.3 造模方法 33 3.4 分组给药 33 3.5 标本留取 33-34 3.6 实验指标检测内容及方法 34-44 3.7 统计学处理 44 3.8 检测指标选择依据及意义 44-45 3.8.1 血清肝功能及血脂、肝脂检测指标的选择依据及意义 44 3.8.2 血小板聚集率检测指标的选择依据及意义 44-45 3.8.3 动态检测血小板代谢产物 TXB2与 PGF1α测定 45 3.8.4 动态检测可溶性 P-选择素(CD62p) 45 4、实验结果 45-70 4.1 一般情况观察 45 4.2 肝组织肉眼观察 45-46 4.3 去脂软肝方对高脂饲料致脂肪肝模型大鼠体重、肝重及肝体比变化的影响 46-50 4.4 去脂软肝方对高脂饲料致脂肪肝模型大鼠肝功能酶学变化的影响(U/L) 50-54 4.5 去脂软肝方对高脂饲料致脂肪肝模型大鼠血脂(TC、TG)变化的影响 54-56 4.6 去脂软肝方对高脂饲料致脂肪肝模型大鼠肝脂(TC、TG)变化的影响 56-59 4.7 去脂软肝方对高脂饲料致脂肪肝模型大鼠血小板聚集率变化的影响 59-61 4.8 去脂软肝方对高脂饲料致脂肪肝模型大鼠血栓素 B2、6-Keto-PGFlα、T/P 值变化的影响 61-66 4.9 去脂软肝方对高脂饲料致脂肪肝模型大鼠 P-选择素变化的影响 66-67 4.10 去脂软肝方对高脂饲料致脂肪肝模型大鼠肝组织形态的影响 67-70 第三部分 讨论 70-76 1.中医血瘀证与脂肪肝之间的相关性 70 2. 去脂软肝方组方分析 70-71 3. 大鼠高脂肪肝动物模型的建立 71-73 4、去脂软肝方对实验大鼠脂肪肝模型体重、肝湿重及肝体比及血脂、肝脂、肝功能、组织形态变化的影响作用 73-74 5. 去脂软肝方对脂肪肝模型大鼠血小板活化的影响作用 74-76 第四部分 结论 76-77 参考文献 77-83 发表文章 83-84 参与科研项目 84-85 附录 85-86 致谢 86
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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