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胆囊结石患者胆囊动力学变化相关研究

作　者: 胡明秋
导　师: 王鹏志；刘彤；李卫东
学　校: 天津医科大学
专　业: 外科学
关键词: 胆囊结石动力学胆囊收缩素受体 mRNA转录蛋白表达胆汁胆固醇
分类号: R657.4
类　型: 博士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：探讨胆囊动力学异常在胆囊结石形成中的作用,为明确保胆取石手术适应证提供依据。方法：50例胆囊结石病人(病例组)和20例健康人(正常对照组),采用B超测定空腹胆囊壁厚度、空腹胆囊容积、餐后30min、60 min、90 min胆囊餐后残余容积,计算胆囊排空容积EV、胆囊残余指数RF和胆囊排空率E。病例组以正常对照组平均RF+2SD值(40.18%)为界限,分为胆囊收缩“正常”组(n=12)和胆囊收缩“减弱”组两个亚组(n=38)。结果：1)正常对照组胆囊壁厚度0.15±0.03cm,胆囊排空率(71.88±6.03)%。根据参数可信区间的计算方法,正常健康人胆囊壁厚度95%的可信区间为0.09-0.21 cm,胆囊排空率95%的可信区间为59.82%-83.94%。2)病例组胆囊壁厚度0.31±0.05cm,胆囊排空率(48.65±15.81)%,与正常对照组比较均有显著差异(P<0.05)。3)胆囊结石患者胆囊收缩“正常”组胆囊壁厚度0.28±0.05 cm,胆囊收缩“减弱”组胆囊壁厚度0.32±0.05 cm,与正常对照组比较,均有显著差异(P<0.05),胆囊收缩“正常”组与胆囊收缩“减弱”组胆囊壁厚度比较也有显著差异(P<0.05)。4)胆囊结石患者胆囊收缩“减弱”组与胆囊收缩“正常”组比较,虽然FV没有明显差异(P>0.05),但胆囊收缩“减弱”组最小残余容积增大(P<0.05),胆囊排空率降低(P<0.05)。胆囊结石患者胆囊收缩“正常”组与正常对照组比较,虽然排空率没有明显差异,但胆囊收缩“正常”组空腹胆囊容积明显增大(P<0.05)。5)病例组胆囊结石患者的胆囊排空率与胆囊壁厚度二者呈显著负相关,Y=106.695-185.270X,r=-0.617,P=0.000；对照组胆囊排空率与胆囊壁厚度二者无相关,Y=77.846-38.986X,r=-0.184,P=0.437。结论：胆囊排空障碍是胆囊结石形成的动力学基础之一,为临床用药防止胆囊结石形成及复发、保胆取石术手术适应证的选择提供了理论依据。我们认为保胆取石术应具备的基本条件是胆囊排空率>50%,胆囊壁厚度≤0.3cm。目的：探讨胆囊结石患者胆囊收缩素(CCK)-A受体mRNA转录水平和受体分布、定位及蛋白表达水平。方法：50例胆囊结石患者(病例组)和20例无胆囊结石肝移植供体(供体组)胆囊标本,采用RT-PCR方法测定胆囊标本CCK-A受体分子mRNA转录水平,采用酶免疫组织化学法研究胆囊CCK-A受体的分布和定位,测定胆囊标本CCK-A受体分子蛋白表达水平。结果：1)供体组胆囊CCK-A受体分子mRNA转录水平0.8182±0.0481,病例组mRNA转录水平0.6465±0.0910,两组比较有明显差异(P<0.01)。2)胆囊CCK-A受体分子不仅在胆囊平滑肌细胞表达,而且在腺上皮细胞也有明显表达。蛋白表达阳性细胞中,细胞核与细胞浆均有表达。3)与供体组相比,病例组免疫组化染色5个高倍视野中腺上皮细胞、平滑肌细胞蛋白表达阳性细胞数明显减少,两组比较有显著差异(P<0.01)。4)供体组胆囊CCK-A受体分子蛋白表达水平(蛋白表达阳性细胞总数)和mRNA转录水平呈正相关,Y=-458.027+975.883X,r=0.741,P=0.000；病例组胆囊CCK-A受体分子蛋白表达水平(蛋白表达阳性细胞总数)和mRNA转录水平也呈正相关,Y=-43.193+414.018X,r=0.644,P=0.000。结论：1)胆囊收缩素与胆囊CCK-A受体结合,不仅调节胆囊平滑肌收缩,而且还调节胆囊腺上皮细胞的分泌功能。2)胆囊CCK-A受体属于胞核和胞质受体(胞内受体)。3)胆囊结石患者CCK-A受体分子mRNA转录水平和蛋白表达水平较低。4)胆囊结石患者胆囊CCK-A受体分子蛋白表达水平降低与mRNA转录水平下调是一致的。目的：探讨胆囊结石患者胆囊CCK-A受体分子mRNA转录水平和蛋白表达水平对胆囊收缩功能的影响。方法：同第二部分研究。