学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

抗肝癌重组单链Fv段—免疫毒素（scFv25-TNFα）及二硫键稳定Fv段—免疫毒素（dsFv25-TNFα）的构建、表达、纯化及导向研究

作　者: 马兰花
导　师: 刘彦仿
学　校: 第四军医大学
专　业: 病理学
关键词: 肝细胞肝癌单链Fv段二硫键稳定Fv段单链Fv段-免疫毒素二硫键稳定Fv段-免疫毒素溶解折叠导向治疗
分类号: R735.7
类　型: 博士论文
年　份: 2000年
下　载: 54次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

1．抗肝癌重组单链Fv段-免疫毒素(m／hseFv25-TNFα)的表达、纯化及导向研究将抗肝癌重组单链Fv段-免疫毒素(pGEX 4T-1 m／hscFv25-TNFα)在大肠杆菌JM109中以IPTG诱导进行表达。表达产物为包涵体形式，溶解和折叠后，以GST亲合层析色谱纯化。间接免疫荧光染色表明m／hscFv25-TNFα的特异性和亲和力与亲本抗体HAb25相比没有明显下降。MTT实验提示在放线菌素D存在的情况下，体外m／hscFv25-TNFα对靶细胞SMMC-7721有明显的细胞毒作用；如无放线菌素D，靶细胞SMMC-7721则对m／hscFv25-TNFα不敏感。荷肝癌裸鼠体内的抑瘤实验显示m／hscFv25-TNFα对荷肝癌裸鼠体内直径2～4mm左右的肿瘤具有一定的导向杀伤作用，实验组14只裸鼠中3只部分缓解，4只完全消失，5只处于静止状态。而TNFα对照组无完全缓解。我们的结果提示TNFα对靶细胞SMMC-7721的杀伤作用不是直接的，必须依赖于体内的某些机制，可能TNFα是通过作用于血管肉皮细胞，或通过诱导肿瘤细胞凋亡，或体内某些物质起到了放线菌素D、谷胱甘肽或转录抑制因子的作用，需进一步研究以明确之。

全文目录

缩略语表  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-11
实验研究  11-47
  第一部分抗肝癌重组单链Fv段-免疫毒素(m／hscFv25-TNFα)的表达、纯化及导向研究  11-23
    材料和方法  11-17
    结果  17-20
    讨论  20-23
  第二部分抗肝癌重组二硫键稳定Fv段-免疫毒素(dsFv-TNFα)的构建、表达、纯化及活性鉴定  23-47
    材料和方法  23-33
    结果  33-43
    讨论  43-47
小结  47-48
致谢  48-49
参考文献  49-52
文献回顾  52-78

抗肝癌重组单链Fv段—免疫毒素（scFv25-TNFα）及二硫键稳定Fv段—免疫毒素（dsFv25-TNFα）的构建、表达、纯化及导向研究

内容摘要

全文目录

相似论文