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纤维蛋白胶角膜细胞片及其对结膜上皮黏合作用的研究

作 者: 梁晓东
导 师: 陈建苏
学 校: 暨南大学
专 业: 眼科学
关键词: 角膜 纤维蛋白胶 组织工程细胞片 细胞培养 结膜 
分类号: R77
类 型: 硕士论文
年 份: 2007年
下 载: 94次
引 用: 1次
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内容摘要


目的:(1)研究角膜上皮、基质及内皮细胞体外培养的生物学特性,探索和改进这3种细胞体外培养的方法,为组织工程角膜的构建奠定基础;(2)观察兔角膜3种细胞在体外构建的纤维蛋白胶薄膜表面的生长状态,探讨以纤维蛋白胶制备组织工程细胞片的可行性;(3)研究纤维蛋白胶对结膜上皮的黏合作用,探讨纤维蛋白胶行无缝线自体结膜瓣移植治疗翼状胬肉的可行性。方法:(1)采用组织块法、消化法分离培养兔角膜上皮、基质和内皮细胞,观察细胞贴壁生长情况,同时对生长良好的原代细胞进行消化传代,进一步观察传代细胞的形态和生长情况;(2)将培养扩增的兔角膜3种细胞分别接种于纤维蛋白胶薄膜表面,待细胞生长融合后,利用细胞刮铲刮取角膜细胞片,采用倒置显微镜,HE染色和扫描电子显微镜,观察兔角膜3种细胞在纤维蛋白胶表面生长情况;(3)结膜黏合手术选用20只雄性新西兰白兔,根据不同术式分为3组:暴露组;植片原位移植组;仿翼状胬肉术式组。观察术后结膜上皮组织黏合情况、炎症反应、上皮化及瘢痕形成情况。结果:(1)兔角膜上皮、基质和内皮细胞均在培养24h-48h内贴壁生长,在培养6d-9d能形成良好单层,细胞形态典型,进行多次传代后细胞仍维持原有形态和功能,获得的细胞能进行长期培养;(2)制备的纤维蛋白胶薄膜光滑、透明,随培养细胞的生长部分降解,可获得仅带少许纤维蛋白胶的细胞片。角膜3种细胞在纤维蛋白胶表面生长良好,可保持生理状态的细胞形态。角膜上皮细胞可形成单层和复层,细胞间连接紧密。角膜内皮细胞呈圆形或多角形,细胞大小一致,排列紧密。角膜基质细胞拉长生长,呈三角形或树枝状,细胞间连接明显,可形成网状连接;(3)植片原位移植组与仿翼状胬肉术式组术后炎症反应较轻,2w内均实现完全上皮化,组织切片显示瘢痕组织形成较少。织工程角膜细胞片;(3)纤维蛋白胶作为一种安全有效的黏合剂,在结膜瓣移植中应用可有效缩短手术时间,减轻术后炎症反应,减少瘢痕组织形成。

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中图分类: > 医药、卫生 > 眼科学
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