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产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性菌分子耐药机制研究

作　者: 倪朝辉
导　师: 李凡
学　校: 吉林大学
专　业: 病原生物学
关键词: 超广谱β-内酰胺酶革兰阴性菌耐药分子机制
分类号: R378
类　型: 博士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrumβ-lactamases, ESBLs)是革兰阴性菌对β-内酰胺类抗菌药物广泛耐药的重要原因。本研究采用三相水解试验、聚合酶链反应(PCR)、限制性片断长度多态性分析(RFLP)、PCR-mapping、重复一致序列PCR(rep-PCR)、接合转移试验、质粒图谱分析以及克隆测序表达等方法,对产ESBLs肠杆菌科细菌和多重耐药铜绿假单胞菌的分子耐药机制进行了探讨。结果显示:革兰阴性菌临床分离株中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌的检出率高,且常为多重耐药菌株,所携带的ESBLs基因型以CTX-M型为主,可与广谱β-内酰胺酶基因、其它型别ESBLs基因以及DHA-1型质粒介导的AmpC酶基因共存。产ESBLs菌株I类整合子携带率较高,整合子内含有氨基糖苷类、甲氧苄胺嘧啶类和利福平等多种耐药基因盒,参与形成细菌的多重耐药表型,并可由质粒介导在不同菌株间通过接合方式传递其多重耐药性。本研究在整合子内发现了一个未知功能的开放读码基因,经克隆、测序、诱导表达及药敏试验分析,初步确定为一种新型二氢叶酸还原酶基因,编码对甲氧苄胺嘧啶类药物的耐药性。在海南地区首次发现产PER-1型ESBLs的铜绿假单胞菌,该菌株是其院内感染的主要流行株。本研究结果丰富和完善了我国东北及海南地区产ESBLs革兰阴性菌的分子流行病学资料,揭示了其多重耐药性产生和播散的作用机制,为临床更有效地预防和控制产ESBLs细菌感染提供了重要的科学依据。

全文目录

提要  4-7
英文缩略词表  7-8
前言  8-10
第一篇文献综述  10-39
  第一章超广谱Β-内酰胺酶研究进展  10-29
    一、β-内酰胺类抗生素的分类和主要特点  10-12
    二、β-内酰胺酶分类  12-14
    三、ESBLs 的定义、来源和类型  14-20
    四、ESBLs 流行病学分布特征  20-22
    五、ESBLs 的检测  22-26
    六、ESBLs 的防治  26-27
    七、结语  27-29
  第二章基因盒—整合子系统研究进展  29-39
    一、整合子结构  29-31
    二、整合子的分类  31-33
    三、整合子的功能  33-35
    四、基因盒的结构与种类  35-38
    五、结语  38-39
第二篇实验研究  39-129
  第一章产ESBLS 细菌耐药表型与基因型研究  39-77
    一、材料  39-45
    二、方法  45-55
    三、结果  55-72
    四、讨论  72-77
  第二章产ESBLS 临床分离株可转移多重耐药机制研究  77-110
    一、材料  77-79
    二、方法  79-89
    三、结果  89-104
    四、讨论  104-110
  第三章多重耐药铜绿假单胞菌产Β-内酰胺酶分子流行病学研究  110-129
    一、材料  111-112
    二、方法  112-115
    三、结果  115-124
    四、讨论  124-129
结论  129-130
参考文献  130-141
攻读博士期间发表的学术论文、著作  141-142
中文摘要  142-146
ABSTRACT  146-152
致谢  152-153
导师简介  153
作者简介  153

产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性菌分子耐药机制研究

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