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肾上腺素对体外培养染铝大鼠脾淋巴细胞免疫功能的影响

作　者: 张继红
导　师: 李艳飞
学　校: 东北农业大学
专　业: 临床兽医学
关键词: 铝大鼠脾淋巴细胞肾上腺素免疫功能
分类号: S852.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

为探讨肾上腺素（E）对体外培养染铝大鼠脾脏淋巴细胞作用及机制，以体外培养的Wistar大鼠脾脏淋巴细胞为研究对象，在各培养体系中加入终浓度为0.6059mmol/L三氯化铝（AlCl₃·6H₂O）（染铝组，CG），0.6059mmol/L AlCl₃·6H₂O+1×10-7mol/L E（低剂量组，LG），0.6059mmol/L AlCl-63·6H₂O+1×10mol/L E（中剂量组， LG），0.6059mmol/LAlCl₃·6H₂O+1×10-mol/L E（高剂量组，LG），对照组（BG）只添加相同体积的RPMI-1640培养液。应用CCK-8法，流式细胞术，放射免疫法，ELISA，RT-PCR等检测E对染铝大鼠脾脏淋巴细胞增殖、T淋巴细胞亚群、细胞培养液中IL-2和TNF-α、IgG、淋巴细胞膜上β2-AR密度、β2-AR mRNA表达水平和淋巴细胞内cAMP含量的影响。实验结果表明：1．肾上腺素组T淋巴细胞增殖率均低于CG（P＜0.05，P＜0.01），而B淋巴细胞的增殖率高于CG，其中MG和HG与CG差异显著（P＜0.05，P＜0.01）。CG的T、B淋巴细胞增殖率低于BG（P＜0.01）。说明E可使染铝对大鼠脾脏T淋巴细胞增殖率降低，B淋巴细胞增殖率上升。2．肾上腺素组CD3+、CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞阳性表达率和CD4⁺/CD8⁺比值均低于CG，呈剂量-效应关系，其中MG、HG的CD3+，LG、MG、HG的CD4⁺，HG的CD8⁺T淋巴细胞阳性表达率和CD4⁺/CD8⁺比值低于CG（P＜0.01，P＜0.05）。与BG相比，CG的CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞阳性表达率均降低（P＜0.01，P＜0.05）。表明E能能加重铝抑制T淋巴细胞的免疫功能。3．肾上腺素组T淋巴细胞分泌的IL-2和TNF-α含量均低于CG，呈剂量-效应关系，其中MG、HG与CG相比差异显著（P＜0.05，P＜0.01）。CG与BG相比显著降低（P＜0.01）。表明E可抑制染铝T淋巴细胞分泌细胞因子。4．肾上腺素组淋巴细胞培养液中IgG含量与CG组相比升高，存在剂量-效应关系，其中MG和HG高于CG（P＜0.01，P＜0.05）。CG与BG相比差异显著（P＜0.05）。说明E能扰乱染铝淋巴细胞分泌免疫球蛋白。5．随肾上腺素剂量的增加，淋巴细胞膜上的β2-AR密度、β2-AR mRNA表达水平以及细胞内cAMP的含量均升高，呈剂量-效应关系，MG、HG高于CG（P＜0.01，P＜0.05），而CG高于BG（P＜0.01）。说明E通过β2-AR-cAMP途径发挥免疫抑制作用。

全文目录

摘要  8-9
Abstract  9-11
1 前言  11-16
  1.1 铝的免疫毒性  11-13
    1.1.1 铝对免疫器官的影响  11
    1.1.2 铝对 T 淋巴细胞的毒性  11-12
    1.1.3 铝对 T 淋巴细胞亚群的影响  12
    1.1.4 铝对细胞因子的影响  12
    1.1.5 铝对体液免疫的毒性  12-13
  1.2 肾上腺素与免疫  13-14
    1.2.1 肾上腺素能受体  13
    1.2.2 环磷酸腺苷  13-14
    1.2.3 β-AR-cAMP 途径  14
    1.2.4 肾上腺素对免疫功能的调控作用  14
  1.3 研究目的和意义  14-16
2 材料与方法  16-21
  2.1 实验主要仪器与材料  16-17
    2.1.1 主要仪器  16
    2.1.2 主要试剂  16-17
  2.2 实验方法  17-20
    2.2.1 大鼠脾脏淋巴细胞悬液的制备  17
    2.2.2 大鼠脾脏淋巴细胞培养及分组处理  17
    2.2.3 样品的采集与处理  17-18
    2.2.4 T、B 淋巴细胞增殖率的检测  18
    2.2.5 T 淋巴细胞亚群的的检测  18
    2.2.6 IL-2 和 TNF-α含量的检测  18
    2.2.7 IgG 含量的检测  18
    2.2.8 淋巴细胞β2-AR 密度的检测  18-19
    2.2.9 淋巴细胞β2-AR mRNA 表达水平的检测  19-20
    2.2.10 淋巴细胞内 cAMP 含量的检测  20
  2.3 数据的统计与分析  20-21
3 结果与分析  21-27
  3.1 T、B 淋巴细胞的增殖率  21
  3.2 T 淋巴细胞亚群的含量  21-23
  3.3 IL-2 和 TNF-α的含量  23
  3.4 IgG 的含量  23-24
  3.5 淋巴细胞膜上的β2-AR 密度和β2-AR mRNA 表达水平  24-25
  3.6 淋巴细胞内 cAMP 的含量  25-27
4 讨论  27-31
  4.1 肾上腺素对染铝脾脏 T、B 淋巴细胞增殖的影响  27
  4.2 肾上腺素对染铝脾脏 T 淋巴细胞亚群的影响  27-28
  4.3 肾上腺素对染铝脾脏淋巴细胞 IL-2 和 TNF-α含量的影响  28-29
  4.4 肾上腺素对染铝脾脏淋巴细胞培养液中 IgG 含量的影响  29
  4.5 肾上腺素对染铝脾脏淋巴细胞β2-AR 水平的影响  29-30
  4.6 肾上腺素对染铝脾脏淋巴细胞内 cAMP 含量的影响  30-31
5 结论  31-32
致谢  32-33
参考文献  33-42
攻读学位期间发表的学术论文  42

肾上腺素对体外培养染铝大鼠脾淋巴细胞免疫功能的影响

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