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尸食性蝇类的生物化学特征用于死后间隔时间推断的基础研究

作　者: 朱光辉
导　师: 胡萃
学　校: 浙江大学
专　业: 农业昆虫与害虫防治
关键词: 法医昆虫学 死后间隔时间 尸食性蝇类 日龄推断 种类鉴别 巨尾阿丽蝇、大头金蝇 丝光绿蝇 绯颜裸金蝇 棕尾别麻蝇 肥须亚麻蝇 幼虫 蛹 空蛹壳 成虫 表皮碳氢化合物 蝶啶荧光 血淋巴蛋白 尿酸
分类号: Q966
类　型: 博士论文
年　份: 2003年
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引　用: 7次
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内容摘要


死亡时间（或死后间隔时间）的推断在刑事案件的侦破中有着重要意义。它的推断以往主要依据尸体上昆虫的区系演替、形态变化，及发育历期等。但这些指标有时难以真实反映昆虫所处的生长发育阶段，如蝇类离食期幼虫的体长和形态变化均不明显，易造成推断误差。其实，昆虫生长发育过程中内在的有关生化物质组成与含量是呈现有一定变化规律的，若能揭示这种规律，即有望弥补以往推断指标的某些缺陷，更易采用仪器进行规范测定，减少人为误差。为此，本文特对不同种尸食性蝇类生长发育过程中表皮碳氢化合物、蝶啶、血淋巴可溶性蛋白和尿酸等的变化规律进行了较系统的测定分析，进而分析了这些变化规律用于幼虫、蛹或成虫日龄推断的可行性及推断方法。此外，也探讨了表皮碳氢化合物在蝇蛹和空蛹壳种类鉴别中的应用。主要结果如下： 1 六种尸食性蝇类幼虫表皮碳氢化合物组成的时间特征 应用气相色谱和气-质联用，分别测定了6种蝇类（巨尾阿丽蝇、大头金蝇、丝光绿蝇、绯颜裸金蝇、棕尾别麻蝇和肥须亚麻蝇）幼虫表皮碳氢化合物组成及其含量的时间变化。通过对不同组份及其含量与日龄关系的逐步多元回归分析，筛选出适合不同蝇类幼虫日龄推断的组份。其中，巨尾阿丽蝇的色谱峰为p14（未知组份）、p33（正二十五烷）、p49（二十七烯b）和p79（正三十一烷）；大头金蝇为p2（未知组份）和p54（正三十一烷）；丝光绿蝇为p8（二十二烯a）、p34（3-甲基-二十五烷）和p56（2-甲基-二十八烷）；绯颜裸金蝇为p15（7-甲基-二十三烷）、p41（正二十八烷）和p45（二十九烷）；棕尾别麻蝇为p16（未知组份）和p25（11-，13-，15-甲基-三十一烷）；肥须亚麻蝇为p3（未知组份）、p4（二十三烯）和p23（未知组份）。此外，建立了相应的数学模型，用于不同蝇类幼虫日龄的准确推断。 2 温度对巨尾阿丽蝇幼虫表皮碳氢化合物组成时间特征的影响及日龄推断模型的建立 巨尾阿丽蝇幼虫表皮碳氢化合物组份色谱峰，即p30（二十五烯a）、p33（正二十五烷）、p48（二十七烯a）、p49（二十七烯b）和p79（正三十一烷）含量与幼虫日龄呈极显著相关，且在不同恒温（16、20、24和28℃）下的变化趋势基本一致。