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真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生长及次生代谢产物的影响

作　者: 陈晓梅
导　师: 郭顺星；杨峻山；肖培根
学　校: 中国协和医科大学
专　业: 生药学
关键词: 铁皮石解原球茎真菌诱导子共生培养工艺次生代谢产物 HPLC-MS分析
分类号: R282
类　型: 博士论文
年　份: 2004年
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内容摘要

铁皮石斛Dendrobium candidum Wall．Ex Lindl是《中华人民共和国药典》收载的5种石斛属植物之一，是石斛属药用植物中最为珍稀名贵的种，有着极高的药用价值。近年来，由于过度采挖和生境的破坏，铁皮石斛的自然资源已濒临枯竭。而铁皮石斛独特的生理和生态学特点，又使其目前的人工栽培技术还不够成熟，难以实现大面积栽培。如何能够在保护铁皮石斛自然资源的前提下充分利用它为人类的健康保护事业作出贡献，成为目前一个急待解决的问题。根据该植物与真菌形成菌根的特点，本论文对铁皮石斛原球茎与小菇属真菌MF24（Mycenasp．）诱导子的相互作用进行了系统研究；对MF24诱导子处理铁皮石斛原球茎、对照铁皮石斛原球茎、铁皮石斛原药材和金钗石斛原药材的化学成分进行了分析比较；对诱导子处理的铁皮石斛原球茎的次生代谢产物进行了研究：并以分离得到的铁皮石斛原球茎中的化学成分为标准，应用HPLC法分析了诱导子处理对原球茎中这些成分含量的影响，为解决铁皮石斛资源紧缺问题开辟新途径。一、获得了真菌诱导子在铁皮石斛原球茎培养中的最佳工艺首次以来源于铁皮石斛的小菇属内生真菌MF24（Mycena sp．）为诱导子，对铁皮石斛原球茎与诱导子在固体培养基上相互作用过程中诱导子的处理方法、使用剂量、加入时间及与原球茎作用时间等因素对原球茎生长及次生代谢产物的影响进行了系统研究，获得二者相互作用的最佳工艺为：以MF24菌麦麸液体培养基摇床发酵培养的发酵液为诱导子，以250mL·L^-1(诱导子·培养基^-1)的剂量加入以1／2MS土豆固体培养基光照培养16周的铁皮石斛原球茎中，继续培养6周后收获。与单独培养的原球茎相比，在此条件下培养的原球茎鲜重提高了50％，干重提高了28％，总生物碱含量提高了12％。这一工作为今后铁皮石斛原球茎工业化生产奠定了基础。二、应用HPLC-MS技术分析研究了石斛的化学成分铁皮石斛和金钗石斛中生物碱类成分的相对积分面积和分别为6.04％和43.15％：共有的25个相同的化学成分，相对积分面积和分别为97.12％和50.09％；这些成分中铁皮石斛有23个成分的含量和相对含量高于金钗石斛。这些结果说明：铁皮石斛和金钗石斛在生物碱类成分的数量和含量上有很大差别，但就相同化学成分而言，铁皮石斛质量好于金钗石斛，这可能是传统认为的

全文目录

中文摘要  3-5
英文摘要  5-7
前言  7-8
第一章文献综述：植物与真菌相互作用的生理生化研究  8-43
第二章真菌对三种药用植物生长及产物的影响  43-74
  第一节 4种内生真菌对金线莲无菌苗的影响  43-54
  第二节 4种内生真菌对金钗石斛无菌苗的影响  54-66
  第三节 2种内生真菌对铁皮石斛原球茎的影响  66-73
  第四节本章小结  73-74
第三章铁皮石斛原球茎与真菌诱导子共生培养工艺的研究  74-110
  第一节铁皮石斛原球茎基础培养基的确定  74-78
  第二节铁皮石斛原球茎生长曲线  78-84
  第三节真菌诱导子处理方法及加入剂量的研究  84-91
  第四节真菌诱导子加入剂量的进一步研究  91-96
  第五节真菌诱导子加入时间及共生培养时间的研究  96-103
  第六节不同对照处理对铁皮石斛原球茎的影响  103-110
第四章金钗石斛、铁皮石斛和铁皮石斛原球茎化学成分的分析比较  110-144
  第一节铁皮石斛与金钗石斛化学成分的比较  110-124
  第二节 MF24菌诱导子处理对铁皮石斛原球茎化学成分的影响  124-133
  第三节铁皮石斛原球茎与铁皮石斛化学成分的比较  133-144
第五章 MF24菌诱导子对铁皮石斛原球茎单体化合物的影响  144-158
  第一节铁皮石斛原球茎化学成分的研究  144-154
  第二节 MF24菌诱导子对铁皮石斛原球茎单体化合物的影响  154-158
主要结论  158-159
致谢  159-160
作者简历  160-161
附图  161-174

真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生长及次生代谢产物的影响

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