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PLGA-Ⅱ型胶原材料复合rhBMP-2/bFGF修复兔关节软骨缺损的实验研究

作　者: 黄春华
导　师: 查振刚
学　校: 暨南大学
专　业: 外科学
关键词: 聚丙交酯—乙交酯重组人骨形态发生蛋白碱性成纤维细胞生长因子关节软骨缺损修复
分类号: R687
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

目的：探讨经Ⅱ型胶原涂层改性后的PLGA材料(PLGA-Ⅱ型胶原)用作生长因子rhBMP-2和bFGF载体来修复兔膝关节软骨缺损的可行性和有效性。初步探讨生长因子rhBMP-2和bFGF之间在修复兔膝关节软骨缺损中的协同作用机制。方法：将45只成年新西兰兔随机分成A、B、C、D、E五个组，每组各9只，用在兔右侧膝关节内侧髁钻孔的方式来建立软骨缺损模型，A组植入PLGA-Ⅱ型胶原／rhBMP-2+bFGF复合物，B组植入PLGA-Ⅱ型胶原／rhBMP-2复合物，C组植入PLGA-Ⅱ型胶原／bFGF复合物，D组植入单纯PLGA-Ⅱ型胶原支架材料，E组未植入任何材料。将A、B、C组统称为实验组，D、E组统称为对照组。分别于术后4周，8周，12周处死动物，每个时间点每组处死3只动物，取下股骨远端关节面行病理组织学观察并对各组行O’Driscoll组织学评分；用免疫组织化学的方法检测第12周A～E组Ⅱ型胶原生长情况并应用Leica QWIN图像分析系统对切片着色程度进行量化分析；用透射电镜观察第12周A～E组软骨细胞的大小、形态、核浆比、细胞器功能状态。结果：大体及镜下观察发现A、B、C实验组对软骨缺损的修复都有不同程度的促进作用，实验组(A组、B组、C组)与对照组(D组、E组)相比，O’Driscoll组织学评分有统计学意义(P＜0.05)；实验A组与实验B组、实验C组相比，O’Driscoll组织学评分有统计学意义(P＜0.05)；对照D组与对照E组相比，O’Driscoll组织学评分没有统计学意义(P＞0.05)。术后12周时缺损修复组织细胞外基质Ⅱ型胶原免疫组化染色显示：着色程度实验A组、B组、C组与对照D组、E组之间有显著性差异(P＜0.05)；实验A组与实验B组、实验C组之间有显著性差异(P＜0.05)。结论：三种带生长因子的复合体材料对软骨缺损的修复都有明显的促进作用，修复效果：实验A组优于实验B组与实验C组，PLGA-Ⅱ型胶原复合物可用作生长因子rhBMP-2和bFGF的载体材料。生长因子rhBMP-2、bFGF对软骨缺损的修复均有促进作用，rhBMP-2和bFGF在适量的剂量(0.5mg：50ng)下存在着协同作用。

全文目录

中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
前言  10-15
  一、rhBMP-2，bFGF对软骨细胞的作用  10-11
  二、聚丙交酯-乙交酯、Ⅱ型胶原与组织工程支架材料  11-13
  三、关节软骨缺损的治疗方法  13-15
材料和方法  15-23
  1. 实验材料  15
    1.1 实验动物  15
    1.2 主要试剂  15
    1.3 仪器和设备  15
  2. 实验方法  15-23
    2.1 多孔圆柱状 PLGA材料  15-16
    2.2 胶原及生长因子在多孔圆柱状 PLGA材料中的引入  16-17
    2.3 动物实验  17-18
    2.4 取材和观察  18-22
    2.5 统计学方法  22-23
结果  23-30
  1. PLGA载体支架材料的观察  23
  2. 修复膝关节软骨缺损动物实验观察  23-30
    2.1 一般情况  23
    2.2 大体解剖观察  23-24
    2.3 组织HE染色、甲苯胺蓝染色光镜观察  24-28
    2.4 Ⅱ型胶原免疫组化检测结果  28-29
    2.5 透射电镜观察  29-30
讨论  30-36
  1. 聚丙交酯—乙交酯、Ⅱ型胶原对兔膝关节软骨缺损修复的作用  30-31
  2. rhBMP-2对兔膝关节软骨缺损修复的作用  31-32
  3. bFGF对兔膝关节软骨缺损修复的作用  32-33
  4. rhBMP-2，bFGF对兔膝关节软骨缺损修复的协同作用  33-36
结论  36-37
英文缩略词  37-38
参考文献  38-43
发表论文  43-44
致谢  44-45
附图  45-55

PLGA-Ⅱ型胶原材料复合rhBMP-2/bFGF修复兔关节软骨缺损的实验研究

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