通过对这些组份的含量(xpn)与温度及幼虫日龄进行非线性参数拟合与优化，建立了以色谱峰p30、p33、p48、p49和p79组份为变量，依赖温度（T）变化的可用于准确推断不同温度下巨尾阿丽蝇幼虫日龄（D）的数学模型： D=217.23／（T+1.54）×(1-2.264×xp30-0.8632×xp33-2.454×xp48-6.619×xp49-1.948×xp79)，R2=0.9118。3 六种尸食性蝇蛹表皮碳氢化合物组成的时间特征及其在种类鉴别 中的应用 应用气相色谱和气－质联用，分别测定了6种蝇类，即巨尾阿丽蝇、大头金蝇。丝光绿蝇、绊颜裸金蝇、棕尾别麻蝇和肥须亚麻蝇蛹表皮碳氢化合物组成及其含量的时间变化。蝇蛹表皮碳氢化合物主要为直链烷烃、单甲基烷和少量的烯烃，其中不同蝇类蛹表皮碳氢化合物组成差异较大，而其日龄时间特征在各蝇中均并不明显。通过对不同蝇类蛹表皮碳氢化合物组成含量进行判别分析，筛选出适用于这6种蝇类鉴别的8个组份，即色谱峰p15(未知＼ pl6(h十三烷＊ p54(正H十七烷L p59门－甲基－二十七烷L p70(正二十九烷L p73门－，13－，15－甲基－二十九烷L p79（正三十烷）和 p86（正三十一烷人 并建立相应的典型判别函数。4表皮碳氢化合物在六种尸食性蝇类空蛹壳种类鉴别中的应用 应用气相色谱和气－质联用，分别测定了6种蝇类，即巨尾阿丽蝇、大头金蝇、丝光绿蝇、绊颜裸金蝇、棕尾别麻蝇和肥须亚麻蝇空蛹壳表皮碳氢化合物的组成。蝇蛹空壳中的表皮碳氢化合物主要为直链烷烃、单甲基烷以及少量的烯烃和二甲基烷。通过判别分析，筛选出适用于这6种蝇类鉴别的8个组份，即色谱峰pl（正二十三烷）、p7（9一，门一，13－甲基二十五烷）、pZI（11，u一Z 9，u一二甲基一二十六烷）、p24（正二十八烷入 p4门，11－二甲基－二十九烷）、p42门－甲基－二十九烷入 p46Q－甲基－三十一烷）和p引(未知人 并建立了相应的典型判别函数。5蝶淀荧光分析的方法学研究 以大头金蝇为试材，就蝇类头壳蝶陡含量荧光分析的最适条件作了探索。随着待测样品溶液浓度的提高，蝶陡荧光值呈先增高后降低的单峰变化，其中当样品浓度为0t3 3头壳／ml时，荧光值为最高。这表明高浓度蝶唆存在荧光浓度茬灭效应。样品浓度在0刀3～0．33头壳／ml范围内时，荧光强度与浓度呈极显著线性相关。延长光照及放置时间均可导致荧光强度显著升高。建议样品溶液测定终浓度为0刀3－0二7头壳／ml，并尽可能减少样品准备与测定时间，注意避光，以减少试验误差。6温度和日龄对六种尸食性蝇类头壳蝶淀含量的影响 应用荧光分光光度计，研究了温度和日龄对巨尾阿丽蝇、大头金蝇、丝光绿蝇、绊颜裸金蝇、棕尾别麻蝇和肥须亚麻蝇成虫蝶陡含量的影响。结果表明，在各种蝇类成虫中，日龄、温度和性别对头壳蝶睫含量均有显著影响，其中以日龄的影响最大。在各恒温下，各种蝇类成虫头壳蝶陡含量与日龄均呈

