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新疆哈萨克族食管鳞癌miR-34a基因甲基化改变及其意义

作　者: 赵志敏
导　师: 李锋；潘晓琳
学　校: 石河子大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 食管鳞癌 miR-34a 甲基化 MALDI-TOF MS
分类号: R735.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:检测新疆哈萨克族食管癌miR-34a基因甲基化状态,探讨miR-34a基因甲基化与新疆哈萨克族食管癌之间的关系及意义。方法:运用基质辅助激光解析电离时间飞行质谱（MALDI-TOF-MS）技术检测59例新疆哈萨克族食管鳞癌、32癌旁非癌组织及34例正常食管黏膜中miR-34a基因甲基化状态;运用Cluster3.0、TreeView以及GraphPad Prism 5.0软件对miR-34a基因在三组样本中甲基化分布状态进行分析;SPSS 17.0软件完成统计学分析。结果:（1）miR-34a基因在新疆哈萨克族食管鳞癌、癌旁非癌组织中甲基化水平高于正常对照组（2）miR-34a基因15个CpG单位中有11个（CpG₁.2,CpG₃,CpG₄,CpG₅,CpG₆,CpG₈.9,CpG₁4.15.16,CpG₁7.18,CpG₁9,CpG₂0,CpG₂3）在三组样本中的甲基化分布差异具有统计学意义（p<0.05）。而miR-34a基因CpG₂,CpG₃,CpG₄,CpG₁1,CpG₁2在癌旁非癌组织中甲基化率高于食管癌组,且差异具有统计学意义（p<0.05）。（3）在食管癌淋巴结转移比较中,miR-34a基因CpG₅、CpG₈.9在转移组中甲基化率高于淋巴结非转移组,且差异均具有统计学意义（p<0.05）;在食管癌不同临床分期比较中,miR-34a基因CpG₈.9在Ⅲ期+Ⅳ甲基化率高于I期+Ⅱ期,且差异具有统计学意义（p <0.05）;在HPV16感染组与非感染组比较中,但miR-34a CpG₁.2,CpG₆在HPV16感染组中甲基化率高于非感染组,且差异具有统计学意义（p <0.05）。而miR-34a基因甲基化在与性别、年龄、肿瘤发生部位、大体类型、不同分化程度比较中,差异均无统计学意义（p >0.05）。结论:（1）新疆哈萨克族食管鳞癌及癌旁miR-34a基因甲基化率高于及正常对照组,提示miR-34a基因甲基化可能与新疆哈萨克族食管癌的发生有关。而miR-34a基因CpG₂,CpG₃,CpG₄,CpG₁1,CpG₁2位点高甲基化状态的改变可能是食管癌发生的早期分子事件。（2）miR-34a基因CpG₅、CpG₈.9甲基化可能与新疆哈萨克族食管鳞癌淋巴结转移相关,淋巴结转移组中甲基化率高;miR-34a基因CpG₈.9甲基化则可能与新疆哈萨克族食管鳞癌临床分期相关,在肿瘤中晚期甲基化率高,提示其可能与肿瘤的进展有关;miR-34a基因CpG₁.2,CpG₆甲基化率在HPV16感染组中高于非感染组,提示其可能与HPV16感染存在一定的相关性并参与了食管癌的发生。

全文目录

中文摘要  6-7
英文摘要  7-8
英文缩略语表  8-9
前言  9-11
材料与方法  11-27
  1. 材料  11-15
  2. 方法  15-25
    2.1 临床病理学研究内容和方法  15
    2.2 基因组DNA 制备  15-17
    2.3 HPV16 感染检测  17-18
    2.4 MALDI-TOF MS 技术甲基化检测  18-25
  3. 实验室质量控制方法  25-26
  4. 统计学分析  26-27
结果  27-34
  1. 临床病理特征分析  27-29
  2. HPV16 检测结果  29-30
  3. miR-34a 基因甲基化检测结果  30-34
    3.1 EpiTYPER v1.0.5 软件甲基化分析结果  30
    3.2 miR-34a 基因在正常、癌旁及食管癌中甲基化分布状态  30-31
    3.3 miR-34a 基因在正常、癌旁及食管癌组织中甲基化比较结果  31
    3.4 miR-34a 基因甲基化与新疆哈萨克族食管癌病理特征之间的关系  31-34
讨论  34-40
结论  40-41
参考文献  41-44
文献综述  44-48
  参考文献  47-48
附录：新疆哈萨克族食管癌临床病理资料一览表  48-50
致谢  50-51
作者简介  51-52
导师评语  52

新疆哈萨克族食管鳞癌miR-34a基因甲基化改变及其意义

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