学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

手性有机磷农药对映体的酶选择性行为研究

作　者: 柴婷婷
导　师: 王雪青
学　校: 天津商业大学
专　业: 发酵工程
关键词: 育畜磷 对映体 高效液相色谱法 乙酰胆碱酯酶 酶抑制 选择性
分类号: TQ450.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 31次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


有机磷农药因其具有高效地预防、消灭或控制虫害，且快速降解的特点而广泛地应用于农业。近年来许多研究表明：手性有机磷农药对映体在生物体内和环境中代谢均可能存在差异。因此，手性有机磷农药对映体的酶选择性行为研究具有重要的现实意义。本实验首先对育畜磷对映体在正相高效液相色谱和反相高效液相色谱两个不同系统的不同手性柱上进行了拆分，其次考察了流动相比例对育畜磷对映体拆分的影响，给出了育畜磷对映体的旋光洗脱顺序；同时研究了柱温对育畜磷对映体分离的影响。结果显示：在两个不同的高效液相色谱系统中，育畜磷对映体在色谱柱Lux Cellulose-1和LuxAmylose-2上得到了基线分离，且洗脱顺序是一致的。在正相高效液相色谱系统中，育畜磷对映体在色谱柱Lux Cellulose-2上得到完全分离，然而在反相高效液相色谱系统中，育畜磷对映体未得到基线分离。在正相高效液相色谱系统中，育畜磷左旋体先从色谱柱LuxCellulose-2洗脱下来，然而育畜磷右旋体先从色谱柱Lux Cellulose-1和Lux Amylose-2洗脱出来。虽然在正相高效液相色谱系统中，育畜磷对映体在Lux Cellulose-3上不能得到基线分离，但仍然可以明确其旋光洗脱顺序。本实验通过Van’t Hoff方程考察了柱温从5℃到40℃对育畜磷对映体分离的影响。本实验对育畜磷外消旋体和育畜磷对映体单体对电鳗的乙酰胆碱酯酶的抑制作用进行了研究。通过计算育畜磷外消旋体和育畜磷对映体单体对电鳗的乙酰胆碱酯酶的抑制率常数(ki)，米氏参数(Km)，半抑制浓度(IC50)，分析得出畜磷外消旋体和育畜磷对映体单体对电鳗乙酰胆碱酯酶的抑制作用具有选择性差异，为今后的手性农药对映体机理研究奠定了研究基础。

