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一种新型辅酶Q10脂质载体系统在抗皮肤老化方面的研究

作　者: 岳扬
导　师: 段明星
学　校: 清华大学
专　业: 生物学
关键词: 辅酶Q10 纳米结构脂质载体紫外线抗氧化剂透皮吸收
分类号: R758.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

皮肤光老化是皮肤衰老的重要原因之一,日光紫外线主要是通过诱导皮肤细胞产生活性氧自由基和氧化压力来损伤细胞和皮肤。辅酶Q10(CoQ10)是一种极具潜力的抗氧剂,然而由于其自身的难溶性特性限制了它在抗紫外线引起的皮肤光老化方面的应用。纳米结构脂质载体系统(NLC)是一种新型的给药系统,具有增加药物溶解能力、提高制剂稳定性、增强皮肤渗透能力和降低刺激性等优点。本课题的主要目的是设计并制备一种新型的经皮纳米给药系统来运载CoQ10,并对其各类功能性质进行研究和评价,期望能够得到一种高效、靶向、安全的经皮给药系统。为改善CoQ10在保护皮肤免受紫外线损伤方面的抗氧化效果,本课题制备了辅酶Q10纳米脂质载体系统(CoQ10-NLC)。同时,对制备的载药系统进行初步的物理化学性质的研究。利用激光散射仪、冷冻蚀刻电镜和低温冷冻电镜等技术研究了CoQ10-NLC的粒径、形貌和结构等特征。为更真实、准确的模拟自然状态的光老化,本课题采用人胚胎皮肤成纤维细胞(ESF-1)来建立体外细胞紫外损伤模型,ESF-1是一种原代培养的人皮肤细胞。对比添加普通CoQ10乳液组细胞,添加CoQ10-NLC的细胞在细胞活力、细胞形态和核形态方面都有明显的提高和改善。此外,添加CoQ10-NLC的细胞丙二醛(MDA,细胞膜脂质过氧化产物)水平只有添加CoQ10乳液组的61.5%。对比空白对照组,有CoQ10-NLC保护的细胞的超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性分别提高了81%和75%。在通过体外的细胞试验研究CoQ10-NLC载药系统在抗氧化方面的能力后,本课题又利用大鼠的背部皮肤作为模型来探讨其体内皮肤渗透性能。通过观察荧光染料尼罗红的特征荧光在皮肤纵切面上的分布来评估CoQ10-NLC克服皮肤屏障能力并在皮肤中的渗透效果,结果证明CoQ10-NLC较普通乳液具有更强的皮肤渗透能力。

全文目录

摘要  3-4
Abstract  4-10
第1章引言  10-30
  1.1 皮肤结构  10-13
    1.1.1 表皮  10-11
    1.1.2 真皮  11-12
    1.1.3 皮肤附属器及皮下组织  12-13
  1.2 皮肤光老化  13-18
    1.2.1 皮肤光老化及临床表现  13-14
    1.2.2 光老化分子机制  14-17
    1.2.3 光老化的治疗  17-18
  1.3 辅酶Q10 研究现状  18-23
    1.3.1 辅酶Q10  18-20
    1.3.2 辅酶Q10 清除自由基机制  20
    1.3.3 辅酶Q10 应用  20-23
  1.3 纳米药物和给药系统的新进展  23-28
    1.3.1 纳米给药系统  23-24
    1.3.2 经皮给药系统  24-27
    1.3.3 纳米结构脂质载体系统  27-28
  1.4 研究目的和研究内容  28-30
    1.4.1 研究目的  28
    1.4.2 研究内容  28-30
第2章样品的制备和表征  30-37
  2.1 材料与仪器  30-31
    2.1.1 试剂  30-31
    2.1.2 仪器  31
  2.2 实验方法  31-33
    2.2.1 样品制备  31-32
    2.2.2 粒径测定  32
    2.2.3 形貌观察  32-33
    2.2.4 稳定性测试  33
    2.2.5 Nile Red 标记CoQ10-NLC 荧光光谱研究  33
  2.3 结果与讨论  33-36
    2.3.1 CoQ10-NLC 的粒径、形貌特征及稳定性  33-34
    2.3.2 CoQ10-NLC Cryo-TEM 观察结果  34-35
    2.3.3 Nile Red 标记CoQ10-NLC 三维荧光光谱  35-36
  2.4 小结  36-37
第3章 CoQ10-NLC 体外抗氧化能力研究  37-61
  3.1 材料与仪器  38-39
    3.1.1 试剂  38
    3.1.2 主要仪器  38
    3.1.3 细胞  38-39
  3.2 实验方法  39-47
    3.2.1 细胞培养  39
    3.2.2 MTT 实验  39-40
    3.2.3 H_20_2 诱导方法和细胞损伤模型的建立  40-41
    3.2.4 UVA 诱导方法和细胞损伤模型的建立  41-42
    3.2.5 丙二醛（MDA）含量的测量  42
    3.2.6 细胞抗氧化酶活性测定  42-46
    3.2.7 细胞毒性试验  46
    3.2.8 胞内活性氧（ROS）水平检测  46
    3.2.9 细胞凋亡观察  46-47
    3.2.10 数据处理  47
  3.3 结果与讨论  47-58
    3.3.1 H_20_2 诱导ESF-1 细胞  47-51
    3.3.2 UVA 诱导ESF-1 细胞  51-57
    3.3.3 细胞毒性试验  57-58
  3.4 讨论  58-59
  3.5 小结  59-61
第4章 CoQ10-NLC 皮肤渗透性研究  61-66
  4.1 材料与仪器  61-62
    4.1.1 材料  61
    4.1.2 仪器  61-62
  4.2 实验方法  62-63
    4.2.1 样品配制  62
    4.2.2 样品透皮试验方法  62-63
    4.2.3 皮肤组织切片和荧光观察  63
  4.3 实验结果  63-64
  4.4 小结与讨论  64-66
第5章结论与展望  66-68
  5.1 结论  66-67
  5.2 展望  67-68
参考文献  68-74
致谢  74-75
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果  75

一种新型辅酶Q10脂质载体系统在抗皮肤老化方面的研究

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