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茄镰孢菌（Fusarium solani）对欧美杨细菌性溃疡病发生的影响分析

作　者: 游昕
导　师: 贺伟
学　校: 北京林业大学
专　业: 森林保护学
关键词: 欧美杨细菌性溃疡病 茄镰孢菌 Lonsdalea quercina
分类号: S763.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


欧美杨溃疡病是国内广泛栽种的欧美杨(Populus xeuramericana)(?)品种上新发现的病害,其中分离到的Lonsdalea quercina和Fusarium solani在室内外接种,均可在欧美杨上产生症状,但L. quercina引起的症状更为典型,F. solani在致病过程中所起的作用尚不明确。为了明确欧美杨溃疡病发生过程中2种微生物的关系,通过分离培养试验、拮抗试验、接种试验、荧光定量PCR和野外调查,并将所得数据用统计学软件分析。结果表明,健康杨树中未分离到F.solani,欧美杨溃疡病病株病斑的F. solani分离率高达55.3%；拮抗实验显示L. quercina和F. solani两者间不具有拮抗关系；L. quercina和F. solani混合接种与两者单独接种时所形成病斑的相关系数分别在0.9和0.8以上,L. quercina与病害发生相关性更高,表明L.quercina在病害发生中起主要致病作用；实时荧光定量PCR检测显示,相较于F. solani, L. quercina在欧美杨组织内的数量增加更快；野外调查表明,F. solani在溃疡病发生中后期于病斑上出现较多。综上所述,F. solani致病力较低,常常与L. quercina相伴出现,扮演着加重病害发生的角色。

全文目录


摘要  4-5
ABSTRACT  5-6
目录  6-8
1. 引言  8-20
  1.1 镰刀菌引起的林木病害概况  8-10
    1.1.1 引起林木病害的镰刀菌种类  8-9
    1.1.2 Fusarium solani在林业上引起的主要病害  9-10
  1.2 Lonsdalea quercina及其所致林木病害  10
  1.3 研究植物致病过程中微生物相互作用的意义  10-11
  1.4 微生物之间相互作用的各种关系的性质和作用机制  11-14
    1.4.1 互容现象  11-12
    1.4.2 共生现象  12-13
    1.4.3 拮抗现象  13
    1.4.4 竞争  13
    1.4.5 抗生  13-14
    1.4.7 捕食  14
    1.4.8 三种及三种以上的微生物间的相互作用  14
  1.5 微生物之间相互关系研究的方法  14-15
  1.6 植物致病过程中涉及微生物相互作用和微生物研究方法的实例  15-17
    1.6.1 案例一：松树枯萎病  15-16
    1.6.2 案例二：竹丛枝病  16
    1.6.3 案例三：小麦赤霉病  16-17
    1.6.4 案例四：小麦叶枯病  17
  1.7 展望  17-18
  1.8 本研究的目的及意义  18-20
2 材料与方法  20-29
  2.1 欧美杨溃疡病病斑组织分离  20-21
    2.1.1 供试培养基  20
    2.1.2 供试引物  20
    2.1.3 样本采集  20
    2.1.4 分离方法  20-21
    2.1.5 鉴定方法  21
  2.2 F.solani特异性引物设计  21-24
    2.2.1 供试材料  21
    2.2.2 引物设计方法  21
    2.2.3 引物特异性检验  21-22
    2.2.4 普通PCR和实时荧光定量PCR反应条件  22-24
    2.2.5 特异性引物灵敏度检验  24
    2.2.6 荧光实时定量PCR标准曲线的建立  24
  2.3 分离自欧美杨溃疡病病斑的病原细菌和茄镰孢菌接种  24-26
    2.3.1 供试材料  24-25
    2.3.2 试验方法  25-26
    2.3.3 试验数据统计  26
  2.4 两种微生物实时荧光定量PCR  26-27
    2.4.1 供试材料  26
    2.4.2 试验方法  26-27
  2.5 两种微生物在田间出现时间的调查  27-29
    2.5.1 调查方法  27
    2.5.2 调查标准  27-28
    2.5.3 统计分析  28-29
3 结果与分析  29-42
  3.1 欧美杨溃疡病病斑组织中茄镰孢菌的分离比率  29
  3.2 F.solani的特异性引物检验结果  29-32
  3.3 分离自欧美杨溃疡病病斑的病原细菌和茄镰孢菌接种结果  32-37
    3.3.1 培养基上的拮抗测试  32-35
    3.3.2 相关性分析试验  35-37
  3.4 实时荧光定量PCR检测两种微生物在107杨组织内的存在量  37-40
    3.4.1 L.quercina在单独接种和混合接种时存在量的变化情况  37-39
    3.4.2 F.solani在单独接种和混合接种时存在量的变化情况  39-40
  3.5 两种微生物在田间出现时间的调查  40-42
4 结论  42-44
5 讨论  44-46
  5.1 欧美杨溃疡病病斑组织分离  44
  5.2 F.solani特异性引物的设计  44
  5.3 分离自欧美杨溃疡病病斑的病原细菌和茄镰孢菌接种  44
  5.4 实时荧光定量PCR检测两种微生物在欧美杨组织内的存在量  44-45
  5.5 两种微生物在田间出现时间的调查  45-46
参考文献  46-52
个人简介  52-53
导师简介  53-54
致谢  54

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中图分类: > 农业科学 > 林业 > 森林保护学 > 森林病虫害及其防治 > 各种树的病虫害及其防治
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