全文目录


摘要  5-6
ABSTRACT  6-9
第一章 前言  9-24
  1.1 手性有机磷农药概述  9-13
  1.2 手性有机磷农药对映体的分离方法  13-17
    1.2.1 毛细管电泳法  14
    1.2.2 气相色谱法  14-15
    1.2.3 液相色谱法  15-17
  1.3 手性有机磷农药对映体的选择性行为  17-18
  1.4 有机磷农药对乙酰胆碱酶抑制机制  18-22
    1.4.1 乙酰胆碱酯酶水解乙酰胆碱机制  18-19
    1.4.2 有机磷对乙酰胆碱酯酶的抑制机理  19-20
    1.4.3 米氏常数(K_m)  20-21
    1.4.4 有机磷抑制速率常数(k_i)  21-22
    1.4.5 半抑制浓度(IC_(50))  22
  1.5 本文的立题背景、意义、依据  22-24
第二章 育畜磷对映体拆分  24-39
  2.1 材料与仪器  24-26
    2.1.1 育畜磷  24
    2.1.2 手性色谱柱  24-26
    2.1.3 仪器  26
  2.2 实验方法  26
    2.2.1 标准品溶液的配制  26
    2.2.2 色谱条件  26
    2.2.3 色谱参数的计算  26
  2.3 实验结果与讨论  26-37
    2.3.1 育畜磷对映体在正相高效液相色谱系统中的拆分  26-30
    2.3.2 育畜磷对映体在反相高效液相色谱系统中的拆分  30-32
    2.3.3 温度对育畜磷对映体拆分的影响  32-37
  2.4 小结  37-39
第三章 育畜磷对映体对乙酰胆碱酯酶的抑制作用  39-55
  3.1 材料与仪器  39
    3.1.1 材料及试剂  39
    3.1.2 仪器  39
  3.2 育畜磷单体的制备  39
  3.3 溶液的配制  39-40
  3.4 酶反应体系  40-41
    3.4.1 实验原理  40
    3.4.2 酶活力测定  40
    3.4.3 测定动力学参数 K_m 和 V_(max) 的实验方法  40
    3.4.4 测定抑制速率常数 k_i的实验方法  40-41
    3.4.5 测定半抑制浓度 IC_(50)的实验方法  41
  3.5 实验结果与讨论  41-54
    3.5.1 最优乙酰胆碱酯酶浓度  41-42
    3.5.2 最优酶反应时间  42
    3.5.3 最优有机溶剂  42-43
    3.5.4 动力学参数(V_(max) 和 K_m)  43-47
    3.5.5 抑制速率常数(k_i)  47-51
    3.5.6 半抑制浓度(IC_(50))  51-54
  3.6 小结  54-55
第四章 结论  55-57
  4.1 育畜磷对映体的分离  55
  4.2 乙酰胆碱酯酶催化条件的优化  55
  4.3 育畜磷的酶动力学参数  55-56
  4.4 进一步工作构想  56-57
参考文献  57-62
论文、参加科研情况说明以及学位论文使用授权声明  62-63
致谢  63-64

相似论文

  1. 煤粉再燃反应条件对NH3非催化还原NOx过程影响的实验研究,X701
  2. 珊瑚共附生可培养真菌菌群多样性及其生物活性研究,R284
  3. 喹喔啉-1，4-二氧化物衍生物的设计、合成及抗肿瘤活性研究,R914
  4. 延胡索乙素的立体选择性代谢及其对肝脏药物代谢酶的影响,R96
  5. 奶粉中三聚氰胺分析方法研究及快速测定体系的建立,O657.3
  6. SCR脱硝反应器物理场特性研究与结构优化设计,X773
  7. 大螟在不同寄主植物上发育特性及防治药剂研究,S435.112.1
  8. 褐飞虱海藻糖酶特征分析及外源化合物的抑制作用,S433.3
  9. 马铃薯甲虫对有机磷类和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗药性及其机理,S435.32
  10. 害虫捕食性天敌拟环纹豹蛛烟碱型乙酰胆碱受体毒理学特性研究,S476.2
  11. 鸭ADSL与PurH基因序列特征及表达与肌肉肌苷酸（IMP）含量的相关性分析,S834
  12. 圆眼珍珠蛙（Lepidobatrachus laevis）皮肤cDNA文库的构建、筛选及胰蛋白酶抑制剂的原核表达和活性研究,Q78
  13. 多聚糖PC类衍生物CSPs的合成及手性分离能力的研究,TQ460.1
  14. 害虫捕食性天敌拟环纹豹蛛乙酰胆碱酯酶毒理学特性研究,S481.1
  15. 基于磁流体组装的空心磁性碳微球及其功能性复合体,TB383.4
  16. 桑枝皮醇溶物的有效成分及其体外生物活性,S888.2
  17. 手性多氯联苯和拟除虫菊酯类农药在超临界流体色谱中的对映体分离研究,O657.7
  18. 四种手性农药对甾体类激素代谢影响的对映体选择性,X503.1
  19. 地塞米松对大鼠坐骨神经损伤后骨骼肌及运动终板修复作用的研究,R651.3
  20. 具有光、磁和铁电性质的手性分子基稀土功能材料的构筑与研究,O641.4
  21. 灭多威与乐斯本的遗传毒性及其对昆虫抗药性研究,S482.3

中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 农药工业 > 一般性问题 > 基础理论
© 2012 www.xueweilunwen.com