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益肾清利活血法组方对肾间质纤维化及肾小管上皮细胞转分化过程干预作用的研究
作 者: 孙世竹
导 师: 孙伟
学 校: 南京中医药大学
专 业: 中西医结合临床
关键词: 肾虚湿瘀 益肾清利活血 肾间质纤维化 输尿管梗阻 小管上皮细胞 上皮间充质转分化
分类号: R277.5
类 型: 博士论文
年 份: 2006年
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内容摘要
背景: 导师孙伟教授在临床实践中深刻体会到原发性肾病慢性进展的主要病机特点在于虚、湿(热)、瘀。其发病是在肾元亏虚、正气不足的基础上,遭受外邪或内伤等因素,致气血失和、脏腑机能失调,而产生湿热、瘀血等病理产物,日久迁延,则形成本虚标实、肾虚湿瘀的病机转归,若湿邪久恋不去酿生湿浊、浊毒等病理产物,则进入肾功能不全及尿毒症阶段。因此我们提出慢性肾病的微观病理机制为肾虚湿瘀。我们认为肾病慢性进展的主要病机特点在于虚、湿(热)、瘀。 针对肾虚湿瘀的病理,治法上我们以益肾清利活血为立法原则,以治病求本、既病防变为总体原则,一法为主,但又在具体组方时注意调理肺、脾、肾三脏,兼顾湿、热、瘀三邪,从而达到扶助正气以固本,祛除病邪以阻止肾纤维化进展,并且兼具预防复发的作用。 无论肾脏病原发病因和部位在肾小球、肾小管还是肾血管,最终均可导致肾小管萎缩和消失、肾间质增生和纤维化,肾功能的损害都与肾间质纤维化病变的程度密切相关。这些疾病能引起肾小管上皮细胞的凋亡、肾间质炎性细胞的浸润、肌成纤维细胞的聚集,并在一些促纤维化因子的参与下,使细胞外基质(ECM)生成增多、降解减少,而产生肾间质纤维化,导致肾功能严重受损。可见肾间质纤维化与肾病慢性进展密切相关。 围绕小管间质损伤后的间质纤维化发生发展及防治方面的研究受到广泛重视,目前研究认为肾间质纤维化发生机制可能与多种细胞(如肾小管上皮细胞、间质成纤维细胞等)转变或转分化为肌成纤维细胞(MyoFb),其中TGF-β1可能是主要的致纤维化因子之一,导致小管上皮细胞间充质转分化(TEMT)和细胞激活。通过临床经验总结,我们以益肾清利活血法组方,研究其对肾间质纤维化的防治作用。通过以下几个方面
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全文目录
中文摘要 5-9 英文摘要 9-14 本文主要缩略词 14-17 第一部分 肾虚湿瘀与肾纤维化 17-50 一、肾虚湿瘀理论与益肾清利活血法 17-27 (一) 肾虚湿瘀理论的形成 17-24 1.肾虚是致病之本 18-19 2.湿热伴随疾病的发生、发展 19-21 3.血瘀阻络形成肾纤维化 21-24 (二) 益肾清利活血法则治疗慢性肾脏病 24-27 1.益肾清利活血治疗原则的确立 24-25 2.益肾清利活血方方释 25-27 二、肾间质纤维化与肾小管上皮细胞转分化 27-50 (一) 肾间质纤维化 27-33 (二) 小管上皮细胞的转分化 33-50 第二部分 益肾清利活血方对UUO大鼠肾间质纤维化防治作用研究 50-81 一、材料和方法 50-53 二、研究内容 53-57 三、实验结果 57-74 (一) 综合评价益肾活血清利方与苯那普利对UUO大鼠肾纤维化作用 57-61 (二) 从免疫组化分析以益肾清利活血方对UUO大鼠肾组织纤维化过程的作用 61-69 1.巨噬细胞ED1抗体免疫组化评价 61 2.NF-κB免疫组化评价 61-65 3.α-SMA免疫组化评 65 4.PCNA免疫组化评价 65-69 (三) 利用RT-PCR分析以益肾清利活血方对UUO大鼠肾组织纤维化过程中TGF-β1、PAI-1及BCL-2 mRNA表达的作用 69-74 1.TGF-β1 mRNA表达的评价 69-70 2.PAI-1 mRNA表达的评价 70-72 3.BCL-2 mRNA表达的评价 72-74 四 讨论 74-81 (一) 综合评价益肾清利活血中药与苯那普利对UUO大鼠肾纤维化作用 74 (二) 从免疫组化分析益肾清利活血方对UUO大鼠肾纤维化过程作用 74-76 (三) 利用RT-PCR分析以益肾清利活血为法组方对UUO大鼠肾间质纤维化过程中TGF-β1、PAI-1及BCL-2mRNA表达的作用 76-81 第三部分 益肾清利活血方对HK2细胞EMT过程多信号途径的干预作用 81-100 一、材料和方法 81-85 二、细胞培养 85-86 三、检测指标 86-89 四、统计学方法 89-90 五、实验结果 90-96 1.HK2细胞EMT过程中波形蛋白的表达 90-92 2.HK2细胞EMT过程中Smad4 mRNA的表达 92 3.HK2细胞EMT过程中RhoA mRNA的表达 92-96 六 讨论 96-100 结论 100-102 致谢 102
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中医其他学科 > 中医泌尿学
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