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寿尔智胶囊对阿尔茨海默病模型大鼠海马组织BDNF、TrKB基因及蛋白表达影响的研究

作　者: 周玉涛
导　师: 董梦久
学　校: 湖北中医药大学
专　业: 中医内科学
关键词: 寿尔智胶囊阿尔茨海默病 A β25-35 学习记忆海马
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

目的观察AD模型大鼠行为学,海马组织形态学及BDNF、TrKB基因和蛋白表达的变化。探讨海马神经元损伤与AD的关系,以及寿尔智胶囊对上述变化的保护机制。方法随机将40只健康雄性SD大鼠分成假手术组、模型组、寿尔智组、安理申组,每组10只；采用小动物脑立体定位仪,经大鼠海马体表投影位置向海马CAl区注射聚集态Aβ25-35构建AD模型大鼠；造模3天后,寿尔智组给予寿尔智胶囊灌胃,安理申组给予安理申灌胃,模型组与假手术组给予等体积生理盐水灌胃；治疗四周后,运用Morris水迷宫测试大鼠的学习和记忆能力；结束后,用HE染色观察大鼠海马CA1区组织形态学；免疫组化染色测定大鼠海马CA1区BDNF及其受体TrkB的表达；Real-time Quantitative PCR法测定大鼠海马组织BDNF mRNA、TrKB mRNA的表达,并观察寿尔智胶囊对上述指标的影响。结果1.学习记忆能力测试：定位航行试验中,各组大鼠5天的平均逃避潜伏期都有所下降,假手术组、寿尔智组和安理申组三组大鼠都较模型组明显缩短(P<0.05或P<0.01)；寿尔智组、安理申组与假手术组三组之间比较差异均不显著(P>0.05)。空间探索试验中,以各组大鼠在原平台象限活动时间和穿越原平台次数为指标,假手术组、寿尔智组和安理申组三组大鼠都较模型组明显增加(P<0.05或P<0.01)；寿尔智组、安理申组与假手术组三组之间比较差异均不显著(P>0.05)。2.大鼠海马组织HE染色：模型组大鼠海马CA1区细胞结构紊乱,数目明显减少,排列不整齐；寿尔智组、安理申组和假手术组三组大鼠海马CA1区细胞结构完整,排列整齐,但前两者较后者在海马CA1区细胞结构、数目、排列上都稍差。3.大鼠海马组织石蜡切片免疫组化染色：以各组大鼠海马CA1区BDNF、TrKB阳性细胞平均光密度为观察指标,假手术组、寿尔智组和安理申组三组大鼠都较模型组明显增加,胞浆染色较深,差异有显著性(P<0.01)；寿尔智组和安理申组与假手术组大鼠比较明显减少,胞浆染色稍淡,差异有显著性(P<0.01)；寿尔智组与安理申组比较差别不显著(P>0.05)。4.大鼠海马组织BDNF、TrKB基因的测定：各组大鼠海马组织BDNF mRNA、TrKB mRNA的表达,假手术组、寿尔智组和安理申组三组都较模型组明显增加(P<0.05)；寿尔智组和安理申组仍低于假手术组(P<0.05)；寿尔智组较安理申组差别不明显(P>0.05)。结论1.大鼠双侧海马注射Aβ25-35构建的AD模型稳定可靠,重复性好。2.AD模型大鼠学习和记忆功能障碍的形态学基础可能是海马神经元等结构的损伤和丢失。3.寿尔智胶囊有补肾填精,活血祛瘀,化痰开窍之功效,其对AD模型大鼠学习记忆能力的改善作用可能与其在一定程度上抑制Aβ25-35在大鼠脑内的沉积,减轻对海马神经元的毒性损伤有关。4.AD模型大鼠海马神经元损伤及学习记忆能力障碍的机制可能与BDNF、TrKB基因和蛋白表达的下调有关。5.寿尔智胶囊对AD模型大鼠海马神经元保护及学习记忆能力改善的机制可能与上调BDNF、TrKB基因和蛋白的表达有关。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-10
本文常用缩略词简表  10-11
前言  11-16
  参考文献  14-16
第一部分 AD模型大鼠的构建及寿尔智胶囊对其学习记忆能力和海马组织形态学的影响  16-32
  1.1 实验材料及设备  16-17
  1.2 试验方法  17-20
  1.3 统计处理  20
  1.4 结果  20-23
  1.5 讨论  23-28
  1.6 结论  28-29
  参考文献  29-32
第二部分寿尔智胶囊对AD模型大鼠海马组织BDNF、TrKB基因及蛋白表达的影响  32-46
  2.1 实验材料及设备  32-33
  2.2 试验方法  33-37
  2.3 统计处理  37
  2.4 结果  37-41
  2.5 讨论  41-43
  2.6 结论  43-44
  参考文献  44-46
结语  46-47
附录  47-58
参考文献  58-63
致谢  63

寿尔智胶囊对阿尔茨海默病模型大鼠海马组织BDNF、TrKB基因及蛋白表达影响的研究

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