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大白菜核不育基因分子标记研究

作　者: 于娜娜
导　师: 张鲁刚
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 蔬菜学
关键词: 大白菜 RAPD标记 SCAR标记 MAS 转育方案
分类号: S634.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 36次
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内容摘要

大白菜(Brassica campestris L.ssp.pekinensis)是原产于我国的特产蔬菜,由于其细胞核雄性不育遗传复杂,转育难度大成为阻碍其广泛应用的瓶颈。分子育种技术为大白菜雄性不育系的利用提供了新的途径,本研究以西北农林科技大学园艺学院白菜课题组选育的大白菜核不育杂交一代和回交一代为研究对象,进行了基因型鉴定、分子标记及转育方案研究,主要取得了以下结果:1、明确了大白菜自交系05S781和05S938的基因型为MsfMsf ;05S1719的基因型为msms;06J32的基因型为msms或Msfms。2、利用80个RAPD引物对材料09H12的可育池DNA和不育池DNA进行PCR扩增,其中8个引物(S61、S145、S179、S258、S567、S761、S1250、S1398)不能扩增出任何带型;4个引物(S184、S927、S1211、S1327)可以在可育池DNA和不育池DNA中检测到差异带存在,但是重复验证中差异条带消失,稳定性差;其余68个引物在可育株DNA池和不育株DNA池中能分别扩增出2条到7条不等的DNA条带,但是在两个DNA池内找不到差异条带。3、依照已经报道的相关引物序列设计了5对SCAR引物,经过检测发现只有引物scr01在09H12群体的不育池和可育池中之间存在明显的多态性,在不育DNA池中可扩增出差异条带syau-scr01,而在可育DNA池中则不能得到该差异条带。进一步在09H12群体的337个单株中进行检测,经计算在09H12群体中,syau-scr01与不育基因的遗传距离为2.15cM。利用标记syau-scr01对群体09H2、09H3、09H5、09H6、09H7、09H11的可育植株基因组DNA进行检测,结果显示,所有可育株的不育位点上均未检测到有syau-scr01标记。4、根据“06J32”的基因型,结合syau-scr01标记设计了两种转育方案,以期在后续试验中得到新的甲型两用系、乙型两用系和新核不育系。同时,利用syau-scr01标记在自交系05S781和05S938的杂交后代中选择带有不育基因的可育株,通过测交、杂交与标记选择结合得到新的核不育系;在后期选育过程中,通过建立msms、Msfms、MsfMsf三个DNA池,可以筛选得到与可育基因相关的新标记。

全文目录

摘要  5-6
ABSTRACT  6-10
第一章文献综述  10-20
  1.1 大白菜雄性不育遗传规律研究进展  10-15
    1.1.1 细胞核雄性不育类型(GMS)  11-14
    1.1.2 白菜核质互作雄性不育类型(CMS)  14-15
  1.2 大白菜分子标记研究进展  15-18
    1.2.1 分子标记发展进程  15-17
    1.2.2 大白菜分子标记研究进展  17-18
  1.3 分子标记辅助育种研究进展  18-19
  1.4 本研究的目的意义  19-20
第二章大白菜核不育材料基因型鉴定  20-23
  2.1 材料  20
  2.2 方法  20
  2.3 结果与分析  20-21
    2.3.1 杂交一代群体的育性调查结果  20-21
    2.3.2 回交一代和F2 群体育性调查结果  21
  2.4 讨论  21-23
第三章大白菜核不育基因的RAPD 标记分析  23-27
  3.1 材料  23
    3.1.1 试材  23
    3.1.2 酶及试剂  23
    3.1.3 主要仪器  23
  3.2 方法  23-24
    3.2.1 大白菜幼叶DNA 的提取与纯化  23-24
    3.2.2 引物筛选  24
    3.2.3 扩增产物的检测  24
  3.3 结果与分析  24-25
    3.3.1 大白菜基因组DNA 的质量检测  24-25
    3.3.2 RAPD 标记分析  25
  3.4 讨论  25-27
第四章大白菜核不育SCAR 标记验证  27-32
  4.1 材料  27
    4.1.1 植物材料  27
    4.1.2 酶及试剂  27
    4.1.3 主要仪器  27
  4.2 方法  27-28
    4.2.1 DNA 的提取与纯化  27
    4.2.2 引物设计及SCAR 扩增  27-28
    4.2.3 扩增产物的检测与数据处理  28
  4.3 结果与分析  28-31
    4.3.1 SCAR 标记在核不育09H12 群体中的适用性检测  28-30
    4.3.2 其他分离群体中可育株不育位点Ms 基因的检测  30-31
  4.4 讨论  31-32
第五章 SCAR 标记辅助的大白菜雄性不育系转育  32-35
  5.1 材料  32
  5.2 转育方案设计  32-33
    5.2.1 转育获得06J32 的甲型两用系、乙型两用系和新核不育系  32-33
    5.2.2 全可育材料05S781、05S938 的定向转育  33
  5.3 讨论  33-35
第六章结论  35-36
参考文献  36-41
致谢  41-42
作者简介  42

大白菜核不育基因分子标记研究

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