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炎热气候条件下母猪妊娠后期GABAR、HSPs、GRα mRNA的表达规律研究

作　者: 陈永辉
导　师: 范志勇
学　校: 湖南农业大学
专　业: 动物营养与饲料科学
关键词: GRα Hsp70 Hsp90 GABAAα1R GABAB1R 基因表达 母猪 妊娠
分类号: S828
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


本研究主要揭示炎热气候条件下母猪妊娠后期各组织器官GRα、Hsp70、 Hsp90、GABAAα1R和GABAB1R mRNA的表达规律,通过检测这些基因的表达规律,为GABA对母猪的抗应激分子机理研究提供基础参考数据。试验选用12头妊娠母猪,根据妊娠日龄不同分为2组,每组6头,分别是妊娠90天和妊娠110天。按照常规方法屠宰母猪,迅速采集脑、卵巢、心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏,液氮速冻后-80℃保存,提取RNA,反转录,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测各组织中GRα、Hsp70、Hsp90、GABAAα1R和GABAB1R mRNA的相对表达量。结果显示,妊娠90天时各基因在各组织中的mRNA表达丰度分别是：GRa:肺脏>脾脏>肝脏>肾脏>脑>卵巢>心脏；Hsp70：肺脏>脾脏>肝脏>脑>肾脏>卵巢>心脏；Hsp90：肺脏>肾脏>卵巢>脑>脾脏>肝脏>心脏；GABAAα1R:脑>肺脏>肝脏>卵巢>脾脏>肾脏>心脏;GABAB1R:脾脏>肺脏>脑>肾脏>卵巢>肝脏>心脏。母猪妊娠第110天时各基因在各组织中的nRNA表达丰度分别是：GRα:脾脏>肺脏>肝脏>肾脏>卵巢>心脏>脑；Hsp70：肺脏>脾脏>肾脏>脑>肝脏>卵巢>心脏；Hsp90：肺脏>卵巢>脾脏>肾脏>脑>肝脏>心脏；GABAAα1R:脑>肺脏>脾脏>肝脏>卵巢>肾脏>心脏；GABAB1R:脾脏>肺脏>肾脏>脑>卵巢>肝脏>心脏。妊娠第110天与第90天相比,肺脏中GRa和Hsp90mRNA的表达量极显著(P<0.01)降低,Hsp70mRNA显著(P<0.05)降低；脑中GRa和Hsp90mRNA的表达量极显著(P<0.01)降低；肝脏中GRa和GABAAα1R mRNA的相对表达量显著(P<0.05)降低；肺脏和脑中的GABAAα1R mRNA相对表达量具有明显的下降趋势,但差异不显著(P>0.05)；各基因在其它各组织中的1mRNA表达量无显著性变化(P>0.05)。上述研究结果提示,母猪妊娠后期GRα、Hsp70、Hsp90、GABAAα1R和GABAB1R mRNA的表达具有组织特异性,其中GRα、Hsp70、Hsp90和GABAB1R mRNA优先在肺脏和脾脏中表达,而GABAAα1R mRNA在脑中的相对表达量最高,各基因在心脏中的表达量最低。母猪妊娠第110天和第90天相比,各基因mRNA的相对表达量主要在脑、肺脏和肝脏中有不同程度的降低,在其它各组织中没有明显的变化。

全文目录


摘要  8-10
Abstract  10-12
第一章 文献综述  12-22
  引言  12-14
  第一节 GR、HSPs和GABAR mRNA的表达规律及其在应激反应中的作用  14-21
    1 糖皮质激素及其受体在应激反应中的作用  14-16
      1.1 糖皮质激素受体的结构功能  14-15
      1.2 GRa的表达规律及其在应激反应中的作用  15-16
    2 热休克蛋白的功能特性及其在应激反应中的保护作用  16-18
      2.1 热休克蛋白的特性及功能  16-17
      2.2 Hsp70、Hsp90的表达规律及其在应激反应中的保护作用  17-18
    3 GABA受体的结构功能及其在应激反应中的作用  18-21
      3.1 GABA受体的结构功能  18-19
      3.2 GABA受体的表达规律及其在应激反应中的作用  19-21
  第二节 本研究的目的、意义及主要内容  21-22
第二章 试验研究  22-49
  1 材料方法  22-30
    1.1 试验动物分组与饲养管理  22
    1.2 样品采集  22
    1.3 主要试验仪器及用品  22-23
    1.4 实验步骤  23-27
      1.4.1 Trizol法提取组织中总RNA步骤  23-24
      1.4.2 检测总RNA的浓度和质量  24
      1.4.3 RNA的纯化及反转录  24-25
      1.4.4 引物的设计与合成  25-26
      1.4.5 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测各基因mRNA表达水平  26
      1.4.6 结果处理  26-27
    1.5 统计分析  27-30
  2 结果与分析  30-39
    2.1 GRα mRNA在各组织中的相对表达量  30-33
    2.2 Hsp70 mRNA在各组织中的相对表达量  33-34
    2.3 Hsp90 mRNA在各组织中的相对表达量  34-35
    2.4 GABA_(Aα1)受体亚基mRNA在各组织中的相对表达量  35-37
    2.5 GAB_(AB1)受体亚基mRNA在各组织中的相对表达量  37-39
  3 讨论  39-49
    3.1 母猪妊娠后期GRα mRNA在各组织中的表达规律  39-41
    3.2 母猪妊娠后期Hsp70和Hsp90 mRNA在各组织中的表达规律  41-43
    3.3 母猪妊娠后期GABA_(Aα1)和GABA_(B1)受体亚基mRNA在各组织中的表达规律  43-47
      3.3.1 母猪妊娠后期GABA_(Aα1)受体亚基mRNA在各组织中的表达规律  44-45
      3.3.2 母猪妊娠后期GAB_(AB1)受体亚基mRNA在各组织中的表达规律  45-47
    3.4 母猪妊娠后期GRa、Hsp70、Hsp90、GABA_(Aα1)R和GABA_(B1)RmRNA的表达规律关系  47-49
第三章 结论与建议  49-50
  1 主要结论  49
  2 创新点  49
  3 有待进一步研究的问题  49-50
参考文献  50-63
致谢  63-64
作者简介  64

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 家畜 > 猪
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