全文目录


致谢  5-12
中文摘要  12-15
英文摘要  15-19
前言  19-21
第一部分 文献综述  21-40
  第一章 死亡时间推断的法医学方法  22-25
    1 根据尸体物理变化推断  22-23
    2 根据尸体生理反应的强度推断  23
    3 根据死后生化变化推断  23-24
    4 根据与尸体联系的动植物存在状况的变化推断  24
    5 根据死亡发生时死者或环境的状态推断  24-25
  第二章 尸食性蝇类发育生物学在死后间隔时间推断中的应用  25-30
    1 日龄指标及其时间动态  25-27
      1．1 卵期  26
      1．2 幼虫期  26
      1．3 蛹期  26-27
      1．4 成虫期  27
    2 生长发育的影响因素  27-30
      2．1 温度  27-28
      2．2 食物  28
      2．3 种内及种间竞争  28-29
      2．4 毒物  29
      2．5 蛆团效应  29
      2．6 其它因素  29-30
  第三章 尸体上昆虫区系演替在死后间隔时间推断中的应用  30-33
    1 概念及基本原理  30
    2 尸体上昆虫区系的主要类群及其基本演替规律  30-31
    3 尸体上昆虫区系演替的影响因素  31-33
      3．1 地理位置对昆虫种类组成的影响  31
      3．2 影响尸体分解的因素  31
      3．3 影响昆虫到达尸体的因素  31-32
      3．4 影响昆虫生长发育的因素  32-33
  第四章 昆虫日龄推断的生物化学方法  33-40
    1 蝶啶在蝇类成虫日龄推断中的应用  33-39
      1．1 蝶啶含量的测定方法  33
      1．2 成蝇头壳蝶啶含量的影响因素  33-35
      1．3 日龄推断模型的建立及应用  35-38
      1．4 研究进展  38-39
    2 表皮碳氢化合物在昆虫日龄推断中的应用  39-40
      2．1 研究方法  39
      2．2 已有研究结果  39-40
第二部分 试验研究  40-148
  第一章 六种尸食性蝇类幼虫表皮碳氢化合物组成的时间特征  41-67
    1 材料与方法  41-42
      1．1 供试虫源及取样方法  41-42
      1．2 表皮碳氢化合物的提取  42
      1．3 表皮碳氢化合物的分析  42
      1．4 数据分析  42
    2 结果  42-44
      2．1 巨尾阿丽蝇  42-43
      2．2 大头金蝇  43
      2．3 丝光绿蝇  43
      2．4 绯颜裸金蝇  43
      2．5 棕尾别麻蝇  43
      2．6 肥须亚麻蝇  43-44
    3 讨论  44-67
  第二章 温度对巨尾阿丽蝇幼虫表皮碳氢化合物组成时间特征的影响及日龄推断模型的建立  67-81
    1 材料与方法  67-68
      1．1 供试虫源及取样方法  67
      1．2 表皮碳氢化合物的提取和分析  67
      1．3 数据分析  67-68
    2 结果  68
      2．1 各温度下表皮碳氢化合物组成的时间特征  68
      2．2 日龄推断模型的建立  68
    3 讨论  68-81
  第三章 六种尸食性蝇蛹表皮碳氢化合物组成的时间特征及其在种类鉴别中的应用  81-104
    1 材料与方法  81-82
      1．1 供试虫源及取样方法  81
      1．2 表皮碳氢化合物的提取和分析  81
      1．3 数据分析  81-82
    2 结果  82-102
      2．1 表皮碳氢化合物的组成  82
      2．2 表皮碳氢化合物组成的日龄特征  82-100
        2．2．1 巨尾阿丽蝇  82-83
        2．2．2 大头金蝇  83
        2．2．3 丝光绿蝇  83
        2．2．4 绯颜裸金蝇  83
        2．2．5 棕尾别麻蝇  83
        2．2．6 肥须亚麻蝇  83-100
      2．3 表皮碳氢化合物组成的判别分析  100-102
    3 讨论  102-104
  第四章 表皮碳氢化合物在六种尸食性蝇类空蛹壳种类鉴别中的应用  104-112
    1 材料与方法  104
      1．1 供试虫源及取样方法  104
      1．2 表皮碳氢化合物的提取和分析  104
      1．3 数据分析  104
    2 结果  104-111
      2．1 表皮碳氢化合物的组成  104-108
      2．2 表皮碳氢化合物组成的判别分析  108-111
    3 讨论  111-112
  第五章 蝶啶荧光分析的方法学研究  112-116
    1 材料与方法  112-113
      1．1 供试虫源  112
      1．2 仪器  112
      1．3 方法  112-113
    2 结果  113-114
      2．1 蝶啶溶液对其荧光的浓度萃灭效应  113
      2．2 蝶啶荧光分析的线性范围  113
      2．3 光照和放置时间对蝶啶溶液荧光强度的影响  113-114
      2．4 两种灵敏度间蝶啶荧光值的换算  114
    3 讨论  114-116
  第六章 温度和日龄对六种尸食性蝇类成虫蝶啶含量的影响  116-127
    1 材料与方法  116-117
      1．1 供试虫源  116
      1．2 取样方法  116
      1．3 蝶啶荧光分析  116-117
      1．4 数据分析  117
    2 结果  117-125
      2．1 巨尾阿丽蝇  117-118
      2．2 大头金蝇  118-120
      2．3 丝光绿蝇  120-121
      2．4 绯颜裸金蝇  121-122
      2．5 棕尾别麻蝇  122-124
      2．6 肥须亚麻蝇  124-125
    3 讨论  125-127
  第七章 蝶啶荧光分析法在自然温度下尸食性蝇类成虫日龄推断中应用  127-135
    1 材料与方法  127-128
      1．1 供试虫源  127
      1．2 取样方法  127
      1．3 蝶啶荧光分析  127
      1．4 日龄推断  127-128
      1．5 数据分析  128
    2 结果  128-133
      2．1 巨尾阿丽蝇  128-129
      2．2 大头金蝇  129-130
      2．3 丝光绿蝇  130-131
      2．4 绯颜裸金蝇  131-132
      2．5 棕尾别麻蝇  132-133
    3 讨论  133-135
  第八章 巨尾阿丽蝇幼期血淋巴可溶性蛋白组成的时间特征  135-140
    1 材料与方法  135
      1．1 供试虫源  135
      1．2 血淋巴的收集  135
      1．3 梯度SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳  135
    2 结果  135-136
    3 讨论  136-140
  第九章 棕尾别麻蝇幼虫尿酸含量和体重的时间动态  140-144
    1 材料与方法  140-141
      1．1 供试虫源和取样方法  140
      1．2 尿酸含量测定方法  140
      1．3 数据分析  140-141
    2 结果  141-143
      2．1 尿酸含量的时间动态  141-142
      2．2 体重的时间动态  142-143
    3 讨论  143-144
  第十章 总讨论  144-148
参考文献  148-154
附录  154-181

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中图分类: > 生物科学 > 昆虫学 > 昆虫生物化学
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