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海马SNAP-25和α_2受体在学习与记忆中的作用

作　者: 侯秋玲
导　师: 李葆明
学　校: 复旦大学
专　业: 神经生物学
关键词: SNAP-25 学习和记忆 海马 反义寡聚核苷酸 α2受体 CA1区 兴奋性突触后电位 长时程增强
分类号: Q42
类　型: 博士论文
年　份: 2005年
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内容摘要


SNAP-25是一种与突触小体相关的蛋白质,在轴突的生长、树突的形成、突触小泡与质膜的融合过程中起着重要的作用。在海马诱导LTP(long-term potentiation,长时程增强)后,SNAP-25的表达量增多。在学习与记忆相关基因的筛选过程中,我们观察到对大鼠进行场景恐惧行为训练后,海马SNAP-25的表达量升高。脑室注射SNAP-25基因的反义寡聚核苷酸(antisense),下调SNAP-25基因的表达,损伤大鼠在步下法抑制性回避任务中的长时记忆,而不影响短时记忆。这提示SNAP-25的表达水平与记忆的巩固之间可能具有直接的关联。为了进一步证实这一点,我们向海马CA1区或CA3区注射SNAP-25antisense,观察其对海马CA1或CA3区LTP诱导和维持的影响以及对依赖海马的学习和记忆行为的影响。结果表明,海马CA1或CA3区注射SNAP-25 antisense以后,大鼠的空间记忆和场景恐惧的长时记忆受到伤害,CA1或CA3区的LTP显著降低,而双脉冲易化(PPF,paired pulse facilitation)效应不受影响,即SNAP-25 antisense不是通过突触前的机制抑制LTP的表达。以上结果表明,海马SNAP-25参与记忆的巩固过程。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
第一部分 海马SNAP-25参与记忆的巩固  8-68
  第一节 引言  9-12
  第二节 材料和方法  12-29
    一、实验动物和药品  12
    二、实验总体流程图  12-13
    三、SNAP-25基因的筛选与鉴定  13-14
    四、行为训练后海马SNAP-25表达量的变化  14-15
    五、SNAP-25基因反义寡聚核苷酸的设计及功能鉴定  15-16
    六、行为训练后不同时间点海马SNAP-25表达量的变化  16-17
    七、海马SNAP-25基因的功能检测  17-27
    八、SNAP-25 antisense扩散范围及留存时间的检测  27-28
    九、统计学处理  28-29
  第三节 实验结果  29-54
    一、SNAP-25基因是一个与学习和记忆相关的基因  29
    二、大鼠接受步下法抑制性回避任务训练后，海马SNAP-25的表达量升高  29-30
    三、脑室注射SNAP-25 antisense损伤大鼠对步下法抑制性回避任务的长时记忆  30
    四、大鼠接受场景恐惧条件反射任务训练后，海马SNAP-25的表达量一过性升高  30-31
    五、海马注射SNAP-25 antisense损伤大鼠的场景恐惧记忆  31-32
    六、海马注射SNAP-25 antisense损伤大鼠空间学习和记忆  32-34
    七、海马注射SNAP-25 antisense后，LTP幅度显著降低  34-35
    八、SNAP-25 antisense能够进入海马神经元，并留存6小时以上  35-54
  第四节 讨论  54-59
    一、Antisense技术的可行性分析  54-56
    二、SNAP-25与学习记忆相关  56
    三、SNAP-25参与记忆的巩固  56-58
    四、SNAP-25在突触后的可能作用机制  58-59
  第五节 参考文献  59-68
第二部分 海马CA1区α_2受体参与对兴奋性突触传递的调控  68-85
  第一节 引言  69-70
  第二节 材料和方法  70-73
    一、实验药品  70
    二、实验动物  70
    三、兴奋性突触后电位的记录  70-72
    四、统计学处理  72-73
  第三节 实验结果  73-81
    一、Clonidine抑制CA1区兴奋性突触后电位  73
    二、Guanfacine抑制CA1区兴奋性突触后电位  73-74
    三、Clonidine不影响CA1区LTP的诱导和维持  74
    四、Guanfacine不影响CA1区LTP的诱导和维持  74-81
  第四节 讨论  81-83
  第五节 参考文献  83-85
综述(附录1)  85-110
学习期间已发表或待发表的文章(附录2)  110-111
致谢  111-113
论文独创性声明  113

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中图分类: > 生物科学 > 生理学 > 神经生理学
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