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DC负载抗原诱导CIK特异性杀伤NDV修饰抗原的胃癌细胞动物实验

作　者: 代震波
导　师: 毛伟征
学　校: 青岛大学
专　业: 普外科
关键词: 胃肿瘤抗原免疫治疗 CIK 动物模型
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

目的：探讨利用树突状细胞(Dendric cells,DC)负载抗原诱导的细胞因子诱导杀伤细胞(Cytokine induced cells,CIK)对裸鼠体内经新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)修饰抗原的胃癌细胞的杀伤作用，探索一种新的临床胃癌免疫治疗方法。方法：取健康成人外周血分离单个核细胞(PBMC)，用于诱导培养DC细胞及CIK细胞，用流式细胞仪测定确定它们的表型。反复冻融法制备胃癌细胞SGC-7901抗原，用于致敏DC细胞。部分CIK细胞与负载SGC-7901细胞抗原的DC共培养，制备负载抗原的DC致敏的CIK细胞(Ag-DC-CIK)，部分CIK细胞单独培养。体外培养胃癌SGC-7901，PBS液调整浓度为5×10~7／ml，每只裸鼠皮下注射0.2ml建立胃癌裸鼠模型，分为以下四组进行试验：①空白对照组：注射PBS；②Ag-DC-CIK组：注射Ag-DC-CIK；③CIK+NDV组：先注射NDV修饰胃癌细胞表面抗原，然后注射CIK；④Ag-DC-CIK+NDV组：先注射NDV修饰胃癌细胞表面抗原，后注射Ag-DC-CIK。观察裸鼠体内胃癌瘤体体积大小、计算抑瘤率。实验结束时切除肿瘤后常规病理切片，HE染色，观察肿瘤坏死情况。结果：治疗组瘤体平均体积分别为：Ag-DC-CIK组1.86cm~3，NDV+CIK组1.83cm~3，NDV+Ag-DC-CIK组0.78 cm~3，三组瘤体体积之间比较有显著统计学意义(F=48.538，P＜0.001)，其中NDV+Ag-DC-CIK组与其它两组比较均有显著统计学意义(P＜0.001)，Ag-DC-CIK组与NDV+CIK组比较无统计学意义(P=0.862)；3组治疗组荷瘤小鼠的抑瘤率分别为29.81％、30.94％及70.57％；对荷瘤小鼠瘤体病理切片坏死面积进行评分：Ag-DC-CIK组平均为1.4；NDV+CIK组为1.6；NDV+Ag-DC-CIK组为2.4。三组小鼠瘤体病理切片坏死面积评分之间比较有显著统计学意义(F=11.278，P＜0.001)。NDV+Ag-DC-CIK组与NDV+CIK组及Ag-DC-CIK组比较均有统计学意义(P值分别为0.011和0.035)。NDV+CIK和Ag-DC-CIK组两组之间比较无统计学意义(P=0.572)。结论：未致敏的CIK细胞对经NDV修饰抗原的胃癌肿瘤杀伤效果欠佳。在胃癌细胞抗原未经NDV修饰的情况下，Ag-DC-CIK对其杀伤效果欠佳。Ag-DC-CIK对经NDV修饰抗原的胃癌肿瘤的杀伤效果最佳，提示利用NDV修饰胃癌抗原后，再用负载抗原的DC致敏的CIK细胞杀伤肿瘤具有较好的临床应用前景。

全文目录

摘要  2-3
Abstract  3-6
引言  6-8
第一章材料与方法  8-12
  1.1 材料  8-9
  1.2 实验方法  9-11
  1.3 统计学处理  11-12
第二章结果  12-14
  2.1 DC和CIK形态学观察及鉴定  12
  2.2 特异性CIK对胃癌SGC-7901的裸鼠体内抑制效果  12-14
第三章讨论  14-18
第四章结论  18-19
参考文献  19-23
附图  23-29
综述  29-39
附录  39-40
中英文对照  40-41
致谢  41-42

DC负载抗原诱导CIK特异性杀伤NDV修饰抗原的胃癌细胞动物实验

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