学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示
1-溴丙烷中毒性周围神经病大鼠神经组织氧化修饰蛋白的含量变化
作 者: 王清华
导 师: 赵秀兰
学 校: 山东大学
专 业: 劳动卫生与环境卫生学
关键词: 1-溴丙烷 周围神经病 神经行为学 4-HNE蛋白质加合物 MDA蛋白质加合物 丙烯醛蛋白质加合物
分类号: R114
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 10次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
内容摘要
研究目的为保护大气臭氧层,具有氟利昂类易挥发、不易燃等特点的1-BP(1-bromopropane,1-BP)逐渐成为氟利昂类的替代品,因其在大气中半衰期短,不会对臭氧层造成破坏,是全球目前广泛应用的有机溶剂和清洗剂。常用作脂肪、石蜡、树脂等的溶剂,制造药品、杀虫剂、香精、调味料等的中间体,精密电子仪器的清洗剂,脱垢剂以及喷雾粘合剂中的溶剂等。长期无防护接触1-BP可导致1-BP中毒性神经病。随着《蒙特利尔议定书》的执行,国内外对1-BP需求量大幅上升,1-BP的职业接触人群和使用人群也逐年增加。1-BP急性毒性较低,加上目前无1-BP的职业接触限值(occupational exposure limits, OEL),1-BP潜在的职业危害较大。1-BP致周围神经毒性的机制尚不清楚。实验研究显示1-BP染毒后导致动物肝脏、大脑等器官中还原性谷胱甘肽(Glutathione, GSH)耗竭、氧化应激。我们先前的研究也显示1-BP引起氧化应激,脂质过氧化产物对大脑中蛋白质的氧化修饰与1-BP对认知功能的损伤相关。尤其是近年来一系列的研究提示人类-些神经退行性病变的发生与氧化应激相关。因此,我们采用1-BP经口慢性染毒,建立1-澳丙烷周围神经病的动物模型,通过观察周围神经行为学指标的变化,判定1-BP对周围神经的损伤;采用相对特异、敏感的抗体检测了1-BP染毒大鼠神经组织中脂质过氧化终产物4-羟基-2-壬烯醛(4-hydroxiynonenal,4-HNE)蛋白质加合物、丙二醛(malondialdehyde, MDA)蛋白质加合物、4-羟基-2-己烯醛(4-hydroxy-2-hexenal,4-HHE)蛋白质加合物和丙烯醛(arcolein)蛋白质加合物的含量变化,观察1-BP神经组织蛋白的氧化修饰情况;并通过体外实验观察了1-BP对4-HNE蛋白加合物形成的影响及剂量-效应关系,以期为解释周围神经的损伤机制提供线索。研究方法1、40只雄性Wistar大鼠,随机分为低、中、高剂量组和对照组,每组10只;将1-BP溶于玉米油中,分别经口给予200、400、800mg/kg的1-BP,对照组给予等体积玉米油,灌胃体积均为0.2mL/100g.bw,每日1次,每周5天,连续16周,建立1-溴丙烷经口慢性染毒致周围神经病模型,并定期检测步态、后肢抓力、后肢撑力、鼠尾痛觉等神经行为学指标,观察1-BP对周围神经系统的损伤。2、断头处死大鼠,迅速分离大脑、脊髓和坐骨神经组织,制备组织匀浆,15000g、4℃离心30min。利用Western blotting方法测定大鼠大脑、脊髓、坐骨神经组织中的4-HNE、MDA、4-HHE、arcolein蛋白加合物相对含量的变化,观察脂质过氧化产物对大鼠神经组织蛋白的氧化修饰水平。3、1-BP对神经组织4-HNE氧化修饰蛋白影响的体外实验,将4-HNE、1-BP与空白组大鼠的大脑、脊髓、坐骨神经组织蛋白共同孵育,观察1-BP对4-HNE蛋白加合物形成的影响及剂量-效应关系。结果1、1-BP对大鼠周围神经行为学指标检测结果高剂量组染毒8-16周、中剂量组染毒14、15、16周和低剂量组染毒15、16周大鼠的步态评分均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与对照组比较,高剂量组染毒9、12、14周大鼠后肢抓力明显下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);染毒16周时,动物后肢瘫痪。染毒16周时,中、低剂量组大鼠后肢抓力分别为对照组的72.56%和91.22%,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。染毒12、14、16周时,高剂量组大鼠后肢撑力指数明显高于对照组;染毒14、16周时,中剂量组大鼠后肢撑力指数明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。染毒8周高、中剂量组和染毒16周高、中、低剂量组血清中丙氨酸转氨酶(ALT)活力均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。2、1-BP染毒对大脑、脊髓、神经组织中4-HNE、MDA、4-HHE、arcolein蛋白加合物水平的影响1-BP染毒对4-HNE蛋白加合物表达水平的影响:与对照组相比,在大脑组织中,高剂量组大鼠4-HNE蛋白加合物增加了27.57%(P<0.01),低、中剂量组分别增加了11.82%和20.94%,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。脊髓组织中,低、中、高剂量组分别为对照组的5.37%、16.82%、17.82%,与对照组相比均无显著性差异。