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番茄黄化曲叶病毒江苏分离物侵染性克隆的构建及其在品种抗性鉴定上的应用

作　者: 孙海霞
导　师: 余文贵
学　校: 南京农业大学
专　业: 园艺
关键词: 番茄黄化曲叶病毒 病害调查 侵染性克隆的构建 农杆菌注射接种
分类号: S436.412
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 35次
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内容摘要


本文通过对江苏省部分番茄上的双生病毒的病害调查、取样,并对样品分离物的部分序列进行测定,序列分析结果显示该病毒分离物属于粉虱传双生病毒(whitefly transmitted geminiviruses, WTGs),与番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)的同源性高达99%。其中在南京、常州、泰州、连云港、徐州、盐城、苏州等地区均发现有该病害的危害。通过对兴化地区病毒分离物DNA-A全序列的克隆及测序,BLAST分析表明该病毒属于番茄黄化曲叶病毒。分子检测发现该病毒体内没有DNAβ卫星分子,只有DNA-A组分。为明确江苏省番茄黄化曲叶病毒DNA-A的侵染性,通过对其DNA-A组分进行侵染性克隆的构建及侵染性验证。结果表明：该病毒的DNA-A组分能够单独侵染寄主植物并诱发感病症状；这说明侵染江苏省番茄黄化曲叶病的病原是番茄黄化曲叶病毒。把构建好的侵染性克隆转入农杆菌,用农杆菌注射接种法对9个番茄品种TYLCV的抗性进行筛选、鉴定,同时用室内烟粉虱接种作比较。鉴定结果表明：烟粉虱接种同农杆菌接种发病程度基本一致；并从这9个品种中筛选到2个抗性较好的品种,为选育抗性品种提供了亲本材料。将构建的侵染性克隆用于农杆菌注射接种来筛选抗TYLCV的番茄品种的方法在国内尚未报道过,与烟粉虱接种相比,农杆菌注射接种能够控制病毒接种量及接种时期,其鉴定结果更稳定、可靠。该方法的成功应用将为今后育种工作中筛选番茄对TYLCV的抗性提供了一个稳定、准确的方法。

全文目录


摘要  6-7
ABSTRACT  7-8
引言  8-9
第一章 文献综述  9-25
  第一节 番茄黄化曲叶病毒的发生与危害  9-11
    1 双生病毒概况  9-10
      1.1 双生病毒的分类  9
      1.2 双生病毒的发生与危害  9-10
    2 番茄黄化曲叶病毒的危害  10-11
      2.1 番茄黄化曲叶病毒病在国外发生情况  10
      2.2 番茄黄化曲叶病毒在我国的发生情况  10-11
  第二节 番茄抗番茄黄化曲叶病毒的研究进展  11-15
    1 抗性品种的研究进展  11-12
    2 抗性品种的来源  12-15
      2.1 起源于病原的抗性  12-13
      2.2 野生番茄品种的抗性基因  13-14
      2.3 其它野生番茄品种的抗性机理  14-15
  第三节 抗TYLCV品种的鉴定  15-18
    1 抗性品种的鉴定方法  15-17
      1.1 烟粉虱接种  16
      1.2 农杆菌接种  16
      1.3 嫁接接种  16-17
    2 评价等级及分类标准  17-18
      2.1 评价等级  17-18
  参考文献  18-25
第二章 2008-2009年江苏省番茄上粉虱传双生病毒的发生分布  25-33
  摘要  25
  Abstract  25-26
  1 材料和方法  26-27
    1.1 材料  26
    1.2 方法  26-27
  2 结果分析  27-31
    2.1 田间症状  27-28
    2.2 PCR扩增结果  28-29
    2.3 序列分析  29-31
  3 讨论  31
  参考文献  31-33
第三章 TYLCV江苏分离物侵染性克隆的构建及其致病性测定  33-49
  摘要  33
  Abstract  33-34
  1 材料和方法  34-40
    1.1 材料  34
    1.2 方法  34-40
  2 结果与分析  40-46
    2.1 分子检测及序列分析  40-42
    2.2 侵染性克隆的构建  42-44
    2.3 侵染性克隆的侵染性验证  44-46
  3 讨论  46-47
  参考文献  47-49
第四章 侵染性克隆PB-TY-XH-1.8A在番茄黄化曲叶病毒抗性鉴定上的应用  49-57
  摘要  49
  Abstract  49-50
  1 材料和方法  50-51
    1.1 材料  50-51
    1.2 方法  51
  2 结果  51-54
    2.1 症状调查  51
    2.2 分子检测  51-52
    2.3 注射接种发病统计  52
    2.4 烟粉虱接种发病统计  52-53
    2.5 两种接种方式中抗性表现的比较  53
    2.6 抗性接种株的带毒率统计  53-54
  3 讨论  54-55
  参考文献  55-57
全文总结  57-59
攻读硕士期间发表的文章  59-61
致谢  61-63
附录  63-64

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 园艺作物病虫害及其防治 > 蔬菜病虫害 > 茄果类病虫害 > 番茄病虫害
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