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关于人体冠状动脉旁路移植血管内乳动脉、桡动脉及大隐静脉中由一氧化氮与内皮超级化因子调节的内皮细胞功能的实验研究

作　者: 刘志刚
导　师: 刘晓程
学　校: 中国协和医科大学
专　业: 心脏外科
关键词: CABG IMA radial artery saphenous vein NO EDHF cytochrome P-450 relectrophysiology direct measurement endothelial function graft patency vascular biology
分类号: R654.2
类　型: 博士论文
年　份: 2000年
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内容摘要


研究背景及目的：冠状动脉旁路移植（CABG）心肌血管重建术是治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病的最有效方法之一。然而，由于旁路移植血管再狭窄与闭塞的发生，尤其是采用大隐静脉（SV）搭桥的病例这种现象更为严重，使CABG手术的远期疗效受到很大影响。临床研究发现，CABG术后内乳动脉（IMA）旁路血管的远期通畅率远远高于SV旁路血管，而且采用IMA搭桥的病例术后10年生存率也高于使用SV搭桥者。但迄今为止，导致IMA与SV旁路血管远期通畅率差异以及旁路血管闭塞的根本原因尚不清楚，关于IMA、SV和桡动脉（RA）等搭桥材料血管的许多生理特性也有待于深入探索。 研究发现，在一些刺激因素的作用下，血管内皮细胞可产生三种内皮源性血管舒张因子（EDRFs）-一氧化氮（NO）、前列环素（PGI2）和内皮源性超级化因子（EDHF），并通过这些因子调节血管张力、组织血流灌注，维持血管稳态环境。可以设想，在冠状动脉旁路血管中NO、EDHF等内皮细胞因子对于保持其术后长期通畅将起着重要的作用。 本课题通过直接检测IMA、SV与RA内皮细胞所释放的NO浓度以及平滑肌细胞的膜电位信号，对比人体不同搭桥材料血管中NO的释放量和EDHF调节的平滑肌细胞超级化作用的差异，研究EDHF的作用方式和化学本质以及评价外科准备过程对SV内皮细胞NO释放能力的影响，旨在探索导致不同材料的搭桥血管远期通畅率差异的根本原因。 材料与方法：本研究的对象为CABG手术中所使用的三种不同的搭桥材料血管IMA、SV与RA。采用膜式NO敏感电极与NO测定仪直接检测桥血管内皮细胞所释放的NO浓度，应用电生理技术通过玻璃微电极记录平滑肌细胞膜电位变化。分别将长度为5mm的IMA、SV与RA血管条放置于37℃血管灌流室（organchamber）中，用充有95％O2与5％CO2混合气体的Krebs溶液以3ml／min的速率持续灌注血管灌流室。向灌流室内分别加入乙酰胆碱（ACh，-8～-5log M）和缓激肽（BK，-10～-7log M）以激发NO与EDHF的释放，记录在不同激动剂作用下不同桥血管NO释放浓度的差异与平滑肌细胞膜电位变化特点。然后分别与NO阻断剂NG-氮基-左旋精氨酸（L-NNA，300μM）、PGI2阻断剂消炎痛（Indo，7μM）、NO清除剂牛血红蛋白（OHb，20μM）以及细胞色素P-450的两种阻断剂17-ODYA（10μM）和米康呐唑（miconazol，5μM）一起孵育30分钟，再次加入ACh（-8～-5log M）和BK（-10～-7log M），记录NO浓度与平滑肌细胞膜电位变化。在另一组独立的实验中，用剥掉内膜的IMA和SV作为EDHF作用的受体，以内膜完好的IMA和SV作为生成EDHF的供体来研究EDHF的可传递特性。分别将按上述方法准备好的IMA和SV同L-NNA（300μM）、Indo（7μM）、OHb（20μM）一起孵育30分钟，然后分别加入ACh（-5log M）和BK（-7log M），记录EDHF受体血管平滑肌细胞膜电位变化，同时监测血管灌流室内确无NO信号，以排除可能残存的NO对平滑肌细胞膜电位的影响。为了评估外科准备过程对SV内皮细胞NO合成与释放的影响，本研究还检测了经过常规外科压力扩张处理后SV的NO的释

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
前言  8-10
第一章 材料与方法  10-16
第二章 人体内乳动脉与大隐静脉内皮源性超级化因子调节的平滑肌细胞超级化以及内皮细胞一氧化氮释放的差异  16-28
第三章 人体内乳动脉与桡动脉一氧化氮与内皮超级化因子调节的内皮细胞功能的对比  28-42
第四章 外科准备过程对大隐静脉内皮细胞一氧化氮合成与释放的影响  42-51
第五章 关于内乳动脉与大隐静脉中内皮源性超级化因子的化学本质及其可传递特性的实验研究  51-62
第六章 三种搭桥材料血管一氧化氮与内皮超级化因子调节的内皮细胞功能对比  62-64
结论  64-65
综述一 关于各种冠状动脉旁路移植血管的生理特性以及影响远期通畅率诸因素的研究进展  65-77
综述二 内皮源性一氧化氮与内皮源性超极化因子在血管活动的自身调节中所起的作用  77-90
致谢  90

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