坐骨神经组织中,低剂量组仅比对照组增加了17.83%,十、高剂量组确分别升高了64.64%(P<0.01)、117.59%(P<0.01)。1-BP染毒对MDA蛋白加合物表达水平的影响:与对照组相比,在大脑组织中,高剂量组增加了179.38%(P<0.01),低、中剂量分别增加了24.08%和30.14%,与对照组比较差异无统计学意义。脊髓组织中,低、中、高剂量组分别为对照组的4.02%、33.48%、53.34%,与对照组相比增加不显著。坐骨神经组织中,低剂量组与对照组相差无几,而中、高剂量组MDA蛋白加合物表达水平明显升高,分别升高了46.03%(P<0.01)、70.13%(P<0.01)。1-BP染毒对4-HHE蛋白质加合物的水平的影响:与对照组相比,在大脑组织中,低剂量组与照组比较略有下降,但并无统计学差异;中剂量组与对照组相比增加不明显;而高剂量组增加了16.40%(P<0.01)。脊髓组织中,低、中、高剂量组分别为对照组的54.78%、44.21%、45.52%,但无显著差异。坐骨神经组织中,低剂量组仅比对照组升高37.26%,中、高剂量组4-HHE蛋白质加合物明显升高,分别升高了67.58%(P<0.01)、59.34%(P<0.01)1-BP染毒对Arcolein蛋白质加合物水平的影响:与对照组相比,在大脑组织中,低、中、高剂量组分别增加了7.97%(P<0.05)、22.09%(P<0.01)、29.99%(P<0.01)。脊髓组织中,低、中、高剂量组分别为对照组的46.25%(P<0.01)57.17%(P<0.01)、77.28%(P<0.01)。但坐骨神经组织中,低、中、高剂量组分别降低38.65%(P<0.01)、35.07%(P<0.01)、49.05%(P<0.01)3、1-BP对4-HNE氧化修饰神经组织蛋白影响的体外实验在体外实验体系中,正常大鼠的大脑、脊髓、坐骨神经组织中,几乎检测不到4-HNE蛋白质加合物,将50uM的1-BP与正常大鼠的大脑、脊髓、坐骨神经组织共同孵育后,实验显示反应体系中有少量的4-HNE蛋白加合物形成。将神经组织中加入4-HNE共同孵育,反应体系中可检测到大脑、脊髓和坐骨神经蛋白均能被4-HNE氧化修成形成4-HNE蛋白质加合物。将不同浓度的1-BP与神经组织和4-HNE共同孵育,结果显示1-BP能够增强4-HNE对神经组织蛋白的修饰作用,与单纯加入4-HNE相比,4-HNE+25uM1-BP、4-HNE+50uM1-BP、4-HNE+100uM1-BP反应体系中,大脑组织中,4-HNE蛋白质加合物分别增加了18.87%、51.01%(P<0.01)、58.08%(P<0.01)。脊髓组织中,4-HNE+25uM1-BP组、4-HNE+50uM1-BP组、4-HNE+100uM1-BP组增加了83.25%(P<0.01)、116.11%(P<0.01)、211.73%(P<0.01)。在坐骨神经组织中4-HNE+25uM1-BP组、4-HNE+50uM1-BP组、4-HNE+100uM1-BP组中分别增加了35.32%、72.21%(P<0.01)、128.76%(P<0.01)。结论1、神经系统是1-BP毒作用的敏感靶器官,1-BP暴露可导致大鼠中毒性周围神经病。2、1-BP染毒导致神经组织中脂质过氧化修饰蛋白表达增加,3、1-BP能够增强4-HNE对大鼠神经组织蛋白质的氧化修饰,并呈剂量-效应关系。
|
全文目录
摘要 6-10 ABSTRACT 10-15 符号说明 15-18 前言 18-25 材料与方法 25-35 结果 35-52 讨论 52-61 结论 61-62 References 62-71 攻读学位期间发表的论文目录 71-72 致谢 72-73 学位论文评阅及答辩情况表 73
|
相似论文
- 脂肪干细胞侧脑室定向移植治疗大鼠脑出血,R743.3
- UCMSCs经枕大池移植治疗发育鼠HIE后遗症实验研究,R722.1
- 温针灸法治疗糖尿病周围神经病的临床观察,R246
- 硫酸镁在蛛网膜下腔出血后作用的初步探讨,R743.35
- 电针不同穴组对MCAO大鼠血浆和脑组织ET、CGRP影响的比较研究,R245
- 高压氧治疗对大鼠重型脑损伤后Nestin表达影响的研究,R651.15
- 大鼠颈交感神经激惹模型制作及其评价的实验研究,R681.55
- 梓葛配伍对大鼠脑水肿治疗作用的实验研究,R285.5
- 焦炉工人神经行为损伤及与Hsp70表达和基因多态性关系研究,R131
- 新生大鼠痉挛型脑瘫动物模型构建及评价的实验研究,R742.3
- 氟比洛芬酯预处理在大鼠局灶性脑缺血—再灌注损伤中的作用及机制,R96
- 亚慢性砷暴露对小鼠大脑和小脑单胺类神经递质含量的影响,R114
- ETS、Nic及STO暴露引发小鼠成瘾性及毒性的实验研究,R749.6
- 溴丙烷男(雄)性生殖毒性及凋亡机制的研究,R114
- 早期电针治疗对脑缺血大鼠神经行为学及脑组织半暗带区Caspase3表达影响的实验研究,R245
- 新生乳鼠脑缺血缺氧模型制作及评价的实验研究,R-332
- 丁香酚、甲苯的嗅觉印迹对神经发育影响及其机制研究,Q42
- 颈部挥鞭伤模拟实验研究,R653
- TGF-β1诱导大鼠脑积水的脑损伤特征及脑康灵治疗作用研究,R285.5
- 甲苯对小鼠神经毒性的行为学与形态学研究,R114
- 三七三醇皂苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠的保护作用,R285
中图分类: > 医药、卫生 > 预防医学、卫生学 > 卫生基础科学 > 卫生毒理
© 2012 www.xueweilunwen.com
|