结果：1)将病例组患者的两个亚组(胆囊收缩“正常”组12例和收缩“减弱”组38例)进行比较,胆囊收缩“减弱”组CCK-A受体mRNA转录水平显著低于胆囊收缩“正常”组(0.6279±0.0900比0.7055±0.0680,P<0.01)；即使是胆囊收缩“正常”的胆石病患者,胆囊CCK-A受体mRNA转录水平也较无胆囊结石的供体组减少(0.7055±0.0680比0.8182±0.0481,P<0.01)。2)供体组20例,胆囊平滑肌细胞蛋白表达阳性7例、强阳性13例,而病例组50例,平滑肌细胞蛋白表达弱阳性24例、阳性22例、强阳性4例,二者比较有显著差异(P<0.01)。病例组和供体组胆囊平滑肌CCK-A受体蛋白表达阳性细胞数比较也有显著差异(P<0.01)。将病例组的两个亚组进行比较,胆囊收缩“减弱”组胆囊平滑肌CCK-A受体分子蛋白表达阳性强度和阳性细胞数显著低于无胆囊结石的供体组(P<0.01);即使是胆囊收缩“正常”的胆囊结石患者,胆囊平滑肌CCK-A受体分子蛋白表达阳性强度和阳性细胞数也较无胆囊结石的供体组低(P<0.05)。胆囊收缩“减弱”组和胆囊收缩“正常”组胆囊平滑肌CCK-A受体分子蛋白表达水平比较,表达阳性强度有显著差异(P<0.05),但蛋白表达阳性细胞数无差异(P>0.05)。3)病例组胆囊CCK-A受体mRNA转录水平与胆囊壁厚度二者呈显著负相关,Y=0.965-1.019X,r=-0.582,P=0.000;病例组胆囊平滑肌CCK-A受体蛋白表达水平(平滑肌蛋白表达阳性细胞总数)与胆囊壁厚度二者呈显著负相关,Y=193.784-246.306X,r=-0.419,P=0.002.4)病例组胆囊排空率与胆囊CCK-A受体mRNA转录水平二者呈显著正相关,Y=-37.558+133.493X,r=0.778,P=0.000；病例组胆囊排空率与胆囊平滑肌CCK-A受体蛋白表达水平(平滑肌蛋白表达阳性细胞总数)二者呈显著正相关Y=13.725+0.300X,r=0.587,P=0.000。结论：胆囊结石患者CCK-A受体分子1nRNA转录水平和蛋白表达水平与胆囊壁厚度、胆囊排空率存在数量上的相关关系,CCK-A受体分子mRNA转录水平和蛋白表达水平的差异可能是影响胆囊收缩功能的关键因素。目的：探讨胆囊结石患者胆汁胆固醇浓度对胆囊CCK-A受体分子mRNA转录水平和蛋白表达水平的影响。方法：采用酶法测定胆汁胆固醇浓度,其余方法同第二、三部分研究。结果：1)供体组胆汁胆固醇浓度6.68±1.75mmol/L,病例组胆汁胆固醇浓度9.40±2.33mmol/L,二者比较有显著差异(P<0.01)。将病例组患者的两个亚组进行比较,胆囊收缩“减弱”组胆汁胆固醇浓度显著低于胆囊收缩“正常”组,P<0.05,但胆囊收缩“正常”组胆汁胆固醇浓度和无胆囊结石的肝移植供体供体组比较,无显著差异,P>0.05。2)胆囊壁厚度与胆汁胆固醇浓度二者呈显著正相关,Y=0.186+0.014X,r=0.608,P=0.000.3)病例组胆囊排空率与胆汁胆固醇浓度二者呈显著负相关,Y=98.686-5.314X,r=-0.795,P=0.000。4)供体组CCK-A受体mRNA转录水平与胆汁胆固醇浓度二者呈显著负相关,Y=0.961-0.021X,r=-0.776,P=0.000:病例组CCK-A受体mRNA转录水平与胆汁胆固醇浓度二者也呈显著负相关,Y=0.934-0.031X,r=-0.786,P=0.000。5)供体组胆囊CCK-A受体总蛋白表达水平(腺上皮和平滑肌细胞蛋白表达阳性细胞总数)与胆汁胆固醇浓度呈负相关,Y=523.268-27.358X,r=-0.757,P=0.000；病例组胆囊CCK-A受体总蛋白表达水平(腺上皮和平滑肌细胞蛋白表达阳性细胞总数)与胆汁胆固醇浓度也呈负相关,Y=365.440-15.000X,r=-0.599,P=0.000.6)供体组胆囊平滑肌CCK-A受体蛋白表达水平(平滑肌蛋白表达阳性细胞数)与胆汁胆固醇浓度呈负相关,Y=301.824-19.120X,r=-0.667,P=0.001;病例组胆囊平滑肌CCK-A受体蛋白表达水平(平滑肌蛋白表达阳性细胞数)与胆汁胆固醇浓度也呈负相关,Y=190.866-7.887X,r=-0.603,P=0.000.结论：1)胆囊结石患者的胆汁胆固醇浓度高于无胆囊结石的人,尤其是胆囊收缩功能差的胆囊结石患者,胆汁胆固醇浓度明显升高。2)胆囊的慢性炎症与胆汁胆固醇浓度有关。3)无论是胆囊结石患者,还是非胆囊结石的肝移植供体,胆囊CCK-A受体分子mRNA转录水平和蛋白表达水平随着胆汁胆固醇浓度的高低而下调或上调,表明胆汁胆固醇可能是胆囊收缩功能障碍的始动因素,降低胆汁高胆固醇浓度可以促进胆囊动力功能的恢复,为预防结石的形成或复发提供了理论基础。

全文目录

