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补肾活血法与益气补血法对骨髓抑制小鼠造血功能调控作用的比较

作 者: 王茜
导 师: 窦永起
学 校:
专 业: 中西医结合临床
关键词: 补肾活血法 益气补血法 骨髓抑制 造血调控 实验研究
分类号: R273
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


目的:研究补肾活血法益气补血法对化疗后骨髓抑制造血功能的影响,比较两种治法在对造血干/祖细胞及造血微环境等方面的作用机制,为临床科学合理组方,提高中医药防治效果提供依据。方法:SPF级ICR小鼠130只,随机分为空白对照组、模型组、益气补血组、补肾活血组及中药联合组,三中药组均给予相应汤药灌胃,模型组和空白对照组给予等体积蒸馏水,每日灌胃1次至实验结束。除空白对照组外,其余各组均于灌胃第8d腹腔注射环磷酰胺(100mg/kg/d),连续3天造模。在造模前1天及造模完成后的第1、3、7d,各组随机抽取10只进行外周血分类计数,剩余16只分别于造模后第3d和第7天各取8只,处死后检测脏器指数、脾脏及骨髓病理、及血清白细胞介素6(Interleukin6,IL-6),并制备骨髓单核细胞悬液,测定骨髓有核细胞(Bone marrow nucleated cell,BMNC)和CD34+细胞数量、细胞周期及其细胞周期蛋白D1,进行骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cell,BMSC)培养。结果:1.外周血像结果显示,补肾活血方和益气补血方均可减轻环磷酰胺所致外周血白细胞、血小板、红细胞和血红蛋白含量减少的程度,促进其回升,两方合用效果更好。2.造模后模型组骨髓有核细胞明显减少,骨髓CD+34细胞比例先升后降,补肾活血方和益气补血方均可以增加BMNC和CD+34细胞,三中药组相比,补肾活血组对于提升BMNC作用最佳,而对于骨髓CD+34细胞,模后第3天益气补血组更优,中药联合组次之,而模后第7天中药联合组最佳。3.造模后模型组骨髓细胞G0期细胞先减少后增加,增殖指数的先增加后抑制, cyclinD1蛋白表达减少,而补肾活血方可以明显增加S期细胞,促进G1期细胞向S期转化,并可促进cyclinD1蛋白的表达,从而稳定的恢复外周血像。4.造模后模型组骨髓基质细胞黏附能力下降,增殖能力降低,补肾活血方和益气补血方均可促进骨髓基质细胞的黏附和增殖,改善血窦充血及骨髓瘀滞,保护骨髓造血微环境。5.造模后模型组血清IL-6水平明显升高,补肾活血组方和益气补血方均可降低IL-6水平,加快造血功能的恢复,两方合用效果更佳。6.补肾活血方和益气补血方均可升高脾脏指数,保护脾脏,促进脾小体及淋巴细胞恢复。结论:1.补肾活血方和益气补血方均可以减轻环磷酰胺引起的骨髓造血细胞的减少,对造血功能恢复具有促进作用,两方合用可协同增效。2.补肾活血方和益气补血方均可提高造血干祖细胞数目,以益气补血方的作用为强,两方合用可以使这种作用得到稳定发挥。3.补肾活血方和益气补血方均可以促进cyclinD1蛋白的表达,促进细胞从G1期进入S期,提高骨髓细胞增殖指数,补肾活血方单用最优。4.补肾活血方和益气补血方均可减轻化疗所致的造血微环境损害,促进造血微循环修复,似以补肾活血组为优;调解造血细胞因子水平,加快造血功能的恢复,两方合用效果更佳。5.补肾活血方和益气补血方促进造血功能的修复机制可能与通过保护脾脏造血及免疫功能有关。

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