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大肠埃希菌CTX-M型ESBLs研究

作　者: 赵晓丽
导　师: 胡大春
学　校: 昆明医学院
专　业: 临床检验诊断学
关键词: 超广谱β-内酰胺酶耐药性接合实验基因型大肠埃希菌
分类号: R450
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 96次
引　用: 1次
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内容摘要

产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum beta-lactamases，ESBLs)是导致肠杆菌科细菌对第三代头孢菌素和单酰胺类抗生素耐药的常见的机制，ESBLs是指由质粒介导的能赋予细菌水解头孢菌素类、单酰胺类抗生素以及青霉素类药物的一类β-内酰胺酶，主要由大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生。产ESBLs的细菌呈世界性流行，由于不同国家、地区、医院使用的抗菌药物不同，流行的ESBLs基因型也各不相同，根据基因同源性不同，ESBLs可分为五大类：TEM型、SHV型、CTX-M型、OXA型和其他型，而我国为CTX-M酶的高发区。为了解我院产ESBLs大肠埃希菌中CTX-M基因型的分布情况，我们对昆明市第一人民医院临床标本分离所得的197株大肠埃希菌，进行ESBLs的耐药表型和水平传播情况及CTX-M基因分布情况的研究。本研究中，对2005年1月—2005年12月昆明市第一人民医院临床分离的197株大肠埃希菌，用表型确证试验检测ESBLs，用Kirby-Bauer琼脂扩散法做药物敏感试验；用接合试验了解产ESBLs基因是否定位于质粒，并对接合子进行K-B法药敏试验和ESBLs表型确证。采用聚合酶链反应(PCR)对供体菌和接合子进行CTX-M酶基因型的检测，其扩增引物包括CTX-M-1组、CTX-M-2组、CTX-M-8组、CTX-M-9组、CTX-M-25组，并对PCR产物测序确定其基因亚型。结果显示，197株大肠埃希菌中，共检出产ESBLs菌104株，检出率为52.79％。除亚胺培南和阿米卡星外，产ESBLs菌株对其他15种抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株(P＜0.01)。104株产ESBLs菌株中有91株符合供体菌的标准，结果有64株接合成功，接合子均确证产ESBLs，其接合率为70.33％。PCR扩增结果示104株产ESBLs大肠埃希菌中共有98株携带CTX-M基因，检出率为94.23％，其中有38株检出blaCTX-M-1组基因，检出率为36.54％，有69株检出blaCTX-M-9组基因，检出率为66.35％，64株接合子中共有51株携带CTX-M基因，检出率为79.69％，其中有18株检出blaCTX-M-1组基因，检出率为28.13％，有35株检出blaCTX-M-9组基因，检出率为54.69％。基因测序确定，存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15、CTX-M-14、CTX-M-27五种基因亚型，以CTX-M-14为主。CTX-M-2组、8组和25组的引物未检出阳性基因菌株。本研究表明，昆明市第一人民医院大肠埃希菌产ESBLs情况和耐药质粒水平传播情况严重，产ESBLs细菌的基因型以CTX-M-14、CTX-M-22为主，同时存在CTX-M-28、CTX-M-15和CTX-M-27等多种亚型。

全文目录

中文摘要(Abstract in Chinese)  5-7
英文摘要(Abstract in English)  7-9
缩略语表  9-11
引言(Introduction)  11-16
第一部分产ESBLs大肠埃希菌的耐药表型及水平传播研究  16-30
  1.材料与方法  16-20
  2.结果  20-26
  3.讨论  26-30
第二部分产ESBLs大肠埃希菌CTX-M型耐药基因分析  30-44
  1.材料与方法  30-32
  2.结果  32-40
  3.讨论  40-44
结论(Conclusion)  44-45
参考文献(References论文部分)  45-49
综述(Review)  49-61
  参考文献(综述部分)  58-61
攻读学位期间发表文章情况(Published paper)  61-62
致谢(Acknowledgements)  62-63
附图  63-70

大肠埃希菌CTX-M型ESBLs研究

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