中文摘要  4-8
Abstract  8-16
缩略语  16-17
前言  17-21
  研究现状、成果  18-19
  研究目的、方法  19-21
一、胆囊结石形成的动力学研究  21-34
  1.1 对象与方法  21-23
    1.1.1 研究对象  21
    1.1.2 研究方法  21-23
  1.2 结果  23-26
    1.2.1 正常对照组胆囊壁厚度及收缩功能  23
    1.2.2 病例组胆囊壁厚度及收缩功能  23
    1.2.3 病例组和正常对照组胆囊壁厚度和胆囊收缩功能比较  23
    1.2.4 胆囊排空率与胆囊壁厚度的相关分析  23-26
  1.3 讨论  26-33
    1.3.1 胆囊结石形成的分子病理机制  26-27
    1.3.2 胆囊收缩功能的检查  27-28
    1.3.3 胆囊结石患者的胆囊收缩功能  28-31
    1.3.4 保胆取石术手术适应证的选择  31-33
  1.4 小结  33-34
二、胆囊CCK-A受体的分子生物学研究  34-56
  2.1 对象与方法  34-46
    2.1.1 研究对象  34
    2.1.2 方法  34-46
  2.2 结果  46-52
    2.2.1 病例组与供体组胆囊CCK-A受体分子mRNA转录水平  46
    2.2.2 胆囊CCK-A受体免疫组化染色结果  46-50
    2.2.3 病例组与供体组胆囊CCK-A受体分子蛋白表达水平  50
    2.2.4 胆囊CCK-A受体分子蛋白表达水平和mRNA转录水平相关分析  50-52
  2.3 讨论  52-55
    2.3.1 胆囊结石患者CCK-A受体分子mRNA转录水平  52
    2.3.2 胆囊CCK-A受体的分布和定位  52-54
    2.3.3 胆囊结石患者的CCK-A受体分子蛋白表达水平  54-55
  2.4 小结  55-56
三、胆囊收缩素受体表达水平对胆囊收缩功能的影响  56-69
  3.1 对象与方法  56-57
    3.1.1 研究对象  56
    3.1.2 方法  56-57
  3.2 结果  57-62
    3.2.1 不同收缩功能的胆囊CCK-A受体分子表达水平比较  57-59
    3.2.2 胆囊CCK-A受体表达水平与胆囊壁厚度的相关分析  59
    3.2.3 胆囊排空率与胆囊CCK-A受体表达水平相关分析  59-62
  3.3 讨论  62-68
    3.3.1 胆囊收缩功能的调节  62-63
    3.3.2 CCK-A受体分子mRNA转录水平对胆囊收缩功能的影响  63-65
    3.3.3 CCK-A受体分子蛋白表达水平对胆囊收缩功能的影响  65-66
    3.3.5 胆囊慢性炎症对CCK-A受体的影响  66-68
  3.4 小结  68-69
四、胆汁胆固醇浓度对胆囊收缩素受体的影响  69-83
  4.1 资料与方法  69-72
    4.1.1 研究对象  69
    4.1.2 方法  69-72
  4.2 结果  72-78
    4.2.1 病例组与供体组胆汁胆固醇浓度  72
    4.2.2 病例组胆囊壁厚度与胆汁胆固醇浓度的相关分析  72
    4.2.3 病例组胆囊排空率与胆汁胆固醇浓度相关分析  72-74
    4.2.4 胆囊CCK-A受体mRNA转录水平与胆汁胆固醇浓度的相关分析  74
    4.2.5 胆囊CCK-A受体总蛋白表达水平与胆汁胆固醇浓度的相关分析  74-76
    4.2.6 胆囊平滑肌CCK-A受体蛋白表达与胆汁胆固醇浓度相关分析  76-78
  4.3 讨论  78-82
    4.3.1 胆囊结石患者的胆汁胆固醇浓度  78
    4.3.2 胆汁胆固醇对胆囊炎症的影响  78-79
    4.3.3 胆汁胆固醇对CCK-A受体分子mRNA转录水平的影响  79
    4.3.4 胆汁胆固醇对CCK-A受体分子蛋白表达水平的影响  79-81
    4.3.5 防治胆囊结石的展望  81-82
  4.4 小结  82-83
全文结论  83-84
论文创新点  84-85
参考文献  85-95
发表论文  95-96
综述胆囊结石形成的胆囊动力学研究进展  96-107
  综述参考文献  103-107
致谢  107

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