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小干扰RNA对LNCaP细胞CXCR4基因表达的影响

作　者: 刘先艮
导　师: 肖亚军；邢毅飞
学　校: 华中科技大学
专　业: 泌尿外科
关键词: 前列腺癌小干扰RNA LNCaP细胞 CXC趋化因子受体4 基因表达
分类号: R737.25
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

目的:研究小干扰RNA(siRNA)对前列腺癌(Prostate cancer,Pca)细胞株LNCaP细胞中CXC趋化因子受体4(CXCR4)mRNA表达的影响。方法:选择人CXCR4基因的一个靶点,体外合成siRNA的DNA模板,经退火后插入到质粒Psilencer 2.1-U6 neo载体的多克隆位点,构建siRNA表达载体。重组表达质粒在脂质体Lipofectamine 2000介导下转染人前列腺癌细胞株LNCaP细胞,用RT-PCR方法检测重组体对CXCR4 mRNA表达水平的影响。实验设立空白对照组、阴性对照Psilencer-C转染组、和目的组Psilencer-siCXCR4转染组。结果:经酶切、测序证明重组质粒Psilence-siCXCR4构建成功;该重组体转染LNCaP 48小时后, RT-PCR检测结果显示CXCR4/β-actin条带光密度比值分别为:空白对照组为0.61±0.03;阴性对照组为0.59±0.04;目的组为0.15±0.01。空白对照组与阴性对照组比较差异无统计学意义(P﹥0.01),目的组分别与空白对照组、阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01);其抑制率为(75.00±3.16)%,表明LNCaP细胞中CXCR4 mRNA表达受到明显抑制。结论:本实验所设计的RNA干扰序列、构建的RNA干扰重组体有效地抑制了前列腺癌细胞株LNCaP细胞中CXCR4 mRNA的表达,与我们的预期结果一致。我们结果与许多国内外的研究结果相符。说明RNA干扰对LNCaP细胞中CXCR4 mRNA的表达有明显抑制作用。为进一步运用RNA干扰技术研究SDF-1/ CXCR4通路与前列腺癌骨转移的关系提供了一定的基础

全文目录

一中英缩略词对照表  4-6
二中文摘要  6-7
三英文摘要  7-8
四前言  8-10
五实验研究  10-31
  5.1 试剂与器材  10-12
  5.2 实验方法  12-18
  5.3 统计学方法  18-19
  5.4 实验结果  19-21
  5.5 附图  21-25
  5.6 讨论  25-31
六综述 1  31-39
七参考文献 1  39-43
八综述 2  43-49
九参考文献 2  49-53
十致谢  53

小干扰RNA对LNCaP细胞CXCR4基因表达的影响

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