学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

核心结合因子a1在染氟成纤维细胞中的表达及其意义

作　者: 申曜明
导　师: 井玲
学　校: 吉林大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 成纤维细胞株(L929) 核心结合因子a1(Cbfa1) 骨钙素(OCN) 骨形态发生蛋白2(BMP-2) I型胶原(Col I) 骨周软组织化骨成纤维细胞胶原网架
分类号: R595
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 33次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

骨周软组织钙化和骨化是慢性氟中毒重要的骨病变之一。本研究组曾应用体外单层细胞(二维)培养方法,系统观察了氟对骨周软组织中的重要细胞成分—成纤维细胞(fibroblast, FB)成骨功能的诱导作用,认为氟通过某种途径刺激了FB的成骨潜能,使其表达成骨细胞(osteoblast,OB)表型,发挥成骨功能,导致骨周软组织化骨改变。本文将在上述研究的基础上,建立FB胶原网架(fibroblasts populated collagen lattice,FPCL),探讨在三维培养条件下,氟对FB中cbfa1、OCN、BMP-2和Col I等表达的影响,并比较分析在二维和三维两种细胞培养体系中,染氟FB成骨表型表达和成骨功能等变化的趋势及意义。以小鼠成纤维细胞株(L929)为实验对象,应用ELISA、免疫组化和RT-PCR等方法,检测三维培养体系中,FB cbfa1、BMP-2从mRNA到蛋白的表达以及OCN和Col I蛋白含量变化。结果表明:①高剂量组(20 mg/L)氟对cbfa1 mRNA的表达具有一定的刺激增强作用,多个氟剂量组FB在不同时间段cbfa1蛋白含量增加;②氟作用48 h的10 mg/L和96 h的1 mg/L组BMP-2蛋白含量明显增加;③染氟促进FB OCN和Col I蛋白含量明显增加;④氟对两种细胞培养体系中FB的刺激作用具有相似趋势。本实验结果进一步证明了在氟化物可促进cbfa1、BMP-2等表达增强进而刺激FB的成骨功能,为氟骨症及其他相关疾病的骨周软组织化骨发生机制的研究提供了重要佐证。

全文目录

内容提要  5-7
英文缩略词表  7-8
第一章、绪论  8-20
  一、核心结合因子a1  8-12
  二、骨形态发生蛋白-2  12-16
  三、骨钙素  16-18
  四、氟化物诱导成纤维细胞成骨功能的研究  18-20
第二章、材料与方法  20-29
  一、主要试剂和仪器  20-22
  二、成纤维细胞株（L929）三维培养  22-23
  三、免疫组化（IHC）方法检测cbfa1、BMP-2、OCN、Col I 的阳性表达  23-24
  四、酶联免疫吸附法（ELISA）测定培养细胞上清液中cbfa1 等蛋白含量  24-25
  五、RT-PCR 法检测染氟FB BMP-2 及cbfa1 mRNA 的表达  25-28
  六、统计学分析  28-29
第三章、实验结果  29-38
  一、ELISA 检测结果  29-31
  二、IHC 检测结果  31-33
  三、RT-PCR 检测结果  33-35
  四、二维和三维细胞培养FB 染氟实验结果比较  35-38
第四章、讨论  38-44
  一、氟化物刺激 FB 成骨表型表达在氟骨症骨周软组织化骨中的作用  38-39
  二、三维培养体系中氟对 FB 中 cbfa1 表达的作用  39-40
  三、氟刺激 FB 中 BMP-2 mRNA 和蛋白的表达  40-41
  四、氟刺激 FB 中 OCN 蛋白的表达  41-42
  五、氟刺激 FB 中 Col I 蛋白的表达  42-44
结论  44-45
参考文献  45-51
附图  51-53
中文摘要  53-56
Abstract  56-59
致谢  59

核心结合因子a1在染氟成纤维细胞中的表达及其意义

内容摘要

全文目录

相似论文